23—羟基桦木酸体外抗恶性肿瘤作用的研究

目的：研究23－羟基桦木酸在体外对B16,BGC－7901,AO,HL－60,K562,HeLa及S180 7种恶性肿瘤细胞生长的抑制作用。方法：应用四甲基偶氦唑盐比色分析,电镜观察,流式细胞术等方法观测23－羟基桦酸对7种肿瘤细胞的抑制作用。结果：10－160mg/L^-1的23－羟基桦木酸在体外对7种肿瘤细胞有显著的抑制作用,呈一定的剂量依赖关系,并可引起大量肿瘤细胞凋亡,23－羟基桦木酸-Ⅰ使B16肿瘤细胞被阻滞在G0－G1期,而23－羟基桦木酸－Ⅱ则使细胞阻滞在G2－M期。结论：23－羟基桦木酸对体外7种恶性肿瘤细胞均有显著的抑制作用,并使细胞阻滞在某一生长期,最终导致肿瘤细胞凋亡。     

23-羟基桦木酸体外和体内抗黑色素瘤作用的研究

目的　研究 2 3 羟基桦木酸对体内、外B16黑色素瘤细胞生长的抑制及诱导凋亡作用。方法　应用MTT分析 ,电镜观察 ,流式细胞仪 ,肿瘤体积大小测定等方法 ,对 2 3 羟基桦木酸诱导黑色素瘤细胞进行检测和观察。结果　2 3 羟基桦木酸体外 3 0～ 80 μg/ml处理 ,体内 3 0 0mg/kg～ 6 0 0mg/kg灌胃时 ,对B16细胞有显著的生长抑制作用 ,有一定的剂量依赖关系并出现大量的凋亡细胞 ,同时体内肿瘤细胞被阻滞在G0 ～G1期 ,DNA合成受阻 ,肿瘤体积缩小。结论　 2 3 羟基桦木酸对体内外黑色素瘤细胞增殖有强烈的抑制作用 ,诱导肿瘤细胞死亡的主要途径是凋亡。     

氨磷汀对顺铂和环磷酰胺诱导正常细胞毒性的保护作用

目的 :评价氨磷汀对顺铂和环磷酰胺诱导正常细胞毒性的保护作用及对化疗药物抗肿瘤作用的影响。方法 :用MTT法测定顺铂对体外培养的Hela、Ho 8910肿瘤细胞的抑制作用 ,实验组加顺铂前 3 0min经氨磷汀处理 ,对照组则不需处理 ,比较两组细胞增殖的抑瘤率。同时观察注射顺铂、环磷酰胺前 3 0min注射氨磷汀与不注射组小鼠骨髓有核细胞的微核率。结果 :用 60 0mg·L- 1 氨磷汀在体外加顺铂前 3 0min加入Hela、Ho 8910肿瘤细胞 ,和对照组比较两组的肿瘤细胞增殖没有差异(P >0 .0 5 ) ;而体内实验得到 ,顺铂、环磷酰胺腹腔注射正常小鼠前 3 0min注射氨磷汀与不注射氨磷汀比较 ,单独用顺铂、环磷酰胺的小鼠骨髓有核红细胞微核率高于氨磷汀保护组 (P <0 .0 5 )。结论 :氨磷汀腹腔注射正常小鼠可明显降低顺铂、环磷酰胺引起正常小鼠的细胞毒性 ,同时氨磷汀不影响顺铂对Hela、Ho 8910肿瘤细胞的化疗疗效。     

蚯蚓提取物体内和体外抗肿瘤作用的研究

目的探讨蚯蚓提取物对Eca-109、Hella、K562细胞的生长抑制作用及机制。方法应用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色分析,流式细胞仪测定细胞凋亡、细胞周期及观察小鼠体内肿瘤体积和重量。结果蚯蚓提取物Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ中只有成分Ⅱ的高、中剂量(900,450 mg/L)对Eca-109、Hella、K562细胞有明显的抑制作用。体内300,600 mg/L灌胃小鼠对肿瘤有明显的抑制作用。Hella细胞检测有凋亡细胞出现,细胞周期检测,细胞被阻滞在G0-G1期,DNA合成受阻故使肿瘤细胞受抑制,肿瘤体积缩小。结论蚯蚓提取物Ⅱ对肿瘤细胞增殖有明显的抑制作用,主要通过细胞凋亡和肿瘤细胞受阻于G0-G1期,使DNA合成减少。     

