HPLC法测定蛤蚧定喘胶囊中苦杏仁苷的含量

蛤蚧定喘胶囊是三金集团桂林中药制药厂在传统产品蛤蚧定喘丸的基础上经过改革而研制的新制剂 ,主要是由蛤蚧、鳖甲、紫菀等中药组成。具有平喘、祛痰、止咳、抗炎、免疫、抑菌和抗过敏等作用。临床用于治疗肺肾两虚、痰热咳嗽气喘具有良好的疗效 [1]。苦杏仁苷是紫苑的主要有效成分之一 ,它的含量是评价蛤蚧定喘胶囊质量的一项重要指标。苦杏仁苷含量测定已有二阶导数光谱法、2 ,4-二硝基苯肼法、紫外吸收光谱法、薄层扫描法、化学发光淬灭法、气相色谱 ( GC)法、顶空 GC微量氰化物法等报道 [2～ 7] 。本实验建立了一个操作简便、快速 ,…     

包裹左旋多巴/苄丝肼PLGA微球通过Tau蛋白/△FosB信号通路治疗异动症大鼠的实验研究

目的 探讨可缓释包裹左旋多巴/苄丝肼微球对异动症大鼠的治疗作用及其机制.方法 通过注射6-羟基多巴胺(6-OHDA)制作帕金森病(Parkinson disease,PD)大鼠模型,制模成功的PD大鼠模型接受左旋多巴(25mg/kg)/苄丝肼(12.5mg/kg)腹腔注射21 d制作异动症大鼠模型.将异动症大鼠分成普通剂型组(n=13)和微球组(n=13)两组.普通剂型组给予普通剂型左旋多巴/苄丝肼皮下注射(按体质量左旋多巴12 mg/kg、苄丝肼15mg/kg),微球组给予等剂量包裹左旋多巴/苄丝肼微球皮下注射.分别于治疗第1、5、10、15和第20天,在大鼠腹腔注射阿扑吗啡后计数其旋转圈数,并于治疗3周后对大鼠进行异常不自主运动(AIM)评分(包括上肢、口面部和轴性3部分).另设PD组和假手术组大鼠各13只.以Western Blot检测大鼠纹状体区△FosB、Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白水平,免疫组织化学法测定大鼠纹状体区磷酸化Tau蛋白阳性细胞水平.结果 普通剂型组大鼠在治疗后的第1、5、10、15和20天阿扑吗啡诱导的旋转圈数分别为221±34.4、180±25.4、123±17.3、91±13.1、84±10.7,微球组大鼠的旋转圈数分别为223±35.1、172±26.8、131±18.7、97±14.9、82±10.5,两组各时点分别比较差异均无统计学意义(P＞0.05).微球组大鼠轴性AIM、上肢AIM、口面AIM评分分别为6.5±0.9、4.1±0.5、5.8±0.7,均低于普通剂型组大鼠(分别为10.3±1.9、6.3±0.9、8.2±1.2)(均P＜0.05).Western blot结果显示,普通剂型组大鼠纹状体△FosB水平[(620.7±48.3)％]高于PD组[(290.2±31.5％)](t=2.11,P＜0.05),但低于微球组[(320.5±32.8)％](t=4.56,P＜0.01).普通剂型组纹状体区磷酸化Tau蛋白水平[(340.4±27.1)％]高于PD组[(130.4±21.5)％](t=2.67,P＜0.05),微球组[(134.6±14.1)％]低于普通剂型组(t=4.13,P＜0.01).免疫组化结果示,普通剂型组大鼠纹状体区磷酸化Tau蛋白阳性细胞指数为(14.6±2.3)×104,高于PD组[(6.9±1.1)×104](t=3.98,P＜0.01),微球组[(7.2±1.1)×104]明显低于普通剂型组(t=3.76,P＜0.01).结论 微球治疗减轻了异动症大鼠的症状,其原因可能是由于可缓释包裹左旋多巴/苄丝肼微球通过影响Tau蛋白/△FosB信号通路的活性,进而改善了异动症大鼠的症状.     

胰岛素相转化水凝胶微针透皮贴片

本研究采用化学惰性、可吸收体液溶涨从玻璃态变为水凝胶态的聚合物材料制备了可用于胰岛素透皮给药的微针贴剂,相转化水凝胶微针贴膜。胰岛素是1型和晚期2型糖尿病的必用药。针尖穿透表皮后吸收体液溶涨,使预先担栽的胰岛素在真皮层高效而精确地释放出来,同时不留下针尖物质在皮层的沉积。上述性质使得相转化水凝胶微针贴膜成为需要一生频繁用药的蛋白、多酞药物的理想剂型。     

