TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制

 目的:观察肿瘤坏死因子α（TNF-α）对肝X受体α（LXRα）启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白（ABCA1和ABCG1）表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组（control）、TNF-α组（20 μg/L）、高脂组（LDL,100 mg/L）及联合处理组（TNF-α 20 μg/L+ LDL 100 mg/L）。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和 ABCG1的mRNA及蛋白的表达。［3H ］标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论: TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。     

肝再生增强因子联合肝细胞脾内移植治疗急性肝衰的实验研究

目的:探讨应用rALR与新生大鼠肝细胞脾内移植联合治疗大鼠急性肝衰竭的疗效.方法:采用D-gal诱导大鼠急性肝衰竭模型,36h后随机分为6组:(Ⅰ组:造模对照组;Ⅱ组:脾脏注射生理盐水1ml,腹腔注射生理盐水1ml/d;Ⅲ组:脾脏注射rALR 1ml(50μg/(kg·d)),腹腔注射rALR 1ml(50μg/(kg·d));Ⅳ:脾脏移植2×107新生大鼠肝细胞,腹腔注射生理盐水1ml/d;Ⅴ组:脾脏移植2×107新生大鼠肝细胞,腹腔注射rALR 1ml;Ⅵ组:脾脏移植2×107新生大鼠肝细胞,腹腔注射CsA1ml(10mg/(kg·d)).比较各组生存率.术后第1、5天、14天获取肝组织,观察病理变化.术后第1、2、5、12天采血,检测肝功能指标.结果:Ⅱ组存活时间与Ⅰ组比较无差异.Ⅲ组最长存活时间为118h,肝脏病理及肝功能改变情况基本同Ⅰ组和Ⅱ组.Ⅳ组有部分长期存活,2周生存率为33.3%.Ⅴ组两周存活率显著高于Ⅳ组(75%对33.3%,P＜0.02),Ⅵ组和Ⅳ组2周存活率比较无显著性差异(P＞0.05).肝功能及病理情况在Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组有明显改善,尤以Ⅴ组最为显著.)结论:应用rALR联合新生大鼠肝细胞移植能有效治疗大鼠急性肝衰竭,改善D-gal诱导的肝衰竭大鼠的存活率,促进肝功能恢复及改善肝脏病理状况.     

乳腺癌术前短程化疗临床观察

乳腺癌术前化疗的作用受到广泛的关注,术前化疗可改变部分病人临床分期,简化手术并有利病人的预后。本组52例乳腺癌患者采用1周期短程化疗后手术,取得较好的效果,现报告如下:     

糖尿病大鼠脉络膜病变超微结构的研究

随着吲哚青绿血管造影(ICGA)和荧光素眼底血管造影(FFA)的开展，人们发现糖尿病视网膜病变(DR)发生的同时脉络膜也有相应的改变，认为糖尿病的视网膜脉络膜病变可能同时存在，Saracco等提出了糖尿病脉络膜病变(DC)的概念。我们通过建立糖尿病的动物模型，在不同病程通过透射电子显微镜从组织病理学角度进一步观察糖尿病大鼠发生脉络膜病变的超微结构改变，分析它与视网膜病变之间的关系。     

炎症干扰PPARγ-LXRα-ABCA1途径介导的肾小球系膜细胞胆固醇外流

目的:观察炎症能否干扰过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)-肝X受体α(LXRα)-三磷酸腺苷结合盒转运体A1(ABCA1)途径介导的人肾小球系膜细胞(HMCs)的胆固醇外流。方法:将HMCs分为4组:对照组、高脂组[细胞给予100 mg/L低密度脂蛋白(LDL)处理]、炎症组[细胞给予20μg/L肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理]、联合干预组(细胞给予20μg/L TNF-α+100 mg/L LDL处理)。采用实时定量PCR和W esternb lotting方法检测PPARγ、LXRα和ABCA1的mRNA及蛋白表达水平。用[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。用油红O染色法及化学酶促-比色法观察HMCs中脂质积聚情况。结果:与对照组相比,高脂组PPARγ、LXRα和ABCA1 mRNA及蛋白的表达明显增加,单纯的炎症刺激可下调它们的表达,而联合干预组中上述各基因和蛋白表达量比高脂组明显下降。胆固醇外流测定结果显示:与对照组相比,高脂组胆固醇外流量增加,而炎症组胆固醇外流量降低,联合干预组比高脂组胆固醇外流量明显减少。油红O染色提示联合干预组细胞内脂质积聚明显高于其余3组。细胞内胆固醇含量测定亦显示炎症能进一步加重胞内脂质积聚。结论:炎症因子可通过抑制PPARγ-LXRα-ABCA1表达导致HMCs胆固醇外流减少,加重细胞内脂质积聚。     

Orbscan系统与A超测量角膜厚度及前房深度比较

目的了解Orscan系统与A超测量角膜厚度及前房深度之差异.方法在我院行激光手术的例案中,随机抽取200人(400眼)对其在术前用Orbscan系统和A超所测的厚度及前房深度结果进行分组比较.结果 Orbscan系统测量角膜中央厚度为523.59±41.19 um,A超测量结果为548.55±34.45um,U检验P＜0.01,差别有极显著性.Orbscan系统测量中央前房深度为3.76±0.28 mm,A超测量结果为3.97±0.31 mm,U检验P＜0.01差别有极显著性.结论虽然两者之间测量结果存在一定差异,Orbscan系统在测量的精确性和稳定程度等方面还需进一步完善,但Orbscan系统给我们提供了检测眼前节的全新概念和详尽数据,能对临床和科研工作提供更大的帮助.     

乳腺癌手术采用锯齿形切口的报告

目的 检验乳腺癌手术锯齿形切口的优劣.方法 遵循肿瘤根治原则,应用转移皮瓣技术,将切口两端充足的皮肤向中间皮损区转移,解决手术中皮瓣缺损、缝合张力高的问题,观察新切口出现切口并发症的发生率.结果 比较乳腺癌术后皮瓣坏死及切口裂开率,乳腺癌锯齿形切口手术组(4/86,4.64%)与同期传统乳腺癌梭形切口对照组(42/349,12.03%)相比,具有显著性差异(P=0.046).结论 乳腺癌锯齿形切口手术通过转移皮瓣修复皮肤缺损,在减少缝合张力,避免植皮,切口美观等方面有明显优势.     

利用5''''-RACE技术进行人肝再生增强因子相互作用肽cDNA5''''末端快速扩增及序列分析

目的:利用5'-RACE技术进行人肝再生增强因子(hALR)相互作用肽cDNA5'末端快速扩增并进行序列分析.方法:按照5'-RACE试剂盒(Takara)操作流程进行hALR相互作用肽cDNA5'末端快速扩增,用BLAST技术对扩增序列进行生物信息学分析.结果:成功获取487bp的5'-RACE反应产物,其中5'端延伸了275bp,同源序列分析表明与人Citron激酶mRNA高度同源.结论:5'-RACE技术可以用于快速有效扩增已知部分cDNA序列的5'末端,Citron激酶可能是与hALR具有相互作用的蛋白.     

人参皂甙小分子的生物学作用

人参是中国传统医学的滋补药品。近年的研究表明,人参确实具有抗氧化作用,能够调节糖类、脂类代谢,调节机体免疫功能,具有抗癌功能和调节移植免疫作用。人参含有许多成分,如有机酸,维生素,糖,无机盐,植物固醇,寡聚肽,多聚糖,挥发油性成分以及人参皂甙。其中,人参皂甙（GS）是最主要的药性成分,也是目前人参有关研究所关注的小分子。