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1.
目的获得犬传染性肝炎保护性抗原Loop重组蛋白及pVAX1-CpG-Loop重组质粒,并评价其诱导特异性免疫应答的水平。方法PCR扩增犬腺病毒Ⅰ型抗原表位Loop基因,构建至原核表达载体pET28a(+)和真核表达载体pVAX1-CpG(+)中;pET28a-Loop重组质粒转化BL21(DE3),表达蛋白经SDS-PAGE、免疫印迹分析、亲和层析纯化抗原蛋白,采用肌内注射、电转导方法,prime-boost免疫策略,pVAX1-CpG-Loop重组质粒股四头肌注射免疫小鼠,抗原蛋白加强免疫后进行免疫效果的评价。结果ELISA方法检测到免疫鼠体内有特异性抗体产生,淋巴细胞增殖实验(MTT和CCK-8)、细胞因子和CD^4+、CD^8+分子测定表明DNA疫苗可以诱发TH1型免疫;中和实验表明表达蛋白诱导小鼠产生的抗体具有中和病毒的作用。结论构建的犬传染性肝炎pVAX1-CpG-Loop核酸疫苗具有诱导特异性细胞和体液免疫应答的能力。 相似文献
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目的:观察玉米秸垫料用于饲养SD大鼠的安全性。方法:将SD大鼠随机分为玉米秸垫料组、对照组,饲养6个月,测定其血液生化指标,观察实质脏器组织切片。结果:玉米秸垫料对SD大鼠的8种血液生化指标影响不显著(P〉O.05),组织切片观察未见有意义的病理改变。结论:玉米秸垫料在实际应用中是安全的。 相似文献
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利用桑原子表格系统(SYB)对实验动物饲料配方的营养成分进行计算.具有方法简便、速度快和修改调整数值容易等优点,可以省略以往使用手工计算的繁琐过程,与已经开发出的一些计算机设计实验动物饲料配方的运算程序比较,该方法对使用者无需要求太多的计算机运算知识,容易使更多的人掌握使用。 相似文献
4.
目的观察同型半胱氨酸(Hcy)对大鼠雌激素受体α(ERα)基因表达和其启动子CpG岛甲基化的影响。方法高效液相色谱仪检测血浆Hcy水平;RT-PCR和甲基化特异性PCR(MSP)分别检测ERαmRNA表达水平及基因启动子CpG岛的甲基化状态。结果去卵巢和给予甲硫氨酸饮食均可升高大鼠血浆Hcy水平。去卵巢和Hcy均可使大鼠ERαmRNA表达减少,但5′-Aza可使细胞ERαmRNA表达增多。假手术组大鼠主动脉ERα基因启动子有2例(20%)存在甲基化,去卵巢组有3例(30%)存在甲基化,而去卵巢 Hcy组有6例(60%)存在甲基化,对照组细胞ERα启动子CpG岛完全去甲基化,Hcy组细胞甲基化增强,5′-Aza使细胞去甲基化。结论Hcy可经甲基化修饰方式下调去卵巢大鼠主动脉ERαmRNA表达。 相似文献
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实验动物皮肤病原真菌核酸鉴定方法的建立 总被引:3,自引:2,他引:1
目的选择一种快速、敏感和特异的方法来检测实验动物皮肤病原真菌.方法选取真菌CHS1基因中一段序列设计皮肤真菌通用引物和选取一种随机引物FM1,利用聚合酶链反应(PCR)扩增三种动物皮肤病原真菌标准株:须毛癣菌、石膏样小孢子菌、犬小孢子菌.结果两种引物扩增产物片段大小在三种真菌之间有明显不同.结论本实验方法可快速特异性检测实验动物皮肤病原真菌. 相似文献
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目的比较观察本实验室培育的近交系HFJ大鼠和Wistar大鼠血清中IL-1β、IL-2和IL-10的含量。方法 HFJ大鼠和远交群Wistar大鼠各10只,应用ELISA法分别检测其血清IL-1β、IL-2和IL-10水平。结果 HFJ大鼠血清中IL-1β、IL-2的含量与Wistar大鼠相比差异无统计学意义(P>0.05),HFJ大鼠血清中IL-10的含量高于Wistar大鼠组,差异有统计学意义(P<0.05)。且HFJ大鼠的IL-1β、IL-2和IL-10总体离散度明显小于Wistar大鼠组。结论 HFJ大鼠血清IL-10高于Wistar大鼠且近交系HFJ大鼠的IL-1β、IL-2和IL-10,测定值较为均一,离散度均低于Wistar大鼠。 相似文献
