靶向性反向半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3重组腺病毒诱导肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 观察靶向性反向半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(r-caspase-3)重组腺病毒体外诱导肝癌细胞凋亡的效果和特异性.方法 构建甲胎蛋白(AFP)增强子和白蛋白(ALB)启动子腺病毒载体(pAdTrack-EAFP-PALB),亚克隆r-caspase-3至载体pAdTrack-EAFP-PALP,Pme Ⅰ线性化pAdTrack-EAFP-PALB/r-caspase-3,电转化至BJ/AdEasy菌,获得重组腺病毒骨架pAdeasy-EAFP-PALB/r-caspase-3.Pac Ⅰ酶切后脂质体转染AD293细胞进行包装、扩增、获得病毒.绿色荧光蛋白(GFP)监测病毒滴度和感染效率;RT-PCR和Western印迹法检测r-caspase-3在HepG2细胞中的表达;流式细胞术检测其特异性诱导肝癌细胞凋亡的作用.结果 穿梭载体pAdTrack-EAFP-PALB/r-caspase-3酶切、测序正确.穿梭载体、pAdeasy-1载体同源重组后PCR及Pac Ⅰ酶切鉴定结果表明pAdeasy-EAFP-PALB/r-caspase-3重组成功.转染AD293细胞后可观察到GFP的表达.病毒感染HepG2细胞总DNA经RT-PCR和Western印迹均可检测到目的 基因的表达,证实Ad-EAFP-PALB/r-caspase-3病毒颗粒包装成功;靶向性r-caspase-3重组腺病毒感染各组细胞24 h后,各组凋亡指数分别为:HepG细胞48.2%、7721细胞17.7%、L-02细胞7.3%、MDA-MB-231细胞0%.结论 成功构建了靶向性Ad-EAFP-PALB/r-caspase-3重组腺病毒,体外实验表明其具有凋亡诱导靶向性,为进一步研究靶向性r-caspase-3基因治疗肝细胞肝癌及其生物学功能提供了依据.     

胰头癌姑息性手术的手术方式选择

目的 研究不同手术术式对中晚期胰头癌姑息性手术的治疗效果.方法 以本院接诊的41例中晚期胰头癌患者的临床资料进行回顾性分析,按照不同的术式分为3组,采取单纯胆囊空肠吻合术者共13例,采取肝(胆)总管空肠吻合术者共14例,采取胆肠吻合结合胃空肠吻合术者共14例,对比3组患者的30 d死亡率、术后黄疸或者胆管炎复发率以及生存期.结果 胆肠吻合结合胃空肠吻合术组术后生存期为(14.0±0.5)个月,死亡率为0,复发率为7.14%;单纯胆囊空肠吻合术组的生存期为(7.1±0.3)个月,死亡率为15.38%,复发率为61.53%;肝(胆)总管空肠吻合术组生存期为(10.3±0.3)个月,死亡率为7.14%,复发率为14.28%;3组比较,差异有统计学意义(P < 0.05).结论 中晚期胰头癌姑息性手术应尽可能选择胆肠吻合结合胃空肠吻合术,疗效更好.     

结直肠癌肝转移的手术时机和手术方式探讨

目的探讨结直肠癌肝转移的手术时间、手术方式及疗效。方法回顾性分析我院2006年12月至2009年5月收治的40例结直肠癌肝转移患者的临床资料。结果40例患者中13例进行同期切除,19例分期切除,5例通过肝动脉结扎辅以化疗,泵注化疗6个月后获得二期肝转移病灶,剩余3例通过肝动脉结扎辅以无水乙醇注射治疗。手术方式：肝不规则切除26例,右半肝切除7例,左半肝切除7例。40例患者平均生存时间为（32．8±6．5）个月,其中同期手术的生存时间显著短于分期手术（P〈0．05）。结论对于结直肠癌肝转移患者必需把握手术时机,掌握手术适应症,并选择合理的手术方式和治疗手段,以延长患者的生存期。     

