小儿遗传代谢缺陷病的检查诊断

目的：探讨对小儿遗传代谢缺陷病的检查和诊断。方法：对患儿进行取样后,主要测定血常规、尿常规分析、血气分析、血电解质等指标。结果：从2008年1月至2009年7月对我院收治的384例危重患儿中,共筛出遗传代谢缺陷病患儿76例。结论：利用新的技术,结合常规的检查,可以快速筛查小儿遗传代谢缺陷病,具有重要的临床意义。     

实时荧光定量PCR检测儿童手足口病肠道病毒EV71

手足口病(HFMD)是因某些不同血清学肠道病毒感染而引起的一种常见急性传染病,患者多为5岁以下的儿童.其传染性强,可致爆发性流行.HFMD本身是一种良性病,发病后临床经过顺利,数日后自愈,不致威胁生命,无后遗症[1-3].     

应用PCR结合反向斑点杂交技术检测β-地中海贫血

目的探讨一种简便、高效可同时检测β-地中海贫血多基因位点突变的基因诊断技术。方法采用多聚酶链反应(PCR)结合反向斑点杂交(RDB)技术。结果486例疑诊患者共检测出175例为β-地中海贫血,检出9种基因突变类型22种组合形式,包括纯合子、杂合子以及双重杂合子。结论β-地中海贫血基因突变类型多样,基因组合形式复杂,多聚酶链反应结合反向斑点杂交技术(PCR/RDB)简便、高效、准确可靠,适于β-地中海贫血的基因诊断和实验研究,可作为常规方法推广用于临床标本的检测和产前诊断。     

UPLC法测定抗肿瘤药物甲氨蝶呤血药浓度

目的临床上建立一种快速、准确测定肿瘤患儿血浆中甲氨蝶呤浓度方法。方法取肿瘤患儿血浆250μL,加入7%高氯酸200μL,涡旋1 min,室温高速离心5 min(15 000×g),取上清液5μL进样分析。色谱条件:色谱柱为BEH C18柱(50mm×2.1 mm,1.7μm);流速为0.3 mL·min-1;流动相为乙腈-40 mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(91∶9,pH=4.5);柱温为30℃;进样量:5μL;检测波长为304 nm。结果血浆中MTX色谱峰分离良好,无干扰,曲线为y=41 729x-810.29,R2=0.9 997,回收率在90%¹10%之间。结论 UPLC操作简便,适用于血浆中MTX快速监测。     

甲胎蛋白与CA 19-9双标记时间分辨荧光免疫分析法的建立

目的建立钐(Sm3+)标记抗甲胎蛋白(AFP)单克隆抗体(单抗)和铕(Eu3+)标记抗糖类抗原19-9(CA19-9)单抗的双标记时间分辨荧光免疫分析(TrFIA)法。方法将抗AFP单抗与抗CA19-9单抗混合包被96孔板作为捕获抗体,用Sm3+标记抗AFP单抗、Eu3+标记抗CA19-9单抗作为检测抗体,建立同步检测AFP/CA19-9的TrFIA法。结果建立的TrFIA法检测AFP/CA19-9的灵敏度分别为0.3 ng/mL和2.5 U/mL。AFP分析内和分析间变异系数(CV)分别为2.6%～5.9%和4.3%～8.1%,CA19-9分析内和分析间CV分别为4.9%～5.6%和5.0%～6.3%。分别用建立的TrFIA法与Perkin-Elmer公司解离增强镧系荧光免疫分析(DELFIA)法同时测定血清样本,两法AFP与CA19-9的相关系数分别为0.99与0.98。结论建立的同步检测AFP与CA19-9的TrFIA法灵敏、简便、准确,有助于消化道肿瘤和睾丸癌等的辅助诊断。     

基因分型在疟原虫虫株鉴别中的应用研究现状

疟疾主要在热带和亚热带地区流行,遍及全球90多个国家和地区,使世界人口的41％受到威胁。恶性疟每年造成150—200万人死亡,其中80％是5岁以下儿童和妊娠期妇女,已成为全球严重的公共卫生问题,同艾滋病、结核一起被世界卫生组织列为对人类健康威胁最严重的三大传染病之一。对疟原虫的控制及疟疾治疗方案的制订是解除危害的根本问题。而疟原虫免疫原性最强的抗原决定簇往往是变异性最高的抗原片段,     

小儿及青少年泌尿道感染的病原微生物分析

目的：探讨小儿及青少年泌尿道感染的病原微生物感染情况。方法：对来我院就诊的312例患儿应用实时荧光定量RT—PCR方法检测解脲支原体（UU）,沙眼衣原体（CT）,淋球菌（NG）。结果：312例患儿UU阳性39例占12．5％,CT阳性9例占2．89％,NG阳性4例占1．28％,UU、CT二者混合感染4例占1．28％。结论：UU是小儿及青少年泌尿道感染的主要病原体,应引起人们重视。     

三七总苷对人胃癌BGC-823细胞Bcl2和Bax表达的影响

目的:探讨三七总苷对胃癌BGC-823细胞Bcl2基因和Bax基因表达的影响。方法:不同浓度三七总苷诱导胃癌细胞BGC-823,实时荧光定量聚合酶链反应检测Bcl2基因和Bax基因的表达情况,免疫印迹检测Bcl2蛋白和Bax蛋白的表达情况,同时采用流式细胞仪检测细胞凋亡的改变。结果:三七总苷作用后,胃癌细胞Bcl2基因的表达受到明显抑制,而Bax基因的表达则明显上调,Bcl-2/Bax呈上升趋势;流式检测细胞增殖受到抑制。结论:三七总苷可促进胃癌BGC-823细胞凋亡,具有抗胃癌细胞恶性增殖活性。     

结肠癌PIK3CA基因G1876A突变的意义

目的寻找结肠癌中磷脂酰肌醇激酶-3(PIK3CA)基因的突变位点,结合结肠癌计算机断层扫描(CT)分期资料分析其意义。方法收集结肠癌组织78例和癌旁组织30例,通过聚合酶链反应(PCR)扩增PIK3CA第12和20外显子,单核苷酸多态性(SSCP)进行筛查,再用测序法确证,并对照经CT检查Dukes临床病理分期资料进行分析。结果结肠癌样本SSCP和DNA测序在PIK3CA第20外显子未发现突变,第12外显子有16例(20.51%)样本发生G1876A突变,突变样本均位于Dukes分期的A期和B期;而30例癌旁组织样本PIK3CA第12和20外显子均未发现突变。结论 PIK3CA基因G1876A突变可能在结肠癌发生中起着重要的作用,第12外显子基因分析对早期结肠癌患者的诊断有重要意义。     

地中海贫血的实验室诊断进展

地中海贫血是由于编码珠蛋白的α或β类珠蛋白基因发生缺失或点突变,使α或β类珠蛋白链缺如或不足所致的贫血,东南亚是地中海贫血高发地区之一,我国广东、广西、云南、四川等省份发病率高。地中海贫血目前还缺少经济、有效的治