改良体外光化学疗法提高淋巴细胞凋亡诱导率

目的探讨改良体外光化学治疗(ECP)方法提高淋巴细胞凋亡诱导率的效果。方法以无菌离体移植肝供者脾脏作为实验材料,分别以改良和传统ECP方法制备供者脾脏淋巴细胞悬液(SP),所得SP经8-甲氧基补骨脂素(8-MOP)联合A波段长波紫外线(UVA)照射(PUVA)、8-MOP、UVA处理,并分别设对照组;不同处理的SP于37℃、50 mL/L CO2孵箱中培养过夜(6~8 h),通过观察细胞形态学改变并用流式细胞术检测凋亡率,比较各组间淋巴细胞凋亡率的差异。结果改良ECP方法制备的SP,经PUVA、8-MOP、UVA处理早期凋亡率和总凋亡率分别为(95.33±3.03)%和(97.10±2.12)%,(23.39±4.55)%和(36.32±6.63)%,(66.98±3.60)%和(68.65±4.35)%,与对照组(12.82±1.86%和13.4±2.65%)相比,差异显著,具有统计学意义(P0.01);传统ECP法各实验组早期及总凋亡率分别为(79.73±4.21)%和(82.70±4.13)%,(61.42±2.28)%和(68.91±2.18)%,(19.30±1.78)%和(28.06±1.88)%,(10.84±0.98)%和(12.77±1.22)%,组间比较差异显著,具有统计学意义(P0.01);改良法与传统ECP法相比,早期和总凋亡率有显著性差异(P0.01),而晚期凋亡率无显著性差异(P0.05)。结论改良型ECP方法可简便、安全、高效提高离体脾脏淋巴细胞早期凋亡率,为进一步研究ECP诱导的树突细胞免疫调节作用奠定基础。     

HCV感染与肾移植后糖尿病关系的荟萃分析

目的应用荟萃分析系统评价HCV感染是否为肾移植后糖尿病(PTDM)的相关危险因素。 方法系统检索中国期刊全文数据库、中国生物医学数据库、PubMed数据库、Embase数据库、Google scholar和Web of science database截至2019年12月公开发表的相关文献。应用Stata 15.1统计软件使用随机效应模型进行荟萃分析,计算相对危险度(RR)。 结果共纳入22篇文献,包含129 981例肾移植受者。荟萃分析结果显示,HCV感染的肾移植受者术后发生PTDM的风险为非HCV感染者的2.5倍(RR＝2.50, 95%CI: 1.95～3.20, P<0.001)。在亚洲、高加索和美洲人种中,HCV感染均为肾移植术后PTDM的危险因素。 结论HCV感染是促进肾移植术后发生PTDM的危险因素,感染者需尽早进行清除HCV的相关治疗。     

护理干预对胰肾联合移植患者血糖控制的影响研究

目的 门诊护理干预对接受胰肾联合移植患者血糖水平的影响。方法 将中国人民解放军总医院第八医学中心泌尿外科门诊随访的28例胰肾联合移植患者作为研究对象,将其分为观察组和对照组,各14例,其中对照组在门诊随访时进行护理和健康宣教等常规工作,观察组实施本研究特定的护理干预方法,6个月后评价两组患者饮食、运动、生活习惯依从性,疾病知识掌握程度以及血糖控制水平的指标结果,比较两组患者对护理服务的满意度。结果 观察组患者饮食、运动、生活习惯依从性和掌握疾病知识程度均优于对照组,血糖值低于对照组,且护理服务满意度优于对照组,差异均具有统计学意义（均P <0.05）。结论 门诊护理干预可以有效改善胰肾联合移植患者血糖水平,增强患者自护能力和遵医行为,提升护理服务满意度,值得临床推广应用。     

构建质量提升计划系统,促进器官移植转型发展

2015年以来,中国器官捐献与移植体系经过系统化建设,逐步走上科学化、规范化的健康发展轨道[1-2]。随着5年来国家对器官捐献与移植的监管和调整力度的加强,我国器官移植进入了新的发展时期——调整时期,这是自我调整和完善的过程,也是我们的事业日趋成熟、持续健康发展的过程。2019年中华医学会器官移植学年会提出,当前我国器官移植发展的总体目标是全面深化供给侧结构性改革,推动器官移植发展“由数量规模型向质量提升型转变”,促进器官移植科学、平衡、规范和高质量发展。     

人STN1蛋白结构、功能的生物信息学分析

目的 基于生物信息学分析人STN1蛋白的结构、功能.方法 从Uniprot数据库中获取人STN1蛋白氨基酸序列,使用ProtParam在线工具分析其理化性质,DNAMAN软件分析其亲/疏水性,通过Genecar网站查看其在细胞中的分布.分别通过PSIPRED网站、PDB数据库、Uniprot网站和NCBI Conser...     

