加强实验教学改革，提高医学微生物学教学质量

为提高医学微生物学实验教学质量,激发学生学习兴趣、培养科学思维、掌握实验操作技能,进行了一些改革和探索。文章从整合实验教学内容,开发综合性试验;引入设计性实验教学法,发挥学生主观能动性;加强实验室建设,重视生物安全方面以及改进实验教学手段,增添实验内容等方面进行了阐述。     

基于下丘脑代谢组学研究三子养亲汤干预正常高值血压痰湿壅盛证大鼠作用机制

本实验旨在从下丘脑代谢组学角度探讨三子养亲汤(Sanzi Yangqin decoction, SYD)干预正常高值血压痰湿壅盛证大鼠的作用机制。将WKY大鼠随机分为正常组、模型组和SYD组。采用高脂+高盐方式制备正常高值血压痰湿壅盛证大鼠模型,不同剂量SYD干预模型大鼠8周,测量各组大鼠饮食量、体重、身长、血脂及血压,利用液质联用技术分析筛选各组大鼠下丘脑中差异代谢物,并进行代谢通路分析。结果显示,与模型组相比较, SYD组大鼠饮食量减少,体重降低,血脂血压显著下降。同时下丘脑14个差异代谢物发生回调,主要与氨基酸代谢、谷胱甘肽代谢、鞘脂代谢和甘油酯代谢有关,提示SYD可能通过调节下丘脑饮食行为,进而影响氨基酸代谢与能量代谢来发挥干预作用。本研究已获得山东中医药大学动物伦理审查委员会批准(批准号:SDUTCM20211103001)。     

高血压合并睡眠呼吸暂停综合征的临床观察与治疗

目的观察合并睡眠呼吸暂停综合征（SAS）的高血压病患者，常规药物降压治疗及呼吸道正压通气治疗对血压的影响。方法按照24h血压资料和睡眠资料，分为单纯高血压组与合并SAS的高血压组，观察常规降压药物治疗4周后24h血压变化和呼吸道正压通气治疗对合并SAS的高血压患者24h血压的影响。结果29例单纯高血压患者常规药物治疗4周后，24h平均收缩压、舒张压、夜间收缩压、舒张压均明显下降（P均〈0.01）。26例合并SAS的高血压患者24h平均收缩压、舒张压、夜间舒张压有所下降（P均〈0.05），但仍高于正常组，而夜间收缩压无明显变化。其中20例合并SAS高血压患者加用一夜正压通气治疗后，24h平均血压进一步下降，夜间收缩压和舒张压明显降低（P〈0．01，P〈0．01）。结论合并有SAS的高血压患者多为难治性，单纯降压药物治疗效果欠佳，需要同时应用正压通气进行治疗。     

E型沙眼衣原体MOMP基因重组质粒的构建与表达

目的：构建E型沙眼衣原体（Ct）主要外膜蛋白（MOMP）基因重组真核表达质粒pVAX1-MOMP,为探索安全的E型CtDNA疫苗奠定基础。方法：根据Genebank中E型Ct MOMP基因序列设计引物,用高保真PCR方法从E型Ct基因组DNA中扩增得到约1.1kb的MOMP片段,克隆至pcDNAⅡ载体,测序后亚克隆至表达载体pVAX1,构建卡那霉素抗性真核重组表达质粒pVAX1-MOMP,并以重组质粒转染COS-1细胞进行表达,用Western blotting方法鉴定表达产物。结果：从E型Ct基因组DNA中扩增出特异的MOMP基因片段,酶切鉴定及DNA序列测定证实pVAX1-MOMP重组质粒构建正确,能在COS-1细胞内表达,表达产物能与抗MOMP单克隆抗体特异性结合。结论：成功构建E型沙眼衣原体MOMP真核表达质粒pVAX1-MOMP,并在真核细胞内获得表达。     

巨细胞病毒感染人脐静脉内皮细胞后RAGEmRNA的时序性表达及其意义

目的：研究人巨细胞病毒(HCMV)感染对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)糖基化终产物受体(RAGE)表达的影响，探讨HCMV感染致动脉粥样硬化的作用机制。方法：用HCMV感染HUVEC，采用RT PCR方法检测不同感染时段细胞RAGEmRNA的表达。结果：HCMV感染HUVEC后，0?h时RAGEmRNA有基础水平的表达，4?h开始升高，8?h时表达水平明显升高，随感染时间延长，表达量逐渐增高，感染24?h时达高峰，48?h开始回落，72?h表达量仍维持在较高的水平，显著高于0?h。各时段与0?h比较，均有统计学意义(P＜0.01)。结论：HCMV感染人脐静脉内皮细胞后能够促进RAGE mRNA的表达，并且呈时间依赖性。HCMV有可能通过上调RAGE介导内皮细胞的炎症反应，促进动脉粥样硬化的发生、发展。     

舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的观察不同剂量舒芬太尼（SFT）后处理的心肌保护作用。方法健康SD雄性大鼠24只,体重250 g~300 g,随机分为假手术组、缺血再灌注组、舒芬太尼后处理低剂量组、舒芬太尼后处理高剂量组。采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注模型。假手术组完成模型仅穿线,不结扎;假手术组穿线后腹腔注射生理盐水1 mL,缺血再灌注组缺血再灌注前2 min腹腔注射生理盐水1 mL,舒芬太尼后处理低、高剂量组分别腹腔注射舒芬太尼稀释液1 mL,2μg/kg、10μg/kg。于实验结束时制作心肌组织匀浆,检测心肌组织中的超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）含量;右心室采血常温离心分离检测血清心肌酶（CK）、血清乳酸脱氢酶（LDH）、血清一氧化氮（NO）含量,取左心室切5块,采用氯化硝基四氮唑蓝（N-BT）染色法区分正常和梗死区,用梗死区重量占左心室重量百分比观测梗死程度。结果与假手术组比较,缺血再灌注组心肌组织SOD活性下降,MDA增高,血清CK及LDH水平增高,血清NO含量减少;与缺血再灌注模型组比较,舒芬太尼后处理组,心肌组织SOD活性升高,MDA降低,血清CK及LDH释放减少;血清NO含量增加;再灌注心律失常明显减少;心肌梗死程度降低;以舒芬太尼后处理高剂量组更为明显。结论舒芬太尼后处理能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的程度,并且呈剂量依赖性。     

