大肠杆菌分泌表达重组人肝再生增强因子的纯化、鉴定与活性研究

目的建立一种大肠杆菌分泌表达型重组人肝再生增强因子(rhALR)的纯化工艺,并对产品进行鉴定和活性研究。方法通过沉淀、色谱等方法的条件优化,建立纯化工艺,通过电泳、HPLC、N-末端氨基酸测序、免疫杂交、同位素掺入、全波长扫描等方法对纯化产品进行鉴定和活性测定。结果建立了rhALR的纯化工艺路线,40%(NH4)2SO4沉淀,Butyl-S FF疏水色谱,CM-S FF离子交换色谱,Superdex-75分子筛色谱纯化,重组蛋白质的纯度大于95%。该蛋白质稳定存在的形式为二聚体,其单体的相对分子质量为15 000。该蛋白质结合辅酶黄素腺嘌呤二核苷酸(FAD),对损伤后的肝细胞具有明显的促进作用,明显优于以包涵体形式表达的rhALR。结论从大肠杆菌分泌表达体系能分离纯化得到高纯度、具有生物学功能和活性的rhALR,是潜在的临床治疗肝病药物。     

溶栓药物的研究进展

心脑血管疾病是严重危害人类生命健康的常见病,其死亡率一直居于前3位,其中以血管栓塞性疾病的发病率、致残率和死亡率最高,而溶栓治疗则是目前最主要的治疗方法。现将溶栓药物的发展现状作一综述:1溶栓药物的发展现状1.1第1代溶栓药物第1代溶栓药物以链激酶(SK)和尿激酶(UK)为代表。链激酶应用最早,目前临床上应用最为广泛,它是C组β溶血性链球菌产生的一种蛋白质,能与纤溶酶原结合,形成SK-纤溶酶原复合物,促使游离的纤溶酶原转变成纤溶酶,溶解纤维蛋白;尿激酶则能直接激活纤溶酶原形成纤溶酶。二者共性是溶栓力强但缺乏溶栓特异性,易导…