芍药苷对脑缺血再灌注损伤大鼠NLRP3炎症体信号通路相关因子表达的影响

目的观察芍药苷对脑缺血再灌注损伤大鼠NLRP3炎症体信号通路相关因子表达的影响,探讨其神经保护作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠48只,随机分为假手术组、模型组、芍药苷低剂量组、芍药苷高剂量组,每组12只。采用线栓阻断法制作大鼠脑缺血再灌注模型,缺血2 h后进行再灌注,再灌注后1 h腹腔注射芍药苷(2.5、5 mg/kg),每日1次,连续7 d。Zea Longa 5分评价方法对大鼠进行神经功能评分。ELISA检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α的含量。RT-PCR和Westernblot分别检测大鼠脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α、Caspase-1、NLRP1、NLRP3 mRNA和蛋白的表达。结果与模型组比较,芍药苷低、高剂量组大鼠神经功能评分各时点均降低,芍药苷低剂量组第7日和芍药苷高剂量组第3、5、7日神经功能评分差异有统计学意义(P0.05,P0.01);与假手术组比较,模型组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均升高,大鼠脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α、Caspase-1、NLRP1和NLRP3m RNA和蛋白表达均上调;与模型组比较,芍药苷低、高剂量组大鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均降低,大鼠脑组织IL-1β、IL-6、TNF-α、Caspase-1、NLRP1、NLRP3 mRNA和蛋白表达显著下调(P0.01)。结论芍药苷对脑缺血再灌注损伤大鼠具有神经保护作用,其机制可能与抑制NLRP3炎症体信号通路分子的表达、减轻炎症反应相关。     

栝楼桂枝颗粒对脑缺血再灌注损伤大鼠线粒体能量代谢的影响

目的:探讨栝楼桂枝颗粒是否通过调控线粒体能量代谢对脑缺血再灌注损伤大鼠起到脑保护作用。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和中药组。采用线栓法制备脑缺血再灌注模型,采用神经功能缺损评分法(mNSS)进行大鼠神经功能评分,测定大鼠脑梗死面积,采用透射电镜观察脑线粒体超微结构的改变;采用分光光度法测定线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ的活力来评价栝楼桂枝颗粒对模型大鼠线粒体能量代谢的影响;利用免疫组化法观察解偶联蛋白4(UCP4)和ATPase 6在脑组织中的表达。结果:与模型组比较,中药组大鼠神经行为学情况得到显著改善(P<0.05),缺损程度降低(P<0.05);中药组对模型大鼠脑线粒体超微结构病理状态有改善作用;中药组能够提高模型大鼠脑组织中线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ的活力(P<0.05)、脑组织中ATP的含量(P<0.05),显著提高模型大鼠脑组织中Na+-K+-ATPase、Ca2+-ATPase、Mg2+-ATPase、Ca2+-Mg2+-ATPase的活性(P<0.05,P<0.01);中药组能够恢复模型大鼠脑组织中UCP4和ATPase 6的表达(P<0.01)。结论:栝楼桂枝颗粒可以通过保护线粒体而调节线粒体能量代谢从而起神经保护作用。     

黄精多糖对H2O2诱导HT22细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究黄精多糖在过氧化氢(H₂O₂)损伤后海马神经元HT22细胞的保护作用。方法:建立H₂O₂诱导HT22细胞氧化损伤模型,黄精多糖干预后,观察黄精多糖对HT22细胞活性的影响及形态变化。水溶性四唑蓝法(WST)测定超氧化物歧化酶(SOD)活性,硫代巴比妥酸法(TBA)测定丙二醛(MDA)含量,比色法测定还原型谷胱甘肽(GSH)含量。蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2及核因子NF-E2相关因子(Nrf2)蛋白表达水平。结果:与H₂O₂模型组相比,黄精多糖组(100、200、400μg/mL)明显提高细胞活性(P<0.05或P<0.01),减少MDA的产生(P<0.05或P<0.01),增加SOD活力和GSH含量(P<0.05或P<0.01),降低Bax蛋白的表达,增加Bcl-2蛋白的表达。此外,黄精多糖还能够上调细胞中Nrf2的表达。结论:黄精多糖能通过增强细胞内抗氧化活性,提高HT22细胞的存活率,从而保护细胞抗氧化损伤,其作用机制与Nrf2通路有关。     

黄精多糖调控SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路改善H2O2诱导的HT22细胞氧化损伤

目的 研究黄精多糖对H₂O₂诱导的HT22细胞氧化应激损伤及其对SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路关键信号分子的影响。方法 建立H₂O₂诱导HT22细胞氧化损伤模型，黄精多糖干预后，观察黄精多糖对HT22细胞活性乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase，LDH）释放的影响，检测超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量、还原型谷胱甘肽（glutathione，GSH）含量、线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ活性、腺嘌呤核苷三磷酸（adenosine triphosphate，ATP）含量，Western blotting检测细胞中SIRT1、AMPK、p-AMPK及PGC-1α蛋白的表达。结果 与模型组相比，黄精多糖（100，200，400 μmicro；g·mL^-1）明显提高细胞活性（P<0.05或P<0.01），降低LDH释放（P<0.05或P<0.01），减少MDA的产生（P<0.05或P<0.01），增加SOD活力和GSH含量（P<0.05或P<0.01），可提高ATP含量及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ活性。此外，黄精多糖还能够上调细胞中SIRT1、p-AMPK及PGC-1α蛋白的表达。结论 黄精多糖能通过增强细胞内抗氧化活性，提高HT22细胞的存活率，改善线粒体功能，从而保护细胞抗氧化损伤，其作用机制与激活SIRT1/AMPK/PGC-1α信号通路有关。