人类免疫缺陷病毒感染、结核分枝杆菌感染和共感染患者的CD8+T细胞耗竭状态

目的分析人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus, HIV)感染、结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)感染, 以及共感染患者的CD8+T细胞耗竭状态。方法纳入2019年8月至2020年1月无锡市第五人民医院和太仓市第一人民医院所收治的HIV感染和(或)MTB感染患者87例, 其中HIV感染18例, 活动性结核(active tuberculosis, ATB)34例, 潜伏性结核(latent tuberculosis, LTB)19例, HIV感染合并ATB 7例, HIV感染合并LTB 9例, 同时纳入11名健康对照者。收集所有受试者的外周血, 进行全血细胞表面染色和细胞内染色, 使用流式细胞术检测CD8+T细胞上的活化分子CD62配体、CD44、CD127, 转录因子脱中胚蛋白(eomesodermin, EOMES)、T细胞因子1(T cell factor 1, TCF-1)、T盒转录因子(T-box expressed in T cells, T-bet)、B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(B lympho...     

小鼠调节性树突状细胞分泌的外泌体诱导免疫耐受的实验研究

本研究探讨小鼠调节性树突状细胞（rDC）分泌的外泌体（regulatory exosomes，rDex）诱导免疫耐受的作用，并与正常未成熟树突状细胞的外泌体（immature exosomes，iDex）诱导免疫耐受的作用进行比较。取C57BL／6（H-2^b）小鼠骨髓细胞诱导未成熟树突状细胞（iDC），TGF—β1联合IL-10诱导调节性树突状细胞（rDC），流式细胞术检测两种DC的表型。采用超速离心结合膜超滤的方法分别提取rDex和iDex。建立小鼠皮肤移植模型．以C57BL／6小鼠为供者，以BALB／c（H-2^d）小鼠为受者，按对受者处理的不同实验分3组，iDex组术前7、3天受者经尾静脉注射10μg供者的iDex，rDex组术前7、3天受者经尾静脉注射10μg供者的rDex，另设PBS对照组，观察移植皮肤存活情况。通过单向混合淋巴细胞反应（MLR）观察供者及非亲缘异基因供者DBA／2对同种异基因小鼠T细胞增殖情况。结果表明：TGF—β1、IL-10可下调DC表面共刺激分子CD80、CD86、CD40的表达。移植皮片平均存活时间（MST），在对照组为7、8天，iDex组为10．7天，rDex组为18．8天；iDex组的移植皮片MST明显长于对照组（P〈0．05）；rDex组的移植皮片MST明显长于iDex组（P〈0．01）。MLR结果证明iDex组和rDex组B／C小鼠均对C57小鼠的脾细胞产生特异性耐受，尤其是rDex组；对非亲缘异基因DBA供者的脾细胞两组仍表现出强烈的免疫应答。结论：iDex和rDex均有诱导免疫耐受的作用，且rDex作用较iDex作用好。     

调节性DC分泌的外体诱导免疫耐受功能的体外研究

为了探讨树突状细胞(DC)分泌的外体(Dex)在诱导T细胞免疫耐受中的作用,体外研究采用供体Dex降低同种异体移植排斥的可能性。从正常人外周血单个核细胞中诱导培养未成熟DC(imDC),用TGF-β1联合IL-10诱导调节性DC,LPS诱导DC成熟。采用流式细胞术方法观察TGF-β1和IL-10对DC表型、吞噬功能的影响;采用超速离心和超滤的方法提纯Dex;Western blot方法检测imDC分泌的Dex(imDex)与调节性DC分泌的Dex(rDex)表达的相关分子;通过CCK-8法分析异源iDex和mDex在混合淋巴细胞反应(MLR)中的生物学功能,并比较rDex与iDex诱导免疫耐受的能力。结果显示,TGF-β1和IL-10可下调DC表面的共刺激分子CD80、CD83、CD86的表达,并诱导调节性DC分泌更多的rDex;异源的mDC分泌的Dex(mDex)在mDC存在时增强MLR,而异源的imDex在imDC存在时一定程度上抑制MLR,rDex诱导的抑制T细胞增殖作用显著强于iDex;rDex表达更多的FasL,提示TGF-β1和IL-10诱导的调节性DC分泌的rDex在免疫耐受中发挥重要作用,有望应用于同种异体移植抗免疫排斥。     

