雪梨止咳糖浆联合布地奈德福莫特罗治疗儿童咳嗽变异性哮喘的临床研究

目的探讨雪梨止咳糖浆联合布地奈德福莫特罗吸入剂治疗儿童咳嗽变异性哮喘的临床疗效。方法选取2018年6月—2019年11月在天津市宁河区医院治疗的110例咳嗽变异性哮喘患儿作为研究对象,按照随机数字表法将全部患儿分为对照组和治疗组,每组各55例。对照组雾化吸入布地奈德福莫特罗吸入剂,1吸/次,2次/d。治疗组在对照组基础上口服雪梨止咳糖浆,5 mL/次,3次/d。两组患儿连续治疗4周。观察两组的控制率,比较两组的咳嗽消失时间、气喘消失时间、哮鸣音消失时间、日间咳嗽评分、夜间咳嗽评分、肺功能和诱导痰白细胞介素-6(IL-6)、组织中P物质(SP)、嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)水平。结果治疗后,治疗组的控制率(92.73%)明显高于对照组(78.18%),差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组的咳嗽消失时间、气喘消失时间、哮鸣音消失时间比对照组短,差异有统计学意义(P0.05)。治疗后,两组的日间咳嗽评分、夜间咳嗽评分明显低于治疗前(P0.05);且治疗组的日间咳嗽评分、夜间咳嗽评分比对照组低(P0.05)。治疗后,两组患者第一秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1/用力肺活量(FVC)明显升高(P0.05),且治疗组FEV1、FEV1/FVC较对照组升高的更明显(P0.05)。治疗后,两组患者诱导痰的IL-6、SP、ECP明显降低(P0.05),且治疗组IL-6、SP、ECP较对照组降低的更明显(P0.05)。结论雪梨止咳糖浆联合布地奈德福莫特罗吸入剂可提高小儿咳嗽变异性哮喘的疗效,减轻患儿的咳嗽症状,改善肺功能,减轻炎症反应,具有一定的临床研究价值。     

黄粉虫幼虫抗肿瘤细胞K562抗菌肽的分离纯化

目的从黄粉虫幼虫体内分离纯化具有抗肿瘤细胞K562的抗菌肽。方法通过超声诱导黄粉虫幼虫大量表达抗菌肽。然后经过研磨、离心、固相萃取、反相高效液相色谱分离纯化黄粉虫幼虫抗菌肽,采用四甲基偶氮噻唑蓝（MTT）比色法和光镜观察法筛选对K562有杀伤作用的抗菌肽。结果离心上清液上样固相萃取柱,经10％、30％、80％的乙腈水溶液洗脱,只有80％的乙腈水溶液分离组分有活性（P〈O．01）。该活性组分经反相高效液相色谱纯化后分离出5个具有抗肿瘤活性的峰物质,这5个峰活性都较强（P〈0．01）,其中峰9、峰4能初步确定为抗菌肽,其他3种有待于进一步的实验证明。结论黄粉虫幼虫体内存在抗肿瘤细胞K562的抗菌肽和抗菌物质,而且不止一种。     

抗菌肽的抗肿瘤作用研究进展

抗菌肽具有广谱抗细菌、真菌、病毒、寄生虫和肿瘤的活性.不同的抗菌肽具有不同的活性谱.该文综述了不同来源的抗菌肽对肿瘤细胞的抑制和杀伤作用及其机制,展望了抗菌肽抗肿瘤的应用前景.     

家蝇源抗K562活性物质的分离与纯化

为从家蝇Ⅲ龄幼虫体内提取具有抗K562细胞活性的物质,并对其组分化学性质及对人正常细胞的作用进行分析。本文用大肠杆菌诱导家蝇Ⅲ龄幼虫大量表达活性物质,然后通过研磨、离心、固相萃取法（SPE）初步分离活性物质,通过反相高效液相色谱（RP—HPLC）进一步纯化提取活性组分,通过四甲基偶氮噻唑蓝（Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT）比色法和光镜观察法相结合,筛选出对K562有抑制作用的活性组分,并鉴定其对人正常细胞293T的作用。结果显示,从家蝇Ⅲ龄幼虫体内分离出4个具有抑制K562细胞活性的多肽组分（峰5～8）,具有分离度高、纯度高等特点。当质量浓度为100ug／mL和作用时间为24h时,4个多肽组分均具有抗K562细胞的活性,其中峰5多肽组分和峰8多肽组分活性较强,对K562细胞的相对抑制率分别为48．52％和65．80％。结果表明,家蝇Ⅲ龄幼虫体内存在一些具有抗K562细胞活性的多肽,而且对人正常细胞几乎无杀伤作用。但是,这些多肽是否属于抗肿瘤肽还有待被证实。     

黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响及与羟基脲对细胞增殖抑制的比较

目的观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响;比较该抗菌肽与羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用。方法用流式细胞仪检测黄粉虫抗菌肽对K562细胞周期的影响。黄粉虫抗菌肽与羟基脲分别设置5个浓度组,用MTT比色法分别求出2种药物不同浓度对K562的抑制率,根据浓度和抑制率用SPSS软件求出回归方程和IC50。结果细胞周期G0/G1期和G2/M期细胞比例增加,S期细胞比例下降。其中只有G0/G1期和S期与对照组相比,差异具有统计学意义（P〈0.01）。说明抗菌肽可使细胞周期阻滞于G0/G1期,从而抑制S期DNA的合成。抗菌肽和羟基脲的IC50分别为29.98和3644.45μg/ml。结论抗菌肽可通过影响细胞周期来发挥抗K562细胞的作用。抗菌肽明显优于羟基脲对K562细胞的增殖抑制作用,有较好的应用前景。     

MTT比色法在弓形虫计数中应用

四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)比色法具有快速简便、灵敏、无同位素污染等优点,目前已被广泛用于活细胞的计数[1].弓形虫是一种单细胞原虫,目前主要采用血细胞计数法进行计数,不仅主观误差较大(可达20%～30%),而且在大规模计数时费时费力,因此,有必要寻找一种简便客观的计数方法.本实验将MTT法应用于弓形虫的计数,发现在一定浓度范围内虫数与吸光度有较好的相关性.     

家蝇抗菌肽体外抗弓形虫的效果观察

目的 观察家蝇幼虫和蛹抗菌肽对弓形虫速殖子的抑制作用. 方法 采用损伤加感染的方法,诱导家蝇幼虫和蛹大量产生抗菌肽,通过研磨、低温高速离心等方法获得抗菌肽粗提物,分别用磷酸缓冲液(PBS)调整为4 mg/ml、2 mg/ml和1 mg/ml并作用于弓形虫速殖子,24 h后,通过血细胞计数法和扫描电镜观察两种粗提物对弓形虫速殖子的抑制作用. 结果 幼虫抗菌肽组和蛹抗菌肽组速殖子存活率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其抗弓形虫作用随着抗菌肽浓度的减小而减小;扫描电镜观察,对照组弓形虫速殖子外型完整,表面平滑,抗菌肽组速殖子则虫体膨胀.表面凹凸不平. 结论 从家蝇幼虫和蛹中提取的抗菌肽都有抗弓形虫作用,幼虫抗菌肽效果更好.     

黄粉虫抗菌肽促K562细胞凋亡作用及其机制的研究

为观察黄粉虫抗菌肽对K562细胞线粒体膜电位及K562细胞凋亡蛋白半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的影响,进而探讨黄粉虫抗菌肽否是影响线粒体膜电位以及是否可以引起K562细胞凋亡,本文首先采用荧光探针罗丹明123 标记K562细胞,在激光扫描共聚焦显微镜下观察K562细胞中罗丹明123荧光强度,以细胞内荧光...     

家蝇幼虫抗茵肽对弓形虫速殖子DNA的损伤作用

目的从家蝇幼虫血淋巴中分离纯化出有抗弓形虫作用的抗菌肽，观察其对弓形虫速殖子DNA的损伤作用。方法通过损伤加感染的方法诱导家蝇幼虫大量表达抗菌肽，然后经过研磨、离心和层析等过程，分离纯化并筛选出抗弓形虫作用的抗菌肽，采用流式细胞术（FCM）分析其对弓形虫速殖子DNA含量的影响。结果通过DNA含量直方图可以看出，实验组的速殖子数少于对照组，且两组分布参数存在较明显差异。正常的弓形虫速殖子处于M1期的较M2期的少，抗菌肽组则相反，处于M1期的较M2期的多，且M1峰值明显前移。结论家蝇幼虫血淋巴中存在抗弓形虫作用的抗菌肽，其可通过抑制弓形虫DNA的合成杀伤弓形虫。