紫河车冻干粉改善睡眠作用及机制研究

目的 研究紫河车冻干粉改善睡眠的作用及机制。方法 利用ip氯苯丙氨酸(PCPA)法制备大鼠失眠模型,设置对照组、模型组和紫河车冻干粉低、中、高剂量(0.09、0.18、0.36 g·kg^-1)组,每天ig给药1次,连续给药7 d,对照组和模型组ig等量去离子水。通过检测体质量增长量、一般观察、翻正实验、旷场实验、强迫游泳实验、悬尾实验评价紫河车冻干粉改善睡眠的作用;利用Western blotting技术检测γ-氨基丁酸转氨酶(GABA-T)、谷氨酸脱羧酶-65(GAD65)、γ-氨基丁酸转运体1(GAT1)蛋白的表达水平。结果 与模型组比较,紫河车冻干粉低、中、高剂量组大鼠体质量增加量显著升高(P＜0.01);中、高剂量紫河车冻干粉具有显著缩短睡眠潜伏期(P＜0.05)、显著延长睡眠时间(P＜0.01)的作用;高剂量紫河车冻干粉使大鼠中央格停留时间显著延长(P＜0.01)、中央格穿格次数显著增多(P＜0.05)、站立次数和修饰次数显著增多(P＜0.01),说明高剂量紫河车冻干粉能够减轻失眠大鼠焦虑情绪,增强自发探索活动能力;高剂量紫河车冻干粉使大鼠漂浮时间缩短(P＜0.05),挣扎时间延长(P＜0.01),说明高剂量紫河车冻干粉能够减轻失眠大鼠的抑郁状态。Western blotting结果显示,与模型组相比,紫河车冻干粉处理组大鼠下丘脑组织中GABA-T的表达水平显著降低(P＜0.05),GAD65、GAT-1的表达水平显著升高(P＜0.05、0.01)。结论 紫河车冻干粉可能通过调控GABA-T、GAD65、GAT-1蛋白的表达水平,发挥改善睡眠的作用。     

基于斑马鱼模型的紫河车冻干粉水提物抗衰老功效研究

目的 应用斑马鱼模型评价紫河车冻干粉水提物（PHFAE）抗衰老的功效。方法 将健康产妇新鲜胎盘冷冻干燥后碾磨为粉，并使用蒸馏水进行提取，制成紫河车冻干粉水提物（PHFAE）。发育8 h （8 hpf）的AB系斑马鱼使用PHFAE（0、1、10、25 μg·mL^-1）连续作用72 h，对其体内β-半乳糖苷酶进行染色。随后将AB系与皮肤荧光转基因斑马鱼均随机分成对照组、模型组和PHFAE （1、10、25 μg·mL^-1）组，对照组给予培养水，模型组给予0.5 mmol·L^-1 H₂O₂溶液制备氧化损伤模型，PHFAE组同时给予H₂O₂与不同浓度PHFAE，连续作用72 h后，测定皮肤表面荧光斑点的数量；试剂盒法检测鱼体内活性氧（ROS）含量；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）法检测ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达变化。结果 与对照组比较，1、10、25 μg·mL^-1的PHFAE组斑马鱼体内β-半乳糖苷酶的活性均显著降低（P＜0.01）；与模型组比较，1、10、25 μg·mL^-1的PHFAE显著抑制H₂O₂诱导的角质细胞的死亡（P＜0.01），明显抑制ROS的积聚，显著升高ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod的mRNA表达（P＜0.01）。结论 PHFAE通过调控ampk、mdm2、Cu/Zn-sod和Mn-sod基因的表达，提高了机体的抗氧化能力，进而发挥抗衰老之功效。