器官移植排斥反应风险生物标志物研究进展

排斥反应是引起移植失败的最主要原因,目前临床采用的指标特异度和灵敏度均较差,不能精准地提示排斥反应的确切病因,寻找新的排斥反应监测标志物具有十分重要的临床意义。本文从移植病理学、免疫细胞与调节性免疫细胞、非人类白细胞抗原抗体、外泌体、游离DNA、组合基因预测等方面,总结了近年来器官移植排斥反应风险生物标志物研究的最新进展,为器官移植排斥反应预警和治疗提供参考。     

常用免疫抑制剂对Tfr细胞和Breg细胞的作用研究

目的探讨常用免疫抑制剂对滤泡调节性T细胞(Tfr细胞)和调节性B细胞(Breg细胞)的作用。方法收集6例健康志愿者的外周血(每例5 mL),采用人淋巴细胞分离液分离出淋巴细胞进行培养,将细胞分为对照组(未加入免疫抑制剂)、环孢素组(250 ng/mL)、他克莫司组(10 ng/mL)和西罗莫司组(10 ng/mL),分别用相应免疫抑制剂刺激48 h。用流式细胞仪检测各组淋巴细胞中Breg细胞和Tfr细胞的比例;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测各组上清液中白细胞介素(IL)-21的含量。结果与对照组比较,环孢素组、他克莫司组和西罗莫司组淋巴细胞中Breg细胞的比例均升高,差异均有统计学意义(均为P0.05);环孢素组和他克莫司组淋巴细胞中Tfr细胞比例均升高,差异均有统计学意义(均为P0.05);西罗莫司组淋巴细胞中Tfr细胞比例下降,差异亦有统计学意义(P0.05)。ELISA检测结果显示,与对照组比较,环孢素组和他克莫司组上清液中IL-21含量均下降,差异均有统计学意义(均为P0.05);西罗莫司对IL-21分泌的影响不大,差异无统计学意义(P0.05)。结论环孢素和他克莫司具有抑制B细胞免疫反应的作用。     

后腹腔镜及开放保留肾单位手术治疗T_(1a)N_0M_0期肾癌的临床疗效比较

目的:分析比较后腹腔镜及开放保留肾单位手术治疗T1a N0M0期肾癌的临床疗效。方法:回顾性分析2008年8月~2013年5月在我院治疗的保留肾单位手术患者52例,分为后腹腔镜组(23例)和开放组(29例),观察比较两组患者肾动脉阻断时间、手术时间、术中出血量、术中及术后输血率、术后并发症、恢复进食时间、引流天数、术后住院天数、IL-2用药情况、出院时肌酐及远期肾功能、有无局部复发和远处转移等指标。结果:两组患者在肾动脉阻断时间、手术时间、恢复进食时间及术后住院天数上差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者在术中出血量、术中输血率、术后引流天数、术后输血率、术后并发症、IL-2用药、出院时肌酐水平、病理类型及远期肾功能、局部复发和远处转移等方面差异无统计学意义(P0.05)。结论:后腹腔镜下保留肾单位手术治疗T1a N0M0期肾癌疗效可靠,与开放性手术相比,术后恢复快,远期肾功能、局部复发及转移率方面相似。     

抗SEB单克隆抗体可变区基因克隆及单链抗体的基因构建和表达

目的 从分泌抗SEB的单克隆抗体(FMU-SEB-No.1)杂交瘤细胞中,克隆出FMU-SEB-No.1重链和轻链可变区(VH和VL)基因,构建FMU-SEB-No.1单链抗体(scFv)的原核表达载体,并进行scFv基因的蛋白表达.方法 从FMU-SEB-No.1杂交瘤细胞中提取总RNA,采用RT-PCR扩增出VH和VL基因;通过在引物上设计linker序列,拼接VH和VL为完整FMU-SEB-No.1的scFv基因(FMU-SEB-scFv).将测序正确的scFv基因克隆入PGEX4T-1载体,转化入E.coli BL21(DE3)进行蛋白表达.通过SDS-PAGE,Western blot法分析其表达水平和特异性,酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定其抗原结合活性.结果 测序结果显示,本实验成功克隆出FMU-SEB-No.1重链及轻链可变区基因,并成功构建FMU-SEB-scFv基因,所得的基因全长为750 bp,编码250个氨基酸.SDS-PAGE和Western blot分析表明,PGEX4T1-FMU-SEB-scFv在E.coli BL21(DE3)可表达为Mr约54 000的可溶型scFv/GST融合蛋白.间接ELISA检测结果表明,可溶型scFv/GST融合蛋白与SEB具有较高的抗原结合活性.结论 制备并鉴定了针对SEB的基因工程抗体,为开发出针对SEB的治疗性抗体奠定了实验基础.