敲减NLRC3表达对人正常支气管上皮BEAS-2B细胞生长的影响

目的:探讨敲减含胱天蛋白酶募集结构域的NOD样受体家族蛋白3(NLRC3)表达对人正常支气管上皮细胞株BEAS-2B活力和凋亡的影响及机制。方法:使用Lipofectamine 2000转染试剂将NLRC3基因的小干扰RNA(siRNA)片段转染至BEAS-2B细胞;RT-qPCR筛选干扰片段;MTT法检测细胞活力;JC-1检测细胞线粒体膜电位变化;annexin V-FITC/PI凋亡试剂盒检测细胞凋亡率;Western blot检测Bcl-2和Bax的表达水平。结果:NLRC3基因的干扰片段3(siNLRC3-3)干扰效果最佳(P<0. 01)。在BEAS-2B细胞中敲减NLRC3可显著增强细胞活力(P<0. 01)。敲减NLRC3表达可显著升高线粒体膜电位,使细胞凋亡率显著下降(P<0. 05)。敲减NLRC3表达使细胞中Bcl-2蛋白表达水平显著上调,而Bax蛋白表达水平显著下调(P<0. 01)。结论:敲减NLRC3基因可通过上调Bcl-2蛋白表达、下调Bax蛋白表达,增强BEAS-2B细胞活力并抑制其凋亡。     

YAP抑制剂对慢性粒细胞白血病K562细胞增殖、凋亡的影响

目的 研究YAP抑制剂维替泊芬对慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞增殖凋亡的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法计算YAP抑制剂维替泊芬对K562细胞增殖的影响;采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞术检测维替泊芬作用后细胞凋亡变化;Western印迹检测维替泊芬作用后K562细胞Bax、Bcl-2基因...     

LncRNA与非小细胞肺癌顺铂耐药的研究进展

<正>在全世界,肺