Quercetin对人气道平滑肌细胞增殖和迁移的影响及机制

目的 体外培养人气道平滑肌细胞(human airway smooth muscle cells,HASMCs),探讨槲皮素(Quercetin,Que)对血小板源性生长因子BB(PDGF-BB)刺激的HASMCs增殖和迁移的影响及其机制.方法体外培养HASMCs,分为六组；对照组、PdGF-BB组、Que与PDGF-BB联合干预组、Que组、U0126组、U0126与PDGF-BB联合干预组.四甲基偶氮唑蓝(MTT)微量比色法测定HASMCs增殖,transwell法观察细胞迁移,Western blot法检测ERK的磷酸化及Cyclin D1表达水平.结果 与对照组相比,PDGF-BB(20μg/L)显著诱导HASMCs增殖和迁移(P＜0.05),Que(20～80μmol/L)呈浓度依赖性抑制PDGF-BB诱导的HASMCs的增殖和迁移(P＜0.05).PDGF-BB组ERK磷酸化及Cyclin D1 表达水平较对照组明显增高(P＜0.05).Que(80μmol/L)及PDGF-BB干预组其表达量低于PDGF-BB组,此抑制作用与ERK特异性拮抗剂U0126作用相当(P＞0.05).结论 Que抑制PDGF-BB诱导的HASMCs的增殖和迁移,可能是通过调节ERK/Cyelin D1通路起作用.     

H2型松弛素对慢性支气管哮喘小鼠气道重塑与肺组织细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 研究H2型松弛素(H2Relaxin)对慢性支气管哮喘(简称哮喘)模型小鼠气道重塑及肺组织细胞周期蛋白D1 (cyclin D1)表达的影响,探素松弛素在哮喘治疗中的可能作用.方法 将40只BALB/c小鼠按随机数字表法分为健康对照组、哮喘组、阴性对照组(vehicle)、松弛素组4组,每组10只;卵清白蛋白(OVA)致敏、激发建立慢性哮喘小鼠模型;vehicle组和松弛素组每日分别给予生理盐水和松弛素(0.25 mg·kg-1 ·d-1)皮下注射.HE和马森(Masson)染色观察各组小鼠气道炎症及胶原沉积情况;采用免疫组织化学半定量法测定气道壁α-平滑肌肌动蛋白( α-SMA)的表达;酶联免疫吸附测定( ELISA)法检测肺组织羟脯氨酸含量;用逆转录-PCR(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)分别测定各组小鼠肺组织中cyclin D1mRNA和蛋白表达水平.结果 哮喘组、vehicle 组与健康对照组相比,嗜酸粒细胞浸润增多,气道管腔狭窄,平滑肌层增厚,胶原纤维增生,而松弛素组上述改变较此2组轻.与健康对照组相比,哮喘组、vehicle组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径显著增加(均P ＜0.05),松弛素组小鼠支气管α-SMA阳性染色面积/支气管基底膜周径低于哮喘组和vehicle组(均P＜0.05);哮喘组和vehicle组小鼠羟脯氨酸含量[每克肺组织中分别为(0.68±0.10)mg、(0.67±0.10) mg]高于健康对照组的(0.26±0.05)mg(q值分别为16.61和16.01,均P＜0.01),松弛素组小鼠羟脯氨酸含量为(0.40±0.06)mg,低于哮喘组和vehicle组(q值分别为10.88和10.26,均P＜0.05);Western blot检测结果显示,cyclin D1在哮喘组、vehicle组和松弛素组的表达(分别为1.38±0.18、1.50±0.10和0.72±0.13)高于健康对照组的0.38±0.10(q值分别为13.00、14.65和4.49,均P＜0.05),而松弛素组表达量低于哮喘组与vehicle组(q值分别为8.51和10.16,均P＜0.05).哮喘组与vehicle组各项检测指标间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 松弛素可以显著减轻慢性哮喘小鼠气道炎症反应和平滑肌层的增厚,延缓哮喘小鼠气道重塑进程,该作用可能部分与其下调cyclin D1表达有关.     

Sunitinib对支气管哮喘气道重塑小鼠模型Erk通路和cyclin D1表达的影响

目的 探讨sunitinib对支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的干预作用及可能的作用机制.方法 18只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组以及sunitinib组,每组6只;以卵清蛋白(OVA)致敏、激发,建立慢性哮喘气道重塑模型.Sunitinib组每次雾化吸人前半小时给予sunitinib(40 mg/kg)灌胃给药.OVA末次激发结束后24 h处死小鼠,HE染色观察气道炎症及形态学改变,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,免疫组织化学法观察肺组织增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(a smooth muscle actin,α SMA)表达水平.蛋白印记法(Western blot)测定细胞外信号调节蛋白激酶(extraeellular signal-regulated kinase,Erk)蛋白磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达.结果 HE染色示哮喘组小鼠黏膜下层和平滑肌层增厚,管腔狭窄,大量炎性细胞浸润,sunitinib组上述改变较哮喘组为轻;sunitinib干预后哮喘小鼠BALF中Th2细胞因子IL4、IL-13和血清总IgE以及肺组织羟脯氨酸含量显著降低(P＜0.01).哮喘组小鼠气道PCNA阳性细胞百分比、α-SMA表达及肺组织Erk磷酸化水平、cyclin D1蛋白表达较对照组明显升高(P＜0.01),sunitinib干预后其表达均降低(P＜0.01).结论 Sunitinib可能通过抑制Erk途径影响cyclin D1的表达,抑制了慢性哮喘模型中气道平滑肌的增殖,发挥抗气道重塑作用.     