ERK通路参与可持续释放左旋多巴微球减少帕金森病运动并发症的实验研究

目的观察聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包裹的可释放左旋多巴/苄丝肼的微球对帕金森病(PD)大鼠运动症状及异动症发生的影响并探讨其机制。方法利用PLGA包裹左旋多巴或苄丝肼制成微球,采用高效液相法测定微球在大鼠体外释放左旋多巴/苄丝肼的浓度。6-羟基多巴胺(6-OHDA)腹腔注射制备PD大鼠模型,将造模成功的PD大鼠分为PD组、左旋多巴处理组和微球处理组,并设假手术组,各组12只。给予左旋多巴处理组大鼠皮下注射左旋多巴(12mg/kg)和苄丝肼(15mg/kg),给予微球处理组大鼠皮下注射含同等剂量左旋多巴和苄丝肼的微球。于治疗的第1、7、14天计数大鼠经阿扑吗啡诱导的旋转圈数。2周后行大鼠异常不自主评分(AIM)并利用Western blot检测大鼠纹状体区细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的磷酸化水平。结果体外释放试验结果显示微球内的左旋多巴/苄丝肼均匀缓慢释放,第7天时左旋多巴和苄丝肼释放量分别达到91.2%%和97.1%。治疗2周后,微球处理组大鼠和左旋多巴处理组大鼠阿扑吗啡诱导的旋转圈数均明显下降(均P<0.05),但在治疗的第1、7、14天两组比较无明显统计学差异。微球处理组大鼠于治疗后的第1、2、4、6、8、10、12、14天的AIM评分(轴性+上肢+口面)与左旋多巴处理组大鼠有统计学差异(均P<0.05)。Western blot结果显示左旋多巴处理组大鼠纹状体ERK1/2水平较PD组和假手术组明显升高(均P<0.05)。微球处理组大鼠纹状体ERK1/2磷酸化水平较左旋多巴处理组大鼠明显降低(P<0.01)。结论微球皮下注射可以改善PD大鼠的运动症状,同时可以减少PD大鼠异动症的发生,这可能与微球释放的左旋多巴持续性刺激PD大鼠从而减少ERK1/2的磷酸化水平有关。     

促红细胞生成素缓释微球玻璃体腔注射对视网膜神经节细胞的保护作用

目的 探讨乳酸/羟基乙酸共聚物（PLGA）装载的促红细胞生成素（EPO）缓释微球（EPO-PLGA微球）经玻璃体腔注射对大鼠视神经挫伤模型中受损视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用.方法 选取成年SD大鼠,建立视神经挫伤模型.建模后分别经玻璃体腔内注射含10 IU EPO的PLGA微球（EPO-PLGA组）、10 IU EPO（EPO组）、5 μl空白PLGA（PLGA组）、5 μl PBS（PBS组）,另设未治疗组不予玻璃体腔注药.术后5 d和2周,做视网膜切片,对各组RGC凋亡情况行TUNEL检测;术后23 d,DiI上丘逆标RGC,并于术后4周处死大鼠,视网膜铺片观察各组RGC存活情况;每组各个时间点分别处死6只SD大鼠.采用方差分析对结果进行比较.结果 TUNEL检测显示,术后5 d和2周,各组均可见TUNEL阳性细胞,其中EPO-PLGA组和EPO组TUNEL阳性细胞显著减少,其细胞凋亡率明显少于PLGA组、PBS组及未治疗组.术后4周,视网膜铺片RGC计数显示,正常SD大鼠RGC密度为（2387.7±164.9）个/mm^2,未治疗组为（748.3±58.8）个/mm^2,EPO-PLGA组为（1296.7±157.6）个/mm^2,EPO组为（1418.5±154.9）个/mm^2,PLGA组为（821.7±52.1）个/mm^2,PBS组为（804.4±86.4）个/mm^2;可见EPO-PLGA组和EPO组较未治疗组细胞密度显著增高,具有明显的RGC保护作用（P均＜0.01）,而EPO-PLGA组和EPO组间差异无统计学意义（P=0.065）.结论 EPO-PLGA缓释微球与EPO具有等效的RGC保护作用,这为进一步观察EPO-PLGA缓释微球的长效神经保护作用奠定了基础.     

舒血宁片中总黄酮的共振散射光谱分析

目的 建立舒血宁片中总黄酮共振散射光谱分析方法，探讨共振散射光增强的原因。方法 采用共振散射光谱法研究BSA—Mo(VI)-槲皮素(Qu)体系。结果 BSA—Mo(Ⅵ)-Qu体系在470nm和525nm产生共振散射峰，Qu浓度在0～2.4mg／L与470nm处的共振散射光强度成线性关系，检测限为0．3mg／L。结论 该方法简便灵敏，可用于舒血宁片中总黄酮的测定。[BSA—Mo(Ⅵ)-Qu]n缔合微粒和界面的形成是导致体系共振散射增强的根本原因。     

促红细胞生成素给药系统的研究进展

促红细胞生成素（EPO）是一种重要的糖蛋白造血因子，含有165个氨基酸，分子量为30000～34000，其中约40％为糖基化合物，能刺激红细胞增殖、分化及成熟。EPO目前主要用于治疗肾功能衰竭性贫血、癌症相关性贫血、人类获得性免疫缺陷综合征（HIV）相关性贫血、骨髓增生异常综合征（MDS）相关性贫血等，尤其在治疗肾功能衰竭性贫血中疗效显著。     