结核性胸膜炎患者结核特异性T淋巴细胞的免疫应答及其迁徙作用北大核心CSCD

目的比较结核性胸膜炎患者外周血和胸腔积液中结核特异性T淋巴细胞的免疫反应。方法收集2012年10月至2013年4月在无锡市第五人民医院住院的结核性胸膜炎初治患者12例。同时采集其外周血和胸腔积液,细胞内细胞因子染色和流式细胞术检测外周血和胸腔积液中CD4＋IFN-γ＋T淋巴细胞和CD8＋IFN-γ＋T淋巴细胞的比例。数据分析采用非参数Mann—Whitney检验和配对秩和检验。结果入选患者外周血分泌IFNy的CD4＋。T淋巴细胞占CD4＋T淋巴细胞总数的中位数为0．91％,而胸腔积液中则达3．63％,显著高于外周血,差异有统计学意义（U=17．00,p=0．0017）。进一步的配对秩和检验分析亦显示,胸腔积液中分泌IFN-γ的CD4＋T淋巴细胞比例与外周血相比有显著的升高趋势（P=0．0015）;而CD8＋。T淋巴细胞则无此变化趋势（P=0．9219）。结论在结核性胸膜炎的发病过程中,结核特异性CD4＋。T淋巴细胞从外周血迁徙至胸腔,在病变局部发挥抗结核免疫作用。     

临床药学专业医学统计学教学模式实例分析

临床药学是连接医学和药学的新兴学科,医学统计学是医学中重要的基础课之一,该文采用实例分析探讨临床药学专业医学统计学的教学模式问题,分析临床药学与医学统计学的特点,结果表明实例分析教学有助于临床药学专业学生认清医学统计学的学科特点,培养学生解决实际问题的能力,提高教师的引导能力。实例分析是适应临床药学专业需求的教学模式。     

HCV核心抗原动态监测抗HCV疗效的临床研究(英文)

Objective To evaluate the performance of Hepatitis C virus (HCV) core antigen and HCV RNA PCR in the determining of the efficacy of HCV antiviral therapy in patients infected with HCV.Methods HCV core antigen and HCV RNA were measured in sera of 35 chronic HCV infected Chinese patients.Concentrations of HCV core antigen and HCV RNA were analyzed at 5 time points before,during and at the end of antiviral therapy.Results This study showed that the HCV core antigen and HCV RNA concentrations in 35 HCV patients were significantly correlated.Decrease of HCV core antigen and HCV RNA concentrations at the 4th,12th,24th and 48th week were observed during the antiviral therapy.However,HCV core antigen levels at week 12 and 24 of therapy were significantly lower than those at week 4 (P<0.05).In contrast,no further decrease was observed in HCV RNA concentrations at weeks 12 and 24 (P>0.05).HCV core antigen testing may be advantageous in some cases,in particular,the low levels of HCV core antigen at week 4 may be predictive of satisfactory outcome of treatment.Conclusions HCV core antigen represents a stable and sensitive marker of viral replication and could be used to monitor the clinical efficacy of HCV antiviral therapy.     

环磷酰胺联合树突状细胞分泌的外泌体和PolyⅠ:C的抗肿瘤作用研究

目的观察树突状细胞(DC)分泌的外泌体(exosomes)与环磷酰胺(CTX)、PolyⅠ∶C联合应用的抗肿瘤效果。方法重组鼠粒细胞-单核细胞集落刺激因子诱导骨髓来源的造血干细胞分化为髓系树突状细胞,肿瘤细胞L1210的冻融抗原负载树突状细胞,以超速离心结合膜过滤的方法提取外泌体;用得到的外泌体在DC存在的情况下刺激T细胞,应用cck-8试剂盒测量T细胞的增殖;制备抗原特异性的细胞毒性T淋巴细胞(CTL),通过DIOC-18联PI的方法测定CTL对肿瘤的杀伤作用;L1210细胞接种小鼠,制备荷瘤小鼠模型,分为实验组(exosomes联合CTX和PolyⅠ∶C)和对照组(1.PBS组,2.CTX组,3.CTX+PolyⅠ∶C组4.exosomes组)作治疗,观察肿瘤的生长速度,小鼠的生存期。结果T细胞的增殖实验中,平均吸光度:实验组为0.90±0.22,对照组为0.53±0.13,差异具有统计学意义(P<0.05)。负载肿瘤抗原的exosomes刺激的CTL在体外能够特异性杀伤肿瘤细胞L1210,在效靶比分别为5∶1和10∶1时实验组的杀伤率分别为(21.19±3.99)%、(30.56±3.85)%,对照组的杀伤率分别为(17.54±4.48)%、(19.38±4.68)%,10∶1时实验组与对照组相比杀伤率差异具有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,实验组荷瘤小鼠的肿瘤生长速度明显降低,小鼠的生存期延长。结论经过肿瘤抗原负载的exosomes刺激的T细胞体外能够杀伤肿瘤细胞;exosomes联合CTX和PolyⅠ∶C能显著抑制荷瘤小鼠体内肿瘤的生长,延长荷瘤小鼠的生存期。     

