整合素在角膜上皮创伤愈合中的研究进展

整合素作为一类重要的细胞黏附分子,通过影响细胞的形态,介导细胞的黏附、迁移和增生,在角膜上皮创伤愈合中发挥了重要的作用。讨论α2β1、α3β1、α5β1、αvβ3、α6β4、α9β1和αvβ6这7种整合素在角膜上皮创伤愈合中的研究进展及其临床意义。α6β4整合素为半桥粒的主要组成部分,介导角膜上皮细胞在细胞外基质上的静态黏附,损伤后该黏附就转变为α2β1、α3β1整合素介导的动态黏附,细胞在黏附-去黏附的过程中实现迁移,从而修复创面。α6β4、α3β1整合素相互协调作用,实现上皮细胞的板层状运动。研究还发现α6β4、α3β1整合素的活化还能促进细胞的增生。损伤后上皮细胞表面α5β1、αvβ3整合素的表达上调,二者与黏着斑的形成密切相关。α9β1和αvβ6为近年来新发现的与角膜上皮创伤愈合有关的整合素,其具体作用尚有待进一步的研究。     

损伤相关性角膜基质混浊的研究进展

细胞凋亡、生长因子、炎细胞及细胞因子与损伤引起的基质混浊密切相关.在损伤愈合早期抑制角膜细胞的凋亡可减轻基质混浊,而在中后期适当地促进肌成纤维细胞及炎细胞的凋亡也有助于减轻基质混浊.目前研究发现,在众多的TGF-β信号转导通路中,Smad通路与角膜损伤后基质混浊有关.FAK、uPA/uPAR、EMMPRIN和CTGF作为TGF-β的下游活化产物均参与了角膜成纤维细胞向肌成纤维细胞的分化,其中FAK起负性调控作用,而后三者则起正性调控作用.炎症反应及其他参与损伤愈合的因素也是引起基质混浊的原因.阐明这些因素的作用机制,诱导其向着有益于损伤愈合的方向发展也是目前研究的主要内容.     

组织工程角膜三维构建的实验研究

目的以人胚胎干细胞（hESC）诱导细胞为种子细胞,以脱细胞猪角膜基质（APCM）为支架三维构建生物工程角膜,以期用于穿透性角膜移植,解决角膜供体极度匮乏的难题。方法实验研究。无菌条件下将新鲜猪角膜组织置于0.5% SDS溶液中4 ℃脱细胞 24 h,获取APCM。将hESCs与人角膜基质细胞通过Transwell共培养5 d,获取眼周间充质干细胞（POMPs）,再于人晶状体上皮细胞源性条件培养基继续培养14 d获取角膜内皮样细胞并进行鉴定和筛选纯化。将纯化后扩增的角膜内皮样细胞接种于APCM构建角膜内皮植片,并移植入角膜内皮功能失代偿动物模型进行泵功能评估;采用人角膜缘干细胞（LSCs）来源的条件培养基培养hESCs 12 d,诱导其分化人角膜上皮样细胞并筛选鉴定,将其与APCM构建的角膜上皮植片移植于LSC失代偿动物模型的角膜缘,观察其眼表修复能力。结果诱导的人角膜内皮样细胞表达内皮细胞相关标记物vimentin、N-cadherin、Na+/K+ATP酶和ZO-1。构建的角膜内皮植片能够促使角膜内皮功能失代偿动物的角膜逐渐恢复透明。构建的角膜上皮细胞植片具有4～5层细胞复层结构,类似于正常角膜上皮,且能够一定程度上修复LSC失代偿动物模型眼表。结论采用hESCs诱导分化来源的细胞与APCM构建的人角膜内皮植片和人角膜上皮植片具有类似于正常角膜的功能,为全层生物角膜的构建提供了良好的实验和理论基础,具有良好的临床应用前景。