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反义寡脱氧核苷酸对内皮细胞缺氧再复氧损伤组织因子表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究反义寡脱氧核苷酸对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)缺氧再复氧损伤后组织因子(TF)基因转录和表达的影响。方法培养的HUVEC随机等分成为正常对照组、缺氧再复氧组、反义寡脱氧核苷酸转染组(AS/TF组)、正义寡脱氧核苷酸转染组(S/TF组)和错配寡脱氧核苷酸转染组(Sc/TF组)。设计合成针对人TF的反义寡脱氧核苷酸(AS/TF),同时设计TF的正义寡脱氧核苷酸(S/TF)的错配寡脱氧核苷酸(Sc/TF)作为对照。用SuperFectTransfectionReagent(SF)作载体,将AS/TF、S/TF和Sc/TF分别转染AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC,正常对照组和缺氧再复氧组HUVEC只加SF,不转染任何寡核苷酸。将缺氧再复氧组、AS/TF组、S/TF组和Sc/TF组HUVEC培养24h后,充入氮气,缺氧条件下培养2h,正常条件下培养1h,完成缺氧再复氧模型的制作。收集各组HUVEC,用发色底物法检测HUVEC表面TF的活性,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测HUVEC中的TF抗原(TF:Ag)。并用膨胀裂解法分离细胞核,进行细胞核连缀反应(Run-onreaction)后,Bio-dot狭线印迹杂交检测HUVEC中的TFmRNA。结果与未经缺氧再复氧的正常对照组HUVEC相比,经过缺氧再复氧的HUVEC表面TF活性明显增强(P<0.001),细胞裂解液中的TF:Ag也显著增多(P<0.001),AS/TF组HUVEC的TF活性和TF:Ag的增加幅度低于缺氧再复氧组、S/TF组以及Sc/TF组(P<0.05-0.01)。体外细胞核连缀反应后,Bio-dot狭线印迹杂交显示,HUVEC缺氧再复氧后TF基因的转录增强,AS/TF组HUVECTFmRNA的转录弱于缺氧再复氧组、S/TF组和Sc/TF组。结论HUVEC缺氧再复氧后,TF基因的转录和表达均显著增强,针对TF的反义寡脱氧核苷酸能够明显抑制HUVEC缺氧再复氧损伤后TF基因的转录和表达。提示TF反义寡脱氧核苷酸对于因TF水平升高所致的血栓性疾病可能有潜在的治疗作用。 相似文献
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HLP抗凝血作用的研究 总被引:1,自引:1,他引:1
研究HLP的抗凝血作用,结果表明,HLP可以延长兔的凝血时间,白陶土部分凝血活酶时间,复钙时间和凝血酶原时间,可以抑制内源性和外源性的凝血系统,可以抑制体外血栓形成和由PDA诱导的血小板聚集。 相似文献
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薄层扫描法测定不同地区藤黄炮制品中藤黄酸及新藤黄酸的含量 总被引:8,自引:0,他引:8
用薄层扫描法对各地藤黄炮制品中藤黄酸、新藤黄酸含量进行测定。结果表明,藤黄酸含量范围在9.26%~49.31%之间,新藤黄酸含量范围在8.01%~37.8%之间。 相似文献
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目的:动态观察N_苄基氟哌啶醇氯化物(F3)对大鼠胸主动脉平滑肌细胞内Ca2+的影响。方法:用Ca2+荧光染料Fluo_3_AM负载大鼠胸主动脉平滑肌细胞,在激光扫描共聚焦显微镜上测定细胞内游离钙的变化。结果:在含CaCl2(1.26mmol/L)的细胞外液中,30 mmol/L KCl使细胞内钙荧光强度(FI)迅速增强,F3可以拮抗KCl诱导钙FI增强作用,并呈量效依赖和时间依赖关系。4种浓度F3(0.01、0.1、1.0、10μmol/L)作用3 min时,使KCl诱导细胞内钙FI从(81±4)%分别降至(71±18)%(n=20,P<0.05)、(51±12)%(n=20,P<0.01)、(39±14)%(n=20,P<0.01)、(28±14)%(n=20,P<0.01)。钙FI变化最快的时程是在给药后的0~30 s。结论:F3通过阻断细胞膜电压依赖性钙通道降低平滑肌细胞内钙浓度,这可能是其扩张血管,改善心肌缺血的机制。 相似文献