γ-干扰素释放试验联合胸膜组织活检用于诊断结核性胸膜炎的评估

目的：评价全血γ-干扰素释放试验联合胸膜活检对结核性胸腔积液诊断的应用价值。方法应用全血γ-干扰素释放试验QuantiFERON-TB Gold In Tube（QFT-GIT）对79例胸腔积液患者进行检测,其中结核性胸腔积液患者45例,非结核性胸腔积液患者34例,结核合并肿瘤患者1例。同时,对其中27例患者进行胸腔镜下胸膜组织活检。结果结核性胸腔积液组,QFT-GIT的阳性率为91.1%（41/45）,非结核性胸腔积液组的阳性率为26.5%（9/34）。QFT-GIT试验诊断结核性胸腔积液的敏感性为91.1%（41/45）,特异性为73.5%（25/34）,阳性预测值为82.0%,阴性预测值为89.3%;胸膜组织活检诊断结核性胸膜炎的敏感性为96.3%（26/27）,特异性为100.0%（12/12）。联合胸膜活检诊断结核性胸膜炎的敏感性为95.5%（42/44）,特异性为94.1%（32/34）。结论全血γ-干扰素释放试验QFT-GIT联合胸膜组织活检用于诊断结核性胸腔积液具有较高的敏感性和特异性,在我国具有较高的临床应用价值。     

丙型肝炎病毒感染者血清核心蛋白水平与抗病毒治疗效果相关性分析

目的 探讨血清HCV核心蛋白与抗病毒治疗效果的相关性.方法 采用ELISA法检测162例丙型肝炎患者血清HCV核心蛋白量,采用荧光定量PCR检测HCV RNA;观察35例接受聚乙二醇干扰素+利巴韦林治疗的患者在治疗前、治疗4周、治疗24周、治疗48周时HCV RNA与HCV核心蛋白水平,比较两者血清水平随临床疗效变化的一致性.两组计量资料比较采用t检验,多组配对资料进行方差分析.结果 162例患者中56例HCV RNA≤1×103IU/mL,HCV核心蛋白吸光度(A)值为0.100±0.029;9例1×103IU/mL＜HCV RNA≤1×104 IU/mL,A值为0.246±0.213;11例1×104IU/mL＜HCV RNA≤1×105IU/mL,A值为0.235±0.179;28例1×105 IU/mL＜HCV RNA≤1×106IU/mL,A值为0.422±0.319;51例1×106IU/mL＜HCVRNA≤1×107IU/mL,A值为0.603±0.330;7例1×107IU/mL＜HCV RNA≤1×108IU/mL,A值为0.900±0.379.对HCV RNA与HCV核心蛋白水平进行相关性分析,结果呈正相关(r=0.36,P＜0.05).35例接受抗病毒治疗患者治疗前、治疗4周、治疗24周和治疗48周时的核心蛋白A值分别为0.564±0.296、0.144±0.062、0.091±0.035和0.112±0.103.与抗病毒治疗前比较,治疗4周、24周、48周患者血清HCV核心蛋白水平均明显下降(t=8.563、9.195、9.250,均P＜0.05);治疗4周与24周比较,差异也有统计学意义(t=4.301,P＜0.05).结论 在疾病进程及抗病毒治疗过程中血清HCV核心蛋白的量的变化与HCV病毒载量变化是平行的.