大鼠骨髓间充质干细胞在特定培养液条件下向软骨细胞表型定向分化的实验

背景：组织工程化软骨的构建为软骨缺损的修复开辟了全新的途径，克服了传统治疗方法的不足、目的：探讨分离骨髓间充质干细胞，在特定培养液条件下诱导其向软骨细胞表型转化的体外培养方法。设计：完全随机实验单位：广西医科大学第一附属医院创伤骨科、手外科及广西医科大学组织学与胚胎学教研率方法：实验于2002-08／2003-04在广西医科大学完成。实验动物选择新生断奶SD大鼠20只抽取大鼠四肢骨髓，Perrcoll梯度分离液离心分离结合贴擘筛选法得到间充质下细胞，在含体积分数0．15的胎牛血清的低糖DMEM培养液中，置于37℃，体积分数为0．05的CO2培养箱内培养10～14d。传代后以体积分数0.15的胎牛血清的高糖DMEM培养液（含转化生长因子β1 10μg/L．地塞米松10^-7mol/L维生素C50mg／L）对其进行诱导培养。主要观察指标：观测在体外特定培养条件下间充质干细胞的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况结果：所有20只SD大鼠全部进行分析观察，无一例脱失：①分离获取了较高纯度的骨髓间充质干细胞，保持了细胞的活性。②骨髓间充质干细胞原代培养晕均匀分布的集落样生长，呈长梭形；传代培养中形态特性无明显变化，细胞增殖周期缩短，细胞均质性明显提高。③诱导后的细胞由梭形向多角形转变，Ⅱ型胶原免疫组化阳性。④诱导培养后软骨特异性基质Ⅱ型胶原免疫组化阳性结论：①采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的骨髓间充质十细胞②间充质于细胞在体外特定培养条件下能大量增殖，实现数量扩增、③间充质干细胞在特定培养液的诱导下能向软骨细胞表型转化，并能分泌软骨特异性基质，可成为软骨组织工程理想的种子细胞。     

关节镜下自体半腱肌腱和股薄肌腱重建前交叉韧带21例

2002年3月至2004年8月我们采用关节镜下半腱肌腱和股薄肌腱重建前交叉韧带(ACL)21例,获得良好疗效,现报告如下.     

大鼠骨髓间充质干细胞在特定培养液条件下向软骨细胞表型定向分化的实验

背景组织工程化软骨的构建为软骨缺损的修复开辟了全新的途径,克服了传统治疗方法的不足.目的探讨分离骨髓间充质干细胞,在特定培养液条件下诱导其向软骨细胞表型转化的体外培养方法.设计完全随机实验.单位广西医科大学第一附属医院创伤骨科、手外科及广西医科大学组织学与胚胎学教研室.方法实验于2002-08/2003-04在广西医科大学完成.实验动物选择新生断奶SD大鼠20只.抽取大鼠四肢骨髓,Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法得到间充质干细胞,在含体积分数0.15的胎牛血清的低糖DMEM培养液中,置于37℃,体积分数为0.05的CO2培养箱内培养10～14 d.传代后以体积分数0.15的胎牛血清的高糖DMEM培养液(含转化生长因子β110μg/L,地塞米松10-7mol/L,维生素C 50 mg/L)对其进行诱导培养.主要观察指标观测在体外特定培养条件下间充质干细胞的形态、生长特点和诱导培养后软骨特异性基质的表达情况.结果所有20只SD大鼠全部进行分析观察,无一例脱失.①分离获取了较高纯度的骨髓间充质干细胞,保持了细胞的活性.②骨髓间充质干细胞原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈长梭形;传代培养中形态特性无明显变化,细胞增殖周期缩短,细胞均质性明显提高.③诱导后的细胞由梭形向多角形转变,Ⅱ型胶原免疫组化阳性.④诱导培养后软骨特异性基质Ⅱ型胶原免疫组化阳性.结论①采用Percoll梯度分离液离心分离结合贴壁筛选法可获得较高纯度和活性的骨髓间充质干细胞.②间充质干细胞在体外特定培养条件下能大量增殖,实现数量扩增.③间充质干细胞在特定培养液的诱导下能向软骨细胞表型转化,并能分泌软骨特异性基质,可成为软骨组织工程理想的种子细胞.     