苯乙酸钠对小鼠B16黑色素瘤细胞的分化诱导作用

目的　评价苯乙酸钠对黑色素瘤 B1 6 的抑瘤作用。方法　以 MTT法测定细胞增殖的抑制率。B1 6 胞形态 ,黑色素含量 ,细胞周期变化及体内致瘤能力的测定作为观察指标。结果　用 7.5 m M～ 17.5 m M的苯乙酸钠作用于肿瘤细胞 ,见有不同程度的抑瘤作用 P<0 .0 1。 MTT法测得IC5 0 为 2 .6 7～ 3.6 3m M。在 7.5～ 17.5 m M浓度下 ,对 B1 6 细胞都有较强的分化诱导作用 ,表现为黑色素颗粒生成能力明显增多 ,生长缓慢。细胞动力学研究表明 ,苯乙酸钠可使 B1 6 细胞阻断在 G1 期因而 S期明显减少 ,体内致瘤表明成瘤能力明显降低。结论　苯乙酸钠对 B1 6 细胞有强力分化诱导作用 ,而对体内外黑色素瘤增殖有明显抑制。     

抗人S100A4单克隆抗体的制备、鉴定及初步应用

目的:制备抗人S100A4单克隆抗体(mAb),建立检测肿瘤样品中S100A4蛋白的可靠方法.方法:采用标准杂交瘤技术得到抗重组人S100A4的mAb.以ELISA、Western blot和免疫组织化学法对抗体进行鉴定.并将抗体应用于临床人乳癌和结肠癌样品的免疫组织化学检测.结果:获得了1株稳定分泌抗人S100A4蛋白mAb的杂交瘤细胞株D101.在免疫印迹实验中,该mAb较多抗特异性更好.该mAb适用于来源于人组织的样品S100A4表达的检测,在少量乳癌和结肠癌样品的检测中给出的结果与商品化多抗的结果一致.结论:该mAb是S100A4特异的,在临床应用中有更好的重复性.     

抗破伤风类毒素单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立及其中和效应的研究

采用破伤风类毒素（ＴＴ）免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与ＳＰ２／Ｏ小鼠骨髓瘤细胞在聚乙二醇（ＰＥＧ）ＷＭ４０００作用下进行配合，克隆化，通过ＥＬＩＳＡ法及毒素中和新价的检测获得两株（５Ｇ８，６Ｄ９）及多株亚株（５Ｇ８Ａ１０，５Ｇ８Ｂ９Ｃ１１，５Ｇ８Ｂ９Ｅ１等）有保护作用的细胞株，其中一株经过液氯冻存，复苏仍能正常分泌抗体。     

降低 ABC—ELISA 非特异性吸附的实验方法探讨

用生物素化的乙肝病毒表面抗原(BHZ-HBsAg)和亲和素辣根过氧化物酶复合物(ABC-HRP)作为检测系统,对降低 ABC-ELISA 非特异性吸附的方法作了探讨。结果表明.适当的 Avidin-HRP 稀释度、0.5%牛血清白蛋白封闭以及提高 ABC-HRP 稀释液的离子强度,均可有效降低 ABC-ELISA 的非特异性吸附。     

桦木酸及其衍生物23-羟基桦木酸等诱导黑色素瘤细胞凋亡的研究

目的 :研究桦木酸及其衍生物 2 3 羟基桦木酸等对人黑色素瘤细胞A3 75、小鼠黑色素瘤细胞B16生长抑制及凋亡作用。方法 :应用四甲基偶氮唑盐比色 (MTT)法、光镜与电镜、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等对 2 3 羟基桦木酸诱导的黑色素瘤A3 75、B16细胞进行检测和观察。结果 :桦木酸及其衍生物 2 3 羟基桦木酸等在质量浓度为 8～ 80mg·L-1时对黑色素瘤细胞有显著的生长抑制作用 ,并有一定的剂量依赖关系 ,同时出现凋亡峰及梯形电泳。结论 :2 3 羟基桦木酸能强烈诱导黑色素瘤细胞凋亡 ,从而达到抑瘤的治疗效果。