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<正> 据国内外文献报道,维生素K(VitK)除用作促凝血剂外,尚有其他广泛的临床用途。本实验从药理学角度探素维生素K(VitK)对支气管平滑肌和急性肝损害的影响,为其新用途提供药理学依根。1 VitK对豚鼠离体肺支气管平滑肌的影响取25C~30COg豚鼠30只,雌雄兼用,随机分为VitK_1和VitK_3组,各15只。常规制备离体肺支气管标本。按肺支管灌流法进行实验。调节灌流速度在25~30ml/min左右。先由套管注入10~(-5)磷酸组胺0.2ml,1min后开始收集灌流量,每min 1次,共4次,取其均直作为VitK给药前灌流量。然后再从套管各注入VitK_1 1mg及2mg、VitK_3 0.4me及0.8mg。同上法各再收集灌流量4次,取其均值为各给药后的灌流量。以Vitk给药后的差值(ml/min)作为灌流量增加的指标。实验结果表明,在给组胺使豚鼠离体肺支 相似文献
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荆芥酯类成分对小鼠急性炎症的影响 总被引:9,自引:0,他引:9
目的 观察荆芥酯类成分对急性炎症的影响。方法 利用巴豆油合剂致小鼠耳廓肿及腹腔注射0.6%醋酸(HAc)致小鼠腹腔染料(Evan’s blue)渗出的方法制作急性炎症模型,观察荆芥酯类成分对急性炎症的影响。结果 荆芥酯类成分对小鼠耳廓肿胀度和腹腔毛细血管的通透性的增加有明显的抑制作用。结论 荆芥酯类成分具有显著的抗急性炎症作用。 相似文献
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人肝癌细胞冷冻保存方法研究 总被引:3,自引:0,他引:3
有关利用普通冰箱-18℃冷冻保存组织及细胞,迄今未见报道[1-4].本实验对-18℃冷冻保存人肝癌细胞株Bel-7402进行实验研究,现报告如下: 相似文献
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高效液相色谱法测定西洋参萃取物及许氏保肝奶蓟草胶囊中人参皂苷Rb1的含量 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:测定西洋参萃取物及许氏保肝奶蓟草胶囊中人参皂苷Rb1的含量。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,检测波长为203nm,流动相为乙腈-水(30:70),样品提取方法按照《中国药典》(2000版Ⅰ部)^[1]。结果:西洋参萃取物中人参皂苷Rb1含量为19.74%,RSD为0.98%;三个批号许氏保肝奶蓟草胶囊中人参皂苷Rb1含量为0.487%,0.473%,0.474%;方法平均回收率为95.22%,RSD为1.08%。结论:方法稳定,重视性好,可作为许氏保肝阴蓟草胶囊质控方法。 相似文献
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氟哌啶醇化学衍生物对冠状动脉作用的研究 总被引:10,自引:0,他引:10
目的和方法:用腹腔注射氟哌啶醇(25mg/kg)复制小鼠锥体外系行为不良反应,经相同途径与剂量注入氟哌啶醇季铵盐衍生物(F3),观察其行为变化。采用猪冠脉条生物检定,观察10-6mol/L、10-5mol/L和10-4mol/LF3对KCl(10~40mmol/L)性猪冠脉条收缩量效曲线的影响,并采用Langendorf灌流法,观察10-6mol/L、5×10-6mol/L和10-5mol/LF3对脑垂体后叶素所致离体豚鼠心脏冠脉流量减少的影响。结果:氟哌啶醇可致小鼠头颈部扭曲,动作不协调,尾过伸,震颤等,而F3无上述作用。F3可使KCl致猪冠脉条收缩曲线压低,并呈量效依赖性。F3可以量效依赖地拮抗脑垂体后叶素所致冠脉流量的减少。结论:说明F3无氟哌啶醇样锥体外系不良反应,但仍有良好的扩冠作用 相似文献