cN0期分化型甲状腺癌行中央区淋巴结清扫及预防性侧颈淋巴结清扫的价值

目的:探讨cN0期(颈淋巴结阴性)甲状腺癌患者同时行中央区淋巴结清扫及预防性侧颈淋巴结清扫的价值.方法:总结56例分化型甲状腺癌患者的病例资料,特别是手术方法、中央区淋巴结是否转移与侧颈淋巴结转移的关系、原发灶大小与中央区淋巴结转移关系及随访等情况,比较无行预防性侧颈淋巴结清扫(A组)与有行预防性侧颈淋巴结清扫(B组)患者的疗效.结果:56例患者中17例中央区淋巴结转移阳性(A组7例,B组10例),其中11例有侧颈淋巴结转移(A组3例,B组8例),转移率为65%(11/17);39例中央区淋巴结转移阴性,其中6例有侧颈淋巴结转移(A组4例,B组2例),转移率为16%(6/39).中央区淋巴结转移阳性与阴性的转移率比较差异具统计学意义,P<0.01.56例中47例原发病灶最大径小于或等于4 cm,中央区淋巴结转移阳性11例(23%);9例原发病灶最大径超过4 cm,6例(6/9)中央区淋巴结转移阳性,两者转移率比较差异具统计学意义,P<0.05.A组7例(23%)复发,B组3例(12%)复发,两组复发率比较差异具统计学意义,P<0.05.结论:对cN0期甲状腺癌患者行中央区淋巴结清扫十分必要.术中应常规将中央区淋巴组织送检,有转移阳性者应行预防性侧颈淋巴结清扫.     

甲状腺系膜切除术在甲状腺乳头状癌患者中央区淋巴结清扫中的效果分析

目的将甲状腺系膜切除术用于甲状腺乳头状癌患者中央区淋巴结清扫中,对其应用效果进行分析。方法对该院收治的72例甲状腺乳头状癌患者分组研究,甲组行甲状腺系膜切除术淋巴结清扫,乙组行常规中央区淋巴结清扫,对两组治疗结果进行比较。结果两组治疗前甲状旁腺激素(PTH)、血钙水平差异无统计学意义(P0.05),治疗后,甲组PTH、血钙水平与乙组相比,相对更低,差异有统计学意义(P 0.05);甲组复发转移率为2.78%,与乙组的5.56%相比,相对更低,但组间差异无统计学意义(P0.05);甲组并发症率为5.56%,与乙组的22.22%相比,相对更低,差异有统计学意义(P 0.05)。结论对甲状腺乳头状癌患者实施甲状腺系膜切除术清扫中央区淋巴结效果理想,可降低复发转移率和并发症率,值得应用。     

肝硬化患者发生肝胆结石的影响因素分析

研究肝硬化患者发生肝胆结石的影响因素。选取2016年1月至2018年10月于我院接受治疗的肝硬化合并肝胆结石患者80例为研究对象(研究组)。另取同期于我院接受治疗的未发生肝胆结石的肝硬化患者80例为对照组。比较两组临床基本资料、实验室检查指标以及腹水量,并对差异有统计学意义的因素行多因素Logistic回归分析。研究组肝炎性肝硬化占比、腹水量、总胆固醇水平均较对照组高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,肝炎性肝硬化、腹水是肝硬化患者发生肝胆结石的独立危险因素(P<0.05)。肝硬化患者肝胆结石发生的影响因素包括肝炎性肝硬化和腹水,临床工作中应针对上述因素制定相关干预措施,以降低肝胆结石发生的风险。     

肝细胞肝癌靶向性r-Caspase-3重组腺病毒的构建与表达

目的 构建肝细胞肝癌特异性表达反向半胱氨酸蛋白酶3(r-Caspase-3)重组腺病毒,为肝细胞肝癌的基因治疗提供新策略.方法 构建甲胎蛋白(AFP)增强子和白蛋白 (ALB) 启动子腺病毒载体(pAdTrack-EAFP-PALB),然后将目的 基因r-Caspase-3亚克隆到载体pAdTrack-EAFP-PALB上, 获得重组腺病毒穿梭载体pAdTrack-EAFP-PALB /r-Caspase-3, 经PmeⅠ酶切线性化后与pAdEasy-1同源重组,获得重组腺病毒骨架pAdEasy-EAFP-PALB /r-Caspase-3; 鉴定正确的pAdEasy-EAFP-PALB /r-Caspase-3 经PacⅠ酶切线性化后脂质体转染AD293 细胞进行包装、扩增,获得病毒.绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)监测病毒滴度和感染效率; RT-PCR和Western blot 法检测r-Caspase-3在HepG2细胞中的表达; SRB染色法评估重组腺病毒对HepG2细胞的抑制作用,初步观察HepG2细胞凋亡状况.结果 穿梭载体pAdTrack-EAFP-PALB/r-Caspase-3酶切、测序正确.穿梭载体、pAdEasy-1载体同源重组后PCR 及PacⅠ酶切鉴定结果表明pAdEasy-EAFP-PALB/r-Caspase-3 重组成功; 经PacⅠ酶切线性化后,pAdEasy-EAFP-PALB/r-Caspase-3 转染AD293 细胞即可观察到GFP 的表达; 回收病毒可重复感染AD293 细胞,RT-PCR和Western blot 均可检测到r-Caspase-3的表达,证实Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3病毒颗粒包装成功; SRB染色检测发现Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3具有凋亡诱导特异性.结论 靶向性Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3重组腺病毒构建成功,并具有凋亡诱导靶向性,为进一步研究靶向性r-Caspase-3基因治疗肝细胞肝癌及其生物学功能奠定了基础.