可控释左旋多巴和苄丝肼微球减少帕金森病大鼠异动症的发生

目的 观察聚乳酸-羟基乙酸共聚物( PLGA)包裹的可释放左旋多巴和苄丝肼的微球对帕金森病(PD)大鼠运动症状及异动症发生的影响并探讨其机制.方法 PLGA包裹左旋多巴及苄丝肼制作微球,高效液相法测定微球在体内释放出的左旋多巴和苄丝肼的浓度,6-羟基多巴胺(6-OHDA)注射制作PD大鼠模型,制模成功的PD大鼠随机分成PD组、左旋多巴组、微球组(每组12只),另设溶剂注射假手术组(n=12).左旋多巴组和微球组大鼠分别接受左旋多巴和苄丝肼(左旋多巴12 mg/kg,苄丝肼15 mg/kg)或等剂量微球皮下注射,在治疗的第1、4、7、10、14天行大鼠前肢功能测定,治疗2周后行大鼠异常不自主运动( AIM)评分,免疫组织化学及Western blot法检测纹状体区磷酸化的多巴胺和环磷腺苷调节的磷酸化蛋白-32(DARPP-32)(Thr34)和△FosB水平.结果 体内释放实验表明第7天时左旋多巴和苄丝肼释放量分别达76.2％和83.6％.微球处理组大鼠在治疗的第10天和第14天时前肢跨步数分别为5.8±1.6和5.2±1.5,比左旋多巴组(2.4±1.1、1.2±0.5)明显增加(t =4.12,5.43,均P＜0.01).微球处理组大鼠第14天AIM评分[(16.0±2.1)分]较左旋多巴处理组[(26.0±3.2)分]显著下降,差异有统计学意义(t =6.59,P＜0.01).免疫组织化学显示微球处理组大鼠纹状体磷酸化DARPP-32水平[(3.7±1.3)×104]较左旋多巴处理组[(7.9±2.2)×104]明显降低(t=2.95,P＜0.05).Western blot结果显示微球处理组大鼠磷酸化DARPP-32和△FosB水平分别为119.4％±11.3％和149.3％±12.3％,较左旋多巴组(184.8％±13.7％和300.4％±14.2％)显著下降(t =4.12、2.91,均P＜0.05).结论 微球皮下注射可以改善PD大鼠的运动症状,同时可以减少PD大鼠异动症的发生,这与微球释放的左旋多巴持续性刺激PD大鼠从而减少磷酸化DARPP-32和△FosB的水平有关.     

舒血宁片中总黄酮的共振散射光谱分析

目的 建立舒血宁片中总黄酮共振散射光谱分析方法，探讨共振散射光增强的原因。方法 采用共振散射光谱法研究BSA—Mo(VI)-槲皮素(Qu)体系。结果 BSA—Mo(Ⅵ)-Qu体系在470nm和525nm产生共振散射峰，Qu浓度在0～2.4mg／L与470nm处的共振散射光强度成线性关系，检测限为0．3mg／L。结论 该方法简便灵敏，可用于舒血宁片中总黄酮的测定。[BSA—Mo(Ⅵ)-Qu]n缔合微粒和界面的形成是导致体系共振散射增强的根本原因。     

丝氨酸/苏氨酸激酶通路参与促红细胞生成素保护帕金森病大鼠的实验研究

目的观察促红细胞生成素(EPO)对帕金森病(PD)模型大鼠的保护作用并探讨其机制。方法实验大鼠分为3组,1 PD组:6-羟基多巴(6-OHDA)定向注射至右侧前脑内侧束建立PD模型;2 EPO组:在模型制备前持续1周给予腹腔注射EPO 10 000 U·kg-1·d-1;3假手术组:大鼠脑内立体定向注射生理盐水。采用ELISA法检测大鼠脑脊液EPO含量变化,术后3周评估大鼠行为学改变,免疫组化学、免疫荧光及蛋白印迹法分别检测酪氨酸羟化酶(TH)、EPO受体(EPO-R)及丝氨酸/苏氨酸激酶(Akt)磷酸化(Ser473)的表达。结果 1 EPO组脑脊液内EPO含量[(416.59±9.34)μU·L-1]增加,与假手术组[(2.20±1.92)μU·L-1]比较,差异有统计学意义(P0.05);2 EPO组的行为学改善,黑质多巴胺能神经元的丢失减少,黑质EPO-R的表达增加,与PD组及假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05);3 EPO组黑质Akt磷酸化(Ser473)的表达明显增加,与PD组及假手术组比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论 EPO腹腔注射可以改善PD大鼠的运动症状,与EPO增加PD大鼠的磷酸化Akt(Ser473)表达可能有关。