抗食管癌单克隆抗体及食管癌细胞膜抗原的初步研究

以食管癌“109”细胞株免疫 BALB/C 小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞株SP2/0 融合,经三次克隆化,获得稳定分泌抗食管癌“109”细胞株单克隆抗体的杂交瘤细胞系2GF3。其分泌的单克隆2GF3抗体与外周血淋巴组胞、ABO 型红细胞、癌胚抗原以及3/5胃癌细胞株无反应,与2/5胃癌细胞株有弱(+)反应。与2GF3抗体对应的抗原为2GF3抗原,荧光标记检测表明后者主要表达在细胞膜上。用去污剂提取膜抗原进行电泳后转移至硝酸纤维素膜上进行酶标分析,2GF3抗原是分子量53KD 的糖蛋白,在还原及非还原条件下均显示相同的区带。它与抗癌胚抗原抗体及抗甲胎蛋白抗体均无反应,表明它不同于癌胚抗原和甲胎蛋白。     

应用激光扫描共聚焦显微镜观察晶体上皮细胞中的游离钙

目的用钙的荧光指示剂ｆｌｕｏ－３和激光扫描共聚焦显微镜（ｌａｓｅｒｓｃａｎｎｉｎｇｃｏｎｆｏｃａｌｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ，ＬＳＣＭ）观察大白鼠的晶体上皮细胞（ｌｅｎｓｅｐｉｔｈｅｌｉａｌｃｅｌ，ＬＥＣ）中的游离钙。方法ｆｌｕｏ－３着染细胞后，应用ＬＳＣＭ观察细胞内ｆｌｕｏ－３与钙螯合后的荧光分布，最后用钙离子载体Ａ２３１８７和重金属离子Ｍｎ＋＋作校正，将ｆｌｕｏ－３与钙结合显示的荧光强度转换为［Ｃａ＋＋］ｉ值。结果ＬＥＣ中的游离钙主要分布在细胞核中。大白鼠晶体上皮细胞中的［Ｃａ＋＋］ｉ为２５９．７９±４９．２４ｎｍｏｌ／Ｌ。结论ｆｌｕｏ－３与ＬＥＣ孵育后能着染细胞。用ＬＳＣＭ能直观地观察细胞内钙的分布，并能通过校正得到细胞内游离钙的绝对值。这种成熟的方法，为进一步对ＬＥＣ中游离Ｃａ＋＋的研究提供技术准备     

郑州中华按蚊自然种群净增殖率和其他参数的研究

目的：获得中华按蚊自然净增殖率和其他种群动力学参数。方法：于1993年、1994年的7～8月份,在郑州郊区的水塘和稻田内,以实验种群动力学为基础,采用数学模型,计算出中华按蚊的净增殖率和其他种群参数值,并和实验种群参数值进行比较。结果：和实验种群动力学相比,除了平均世代周期长和12 d后成蚊存活百分比相近外,其余各项参数值明显偏低。结论：野外自然因素和天敌对中华按蚊所构成的环境阻力是很大的。计算出该蚊自然种群动力学的参数值对防蚊灭疟策略的制定具有重要意义。     

自然界中华按蚊种群研究工具及其在生命表制作中的应用

目的：为了能在自然界大型水体和旷野中对中华按蚊种群进行研究。方法：研制出适合于稻田浅水定量研究的实验简,适合于深水的实验网和接近自然状态的大实验笼。应用这些工具进行了自然界中华按蚊种群生命表的研究。结果：利用系列研究工具定量研究出1988年第8代中华按蚊自然种群生命表。求出各发育历期的死亡数和死亡因素,死亡率,存活率和死亡因素k值,分析出各发育阶段的关键死亡因素,计算下代预计产卵量为8288粒,种群趋势指数I为6．3027。结论：系列研究工具使中华按蚊自然种群的定量研究成为可能。郑州中华按蚊第9代种群数量还趋于增加之中。     

自然界郑州中华按蚊传疟媒介能量的研究

目的了解自然界郑州中华按蚊传播间日疟的潜在能力。方法采用媒介能量诸因素定量调查和运用数学模型的方法。结果计算出中华按蚊叮人率、人血指数、叮人习性、经产蚊比率、生殖营养周期、每日存活率、预期寿命、孢子增殖时间、有传疟性蚊的比率,预期传疟蚊寿命、媒介能量等参数值。结论每年7月下旬、8月上、中旬郑州中华按蚊的媒介能量最高,潜在存在着间日疟流行或暴发流行的可能。     

自然界郑州中华按蚊种群动力学参数

目的探讨自然界内郑州中华按蚊种群的繁衍动力学。方法采用自然调查和数学生态学的方法。结果求出自然界郑州中华按蚊1998年第6代的净增殖率Ro为3．522O,平均世代周期T为22．9420d,增长能力rc为O．0549,有限增殖速率λ为1．0564,种群增长1倍的时间t为12．6256d,雌蚊预期寿命ex为5．5加3d,瞬时出生率b为0．0620,瞬时死亡率d为0．0071,稳定年龄组配中未成熟期占98．2988％,成蚊占1．7012％。结论该研究为自然界中华按蚊种群的预测预报及防蚊灭疟策略的制订提供了可靠的科学依据。     