二烯丙基三硫醚对幽门螺杆菌生物膜的杀菌作用

目的 探讨二烯丙基三硫醚（DATS）对幽门螺杆菌生物膜的杀菌作用,进一步研究生物膜耐药的机制。 方法微量肉汤法测定药物的最小抑菌浓度,平板培养法构建幽门螺杆菌生物膜的体外模型,XTT法检测药物处理后浮游状态与生物膜状态下的幽门螺杆菌活性,激光共聚焦显微镜观察生物膜深层的细菌状态以及活性变化。 结果克拉霉素与DATS对浮游状态的幽门螺杆菌均有良好的杀菌作用;使用不同浓度克拉霉素处理后的幽门螺杆菌生物膜活性明显低于对照组;DATS处理后的幽门螺杆菌生物膜活性下降明显,与对照组和克拉霉素组有统计学差异。结论 DATS对浮游状态和生物膜状态下的幽门螺杆菌均具有良好的杀菌活性,可以为耐药菌临床治疗提供参考。     

人巨细胞病毒和糖基化终产物共同作用对血管内皮细胞的影响

目的：观察人巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV）和糖基化终产物（advanced glycation end products, AGEs）共同作用对血管内皮细胞（vein endothelial cells，ECV）氧化应激的影响及对糖基化终产物受体（the receptor for advanced glycation end products, RAGE）表达的影响，明确HCMV和AGEs在致内皮细胞损伤作用中是否具有协同效应，探讨HCMV和AGEs致动脉粥样硬化 （AS）发生和发展的可能机制。方法：用HCMV和AGEs分别及共同作用于ECV，将实验对象分为：对照组、HCMV组、牛血清白蛋白（BSA）组、AGEs组、AGEs＋HCMV组5组；用激光共聚焦显微镜检测细胞内活性氧（ROS）的改变；采用RT-PCR方法检测血管内皮细胞RAGEmRNA的表达。结果：HCMV感染ECV后，对照组荧光强度和BSA组荧光强度均较弱，两组间比较差异无统计学意义（P>0.05）；AGEs组和HCMV组荧光强度强于对照组（P<0.01）；AGEs＋HCMV组荧光强度高于AGEs组和HCMV组（P<0.05），两者联合作用存在协同效应。对照组和BSA组ECV细胞RAGEmRNA均有低水平表达，两组之间比较无差异（P>0.05）；AGEs组和HCMV感染组RAGEmRNA表达量高于对照组（P<0.01）；AGEs＋HCMV组表达量高于AGEs组和HCMV组（P<0.01）。在相同病毒滴度感染的情况下，随AGEs浓度增加RAGEmRNA的表达增高，呈浓度依赖性；在相同AGEs浓度作用时，随HCMV感染滴度增加RAGEmRNA的表达水平升高，呈滴度依赖性。各组之间比较差异有统计学意义（P<0.05）。结论：HCMV和AGEs均能够增强血管内皮细胞氧化应激，促进RAGEmRNA的表达，两者共同作用时呈协同效应。HCMV和AGEs有可能通过协同增强氧化应激、进一步上调RAGEmRNA的表达，介导血管内皮细胞的炎症反应，促进动脉粥样硬化的发生、发展。     

针灸治疗功能性消化不良现代临床文献计量分析及其选穴特点探讨

目的:总结针灸治疗功能性消化不良(FD)的临床运用趋势,探讨其处方选穴特点。方法:用回顾性临床文献研究方式,检索中国期刊全文数据库(CNKI)1993—2013年公开发表的针灸治疗FD的临床研究文献,应用文献计量学研究方法进行统计分析。结果和结论:针灸治疗FD的临床运用率逐年递增,尤其是近4年关注度明显提高。针灸治疗FD选穴紧扣本病病机,分经选穴以胃经穴及任脉上与胃腑相关的腧穴最为多用,配伍脾经穴,重在和胃健脾;分类选穴多用特定穴,近取俞募穴调节脏腑功能,远取合穴、八脉交会穴等疏调经气,远近相配,协同增效;使用频次居前三位的腧穴为足三里、中脘、内关。     

阿托伐他汀联合非诺贝特治疗急性冠脉综合征临床疗效分析

目的阿托伐他汀联合非诺贝特治疗急性冠脉综合征（Acutecoronarysyndrome,ACS）临床效果。方法将60例ACS患者随机分成实验组和对照组,各30例,实验组采取常规治疗并加用阿托伐他汀,对照组在实验组的基础上加用非诺贝特,比较2组患者治疗效果。结果治疗后2组患者其TG、TC、LDL-C、HDL-C等均优于治疗前（P〈0．05）,但实验组治疗后血脂水平改善明显优于对照组（P〈0．05）;实验组患者其治疗后胸痛发作频率及持续时间变化比较明显少于对照组（P〈0．05）;均无严重不良反应。结论阿托伐他汀联合非诺贝特是治疗急性冠脉综合征一种安全有效的治疗方法。