注射用苦碟子对心肌缺血的影响

目的考察注射用苦碟子对实验性急性心肌缺血的保护作用及可能机制。方法采用结扎犬冠状动脉左前降支造成急性心肌缺血模型,测量心外膜心电图(E ECG)、心肌梗死面积、血清中乳酸脱氢酶(LDH)、磷酸肌酸肌酶(CK)、谷草转氨酶(GOT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活力及丙二醛(MDA)含量。结果注射用苦碟子能显著降低心肌梗死犬的心肌梗死程度(ΣST)和心肌梗死范围(N ST)。注射用苦碟子2.4 g.kg-1可时间依赖性的降低冠脉结扎犬心肌梗死程度和心肌梗死范围,给药后30 minΣST即明显下降,ΣST在30 min和180 min分别较给药前降低了约29%和46%;N ST在60 min和180 min分别较给药前降低了约41%和46%;注射用苦碟子1.2、0.6 g.kg-1剂量组在120 min和180 min时,ΣST、N ST较90 min时略有上升,但与生理盐水对照组比较差异仍显著。注射用苦碟子可剂量依赖性的降低犬血清中LDH、GOT、CPK活力和MDA含量,升高SOD活力。结论注射用苦碟子对心肌缺血具有保护作用。     

儿童陈旧孟氏骨折的治疗进展

儿童孟氏骨折由于各种原因的漏诊、误诊常发展为陈旧骨折,严重影响肘关节生长发育.目前对陈旧孟氏骨折的研究报道很多,治疗方法多样,但尚缺少规范化的治疗标准.本文通过检索国内外文献,对儿童陈旧孟氏骨折的手术治疗及术后并发症作一综述.尺骨截骨联合切开复位以及根据术中情况决定是否实施环状韧带重建是目前广泛采用并且有效的手术治疗措施,术后并发症主要为桡骨头半脱位、关节活动受限.     

腕掌侧浅静脉移植在复杂断指再植中的应用

目的 探讨腕掌侧浅静脉移植在复杂断指再植中应用的方法和疗效。方法 对腕掌侧浅静脉进行解剖学观察，并应用此段浅静脉移植，修复复杂断指的血管缺损16例。结果通过解剖学观察，了解腕掌侧存在1～2条较为恒定的浅静脉，其直径与手指固有动脉、指背静相近。对11例伴有血管缺损的复杂断指和5例再植术后血管危象病例，共进行浅静脉移植22指(动脉20条、静脉4条)，优良率达85．0％。结论 腕掌侧浅静脉移植具有位置恒定，直径适宜，取材方便等优点，适合在复杂断指再植中血管移植。     

股骨近端内翻截骨联合Salter截骨术治疗Perthes病的早期疗效评价

目的评价股骨近端内翻截骨联合Salter截骨术治疗Perthes病的早期疗效。方法回顾性分析自2011-08—2014-08采用股骨近端内翻截骨联合Salter截骨术治疗的23例Perthes病,比较术前及末次随访时髋臼指数、头骺突出指数、中心边缘角,末次随访时按Mckay标准评定髋关节功能,按改良Stulberg分级标准评定患髋预后。结果 23例均获得随访,随访时间平均39(26~67)个月。术后无感染、内固定松动,截骨端愈合良好。20例髋关节屈伸、内收、外展、屈髋位内外旋基本正常,3例屈曲中度受限,屈髋位内外旋活动度欠佳。末次随访时改良Stulberg分级:优14例,良7例,差2例。末次随访时髋关节功能按Mckay标准评定:优14例,良6例,可3例,优良率86.9%。末次随访时髋臼指数、头骺突出指数均较术前减小,而中心边缘角增大,差异有统计学意义(P0.05)。结论股骨近端内翻截骨联合Salter截骨术治疗Perthes病能明显改善患髋的头臼包容及恢复患儿髋关节功能,早期疗效确切。     

12例开放性腋动脉损伤的诊治

目的探讨开放性腋动脉损伤的诊治体会。方法1996年-2002年，共诊治12例开放性腋动脉损伤的患者，从受伤到入院时间为3～14h，入院时均处于不同程度的休克状态，桡动脉搏动减弱或消失。在积极抗休克治疗的同时，急诊进行清创、血管神经探查和修复术。其中行腋动脉修补5例，腋动脉直接吻合6例，自体静脉移植修复1例。结果伤后8h内腋动脉再通8例，8～16h内腋动脉再通4例，无病例发生截肢或死亡。术后伤口均Ⅰ期愈合，桡动脉搏动良好。结论对开放性腋动脉损伤早期诊断和及时手术探查是控制休克、获取良好疗效的关键。     

胎儿颌面颈部先天性囊性肿块的MRI诊断

目的：分析胎儿颌面颈部先天性囊性肿块的 MRI特点,提高产前胎儿影像诊断水平。方法：回顾性分析16例胎儿颌面颈部囊性肿块的 MRI表现,并与产后手术病理或尸检结果对照。结果：12例淋巴管畸形多表现为多房状,多数分布于颈后部,呈蔓延性生长,可跨中线,合并出血时囊内可见出血信号及液液平面。3例鳃裂囊肿均呈单囊,分布于颈前胸锁乳突肌前方,T1 WI呈低或稍低信号。1例鞍区的脑膜膨出疝入口腔内形成一巨大囊肿,与脑脊液信号一致。结论：MRI可以清晰显示胎儿颌面颈部先天性囊性肿块的轮廓、部位、形态、信号特点,有助于不同囊性肿块的鉴别。MRI 还能很好地显示气道有无压迫,为产时胎儿宫外处理提供更多信息。