氩激光对培养的牛视网膜色素上皮细胞损伤的扫描电镜观察

目的采用扫描电镜观察氩激光对体外培养的牛视网膜色素上皮(RPE)细胞表面的损伤情况。方法培养牛视网膜色素上皮细胞,将第4代细胞传代成融合状态后,用氩激光对RPE细胞进行照射,激光能量为0.8W,曝光时间为0.2s,光斑直径为200μm,激光照射后用扫描电镜观察色素上皮细胞表面超微结构变化。结果激光照射后,可见光斑中央区的细胞脱失,光斑周边损伤细胞主要表现为表面微绒毛的减少或消失,微绒毛卷曲,有些细胞边缘卷曲及细胞膜破裂出现不规则小孔。结论激光对体外培养的RPE细胞照射可造成色素上皮细胞脱失,细胞膜损伤及微绒毛损伤。     

半乳糖对离体晶状体上皮细胞游离钙影响的实验研究

目的 观察高浓度半乳糖诱导正常离体晶状体上皮细胞中游离钙的变化以及钙离子阻滞剂维拉帕米对它的阻滞作用。方法 钙离子指示剂fluo-3与离体的正常品状体上皮细胞中游离钙螯合后，用激光扫描共聚焦显微镜观察35mmol／L半乳糖在不同条件下致细胞内荧光强度的变化。结果 35mmol半乳糖作用于离体品状体上皮细胞后可见细胞内与钙离子的荧光强度呈持续上升趋势，各个细胞上升的幅度及反应的速度有细微差别，但100s左右均出现上升趋势。先加2mg／mL的维拉帕米，2min后加半乳糖溶液至终浓度为35mmol，观察5min只见基本正常的钙波动，未见明显的钙上升或下降改变。结论 半乳糖溶液能致离体晶状体上皮细胞中游离钙升高，维拉帕米能有效地抑制此过程。     

GP73在肝癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系

目的：探讨GP73在肝癌组织中的表达及其与患者临床病理特征的关系。方法：采用RT-PCR及Western blot方法检测20例肝癌、相应癌旁组织和10例正常肝组织中GP73 mRNA及蛋白的表达情况,并分析其表达水平与临床病理特性的关系。结果：肝癌组织中,GP73 mRNA与蛋白表达水平均明显高于癌旁组织和正常肝组织（1.25±0.17 vs. 0.62±0.06,0.46±0.03;2.20±0.26 vs. 0.87±0.07,0.26±0.04）（均P<0.05）;GP73 mRNA及蛋白的表达水平在血管有无侵犯及肿瘤分化程度分组间差异有统计学意义,有血管侵犯和肿瘤分化低者GP73表达水平高于无侵犯及分化高者（均P<0.05）,而与患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤数目及血清甲胎蛋白（AFP）水平无明显关系（均P>0.05）。结论：GP73在肝癌组织中高表达,其表达水平与肝癌侵袭性密切相关;它有望成为新的判断肝癌侵袭性及术后转移复发的标志物。     

超声衰减成像技术评价肝脂肪变性的相关因素分析

目的探讨影响超声衰减系数（AC）变化的相关因素,并评估衰减成像（ATI）技术对非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）定量诊断的临床实用性及测量的可重复性。 方法选取2019年9月至2020年12月在哈尔滨医科大学附属第一医院使用超声的ATI技术进行肝检测的114例受试者（NAFLD组56例,健康对照组58例）,分别获得二维超声和AC,同时收集患者相应的临床资料、血生化检测指标等,通过多因素线性回归分析确定AC的独立影响因素。使用常规二维超声检查对所有研究对象的肝脂肪变性程度进行四分制评分（S0~S3组）,采用方差分析检验各组间AC的差异性,使用Spearman相关分析方法评估AC与肝脂肪变性程度的相关性,并计算组内相关系数（ICC）,评估2名操作者间（AC-1组和AC-2组）ATI测量的可重复性。 结果多因素线性回归分析显示体质量指数（BMI）、肝脂肪变性程度是AC的独立影响因素（β=0.007,95%CI：0.001~0.013,P=0.017;β=0.083,95%CI：0.070~0.095,P＜0.001）。NAFLD组AC显著高于健康对照组［AC-1组：（0.716±0.098）dB/（cm·MHz）vs（0.539±0.058）dB/（cm·MHz）;AC-2组：（0.699±0.102）dB/（cm·MHz）vs（0.542±0.053）dB/（cm·MHz）］,且随着肝脂肪变性程度的加重,AC逐渐升高［S0组（58例）AC为（0.539±0.058）dB/（cm·MHz）,S1组（23例）AC为（0.640±0.063）dB/（cm·MHz）,S2组（20例）AC为（0.718±0.050）dB/（cm·MHz）,S3组（13例）AC为（0.845±0.059）dB/（cm·MHz）;F=122.27,P＜0.001］。AC与肝脂肪变性程度存在较强的相关性（r=0.840;P＜0.001）。不同肝脂肪变性程度AC的组内相关系数（ICC）分别为0.816（95%CI：0.708~0.881）、0.886（95%CI：0.301~0.967）、0.876（95%CI：0.479~0.960）、0.939（95%CI：0.819~0.981）,P均＜0.001。 结论AC与BMI、肝脂肪变性程度显著相关,且ATI技术的操作者间可重复性极好,结果较为稳定,有助于早期发现脂肪肝并对脂肪肝严重程度进行评估。