布地奈德/福莫特罗粉吸入剂不同剂量对慢性阻塞性肺疾病稳定期患者的疗效观察

目的观察布地奈德/福莫特罗粉吸入剂(信必可都保)不同剂量治疗中-重度慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期患者的疗效。方法入选2009年2月至2012年12月来我院就诊的中-重度COPD稳定期患者,随机分为A、B、C组。A组(对照组)给予常规治疗,B组在常规治疗基础上加吸常规剂量信必可都保160μg/4.5μg,1吸/次,2次/d,C组在常规治疗基础上加吸大剂量信必可都保160μg/4.5μg,2吸/次,2次/d。评估各组治疗前、治疗3月和6月后的肺功能、临床症状评分,治疗期间急性加重人数及药物不良反应。结果 B、C组的总有效率优于A组(P<0.05),C组与B组间无统计学差异(P>0.05)。结论信必可都保吸入剂能改善中-重度COPD稳定期患者的临床症状及肺功能,大剂量组与常规剂量组间疗效无统计学差异,但不良反应显著高于常规剂量组。     

思力华联合舒利迭对稳定期COPD患者肺功能的疗效观察

目的观察联合应用思力华(沙美特罗替卡松粉吸入剂)和舒利迭(噻托溴铵粉吸入剂)治疗稳定期慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的临床疗效。方法96例稳定期中重度COPD患者被随机均分为两组,试验组(联合应用思力华和舒利迭)和对照组(仅应用舒利迭),两组患者治疗疗程为3个月。观察两组患者临床症状、动脉血气分析、肺功能的改善情况,比较两组患者治疗疗效的差异。结果①治疗后对照组和试验组患者临床症状均有明显改善,且试验组患者临床缓解率明显高于对照组患者,P<0.05,差异具有统计学意义。②治疗后对照组和试验组患者FEV1%、FEV1/FVC、PaO2均较治疗前升高,PaCO2较治疗前减低;且治疗后试验组患者较对照组患者FEV1%、FEV1/FVC、PaO2高,PaCO2较对照组低,P<0.05,差异具有统计学意义。③治疗组和对照组均无明显不良反应发生。结论联合应用思力华和舒利迭有利于改善COPD稳定期患者的肺功能。     

血管性认知障碍危险因素的探讨及早期监测

<正>血管性因素是导致认知功能下降和痴呆的第2位原因,>60%的脑卒中患者存在不同程度的认知功能障碍[1]。其中四分之一在脑卒中后12个月之内最终发展为痴呆[2]。血管性认知障碍(VCI)是临床常见的一类痴呆。本研究旨在探讨脑血管病危险因素与认知障碍的关系。     

Sunitinib对支气管哮喘气道重塑小鼠模型Erk通路和cyclin D1表达的影响

目的探讨sunitinib对支气管哮喘(简称哮喘)气道重塑的干预作用及可能的作用机制。方法 18只BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组以及sunitinib组,每组6只;以卵清蛋白(OVA)致敏、激发,建立慢性哮喘气道重塑模型。Sunitinib组每次雾化吸入前半小时给予sunitinib(40mg/kg)灌胃给药。OVA末次激发结束后24h处死小鼠,HE染色观察气道炎症及形态学改变,采用ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中IL-4、IL-13和血清总IgE的表达,免疫组织化学法观察肺组织增殖细胞核抗原(proliferatingcell nuclear antigen,PCNA)、α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)表达水平。蛋白印记法(Westernblot)测定细胞外信号调节蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase,Erk)蛋白磷酸化水平及细胞周期蛋白D1(cyclin D1)的表达。结果 HE染色示哮喘组小鼠黏膜下层和平滑肌层增厚,管腔狭窄,大量炎性细胞浸润,sunitinib组上述改变较哮喘组为轻;sunitinib干预后哮喘小鼠BALF中Th2细胞因子IL-4、IL-13和血清总IgE以及肺组织羟脯氨酸含量显著降低(P0.01)。哮喘组小鼠气道PCNA阳性细胞百分比、α-SMA表达及肺组织Erk磷酸化水平、cyclin D1蛋白表达较对照组明显升高(P0.01),sunitinib干预后其表达均降低(P0.01)。结论 Sunitinib可能通过抑制Erk途径影响cyclin D1的表达,抑制了慢性哮喘模型中气道平滑肌的增殖,发挥抗气道重塑作用。     

sunitinib对人气道平滑肌细胞分泌纤维连接蛋白的影响及其机制研究

目的 探讨sunitinib对血管内皮生长因子165 (VEGF165)刺激的人气道平滑肌细胞(human airway smooth muscle cells,HASMCs)合成、分泌纤维连接蛋白(fibronectin,FN)的影响及其相关机制.方法 将HASMCs分成6个组:对照组、VEGF165组、VEGF165与sunitinib联合干预组、sunitinib组、U0126组、U0126与sunitinib联合干预组.Western blot检测p-VEGFR2、p-ERK表达水平.ELISA检测细胞上清液中FN的表达水平.结果 与对照组相比,VEGF165组p-VEGFR2、p-ERK 及FN表达水平增高(P＜0.05);sunitinib(3 nmol/L)干预后p-VEGFR2、p-ERK及FN表达水平下降(P＜0.05),其对ERK磷酸化及FN表达的抑制作用与ERK特异性拮抗剂U0126对ERK磷酸化及FN表达的抑制作用相当(P＞0.05).结论 sunitinib 抑制VEGF165诱导的HASMCs合成、分泌FN,可能是通过抑制VEGFR2磷酸化水平从而进一步调控ERK通路起作用.