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玉米秸作为大鼠垫料对其生长发育及繁殖性能的影响 总被引:3,自引:3,他引:3
目的 对比观察不同原料制成的垫料对SD大鼠繁殖性能及其仔鼠生长发育的影响 ,探讨以玉米秸为原料制作实验动物新型垫料的可行性。方法 测定使用玉米秸、卫生纸、刨花三种垫料时SD大鼠的繁殖性能指标及仔鼠体重变化 ,并进行比较分析。结果 出生仔数、初生窝重、初生重三个指标三组间比较差异无显著性 (P >0 0 5 ) ;离乳率三组间差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,玉米秸组与卫生纸组差异有极显著性 (P <0 .0 1) ,玉米秸组最高 ,为99.79% ;三组之间胎次间隔差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,玉米秸组为 31.4 1d ;仔鼠生长发育指标 ,三组之间比较 ,差异无显著性 (P >0 .0 5 )。结论 玉米秸作为垫料时 ,SD大鼠能保持较高的繁殖性能 ,可以作为大鼠垫料使用。 相似文献
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同型半胱氨酸对内皮细胞一氧化氮合酶活力及基因表达的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 观察同型半胱氨酸(Hcy)对培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)一氧化氮合酶(eNOS)活力及其基因表达的动态影响.方法 10、30、100、300 μmol · L-1Hcy与HUVEC分别培养24、48、72 h后,用HPLC测定细胞内不对称二甲基精氨酸(ADMA)的含量,反转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内eNOS mRNA的表达,并分别测定细胞二甲基精氨酸二甲基氨基水解酶(DDAH)、eNOS的活力和NO的含量.结果 HUVEC经不同浓度Hcy分别处理24、48、72 h后,其细胞内ADMA聚积增多,DDAH活性和eNOS活力降低,NO生成减少,且呈时间和浓度依赖性.但只有100 μmol · L-1 Hcy与HUVEC作用72 h时,才引起eNOS mRNA表达的减少.结论 Hcy对内皮功能的损伤可能通过抑制DDAH活性,引起ADMA聚积,从而降低eNOS活力,导致NO生成减少.此外,eNOS mRNA表达的抑制也是Hcy诱导的内皮功能障碍的机制之一. 相似文献
10.
目的比较 3种来源的艾氏腹水癌 (Ehrlichascitescarcinoma,EAC)细胞蛋白质的特性。方法采用SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳 (polyacrylamidegelelectrophoresis ,PAGE)和免疫组织化学染色的方法观察 3种来源的EAC细胞蛋白质组成及Gai、TrkA、PDGF A、CDK2和NF κBp6 5抗体蛋白质表达。 结果电泳结果显示 ,北京来源的EAC蛋白质条带数最多 (2 8条 ) ,其次是山东来源的EAC(2 5条 ) ,武汉来源的EAC最少 (2 2条 ) ;免疫组织化学染色法测定 3个来源的EAC细胞的Gai、TrkA、PDGF A、CDK2和NF κBp6 5抗体蛋白质表达 ,结果不同来源的EAC与抗体的反应情况不同 ,山东来源的EAC 5种抗体的阳性表达分别为 0 %、 2 3.0 %、 0 %、 8.5 %和83.3%,北京来源的EAC分别为 77.8%、 6 .0 %、 9.0 %、 2 4 .0 %和 91.4 %,武汉来源的EAC分别为78.3%、4 .8%、8.0 %、2 7.8%和 10 0 %。结论 3种来源的EAC细胞蛋白质组成不仅有定量差异 ,而且有定性差异。 相似文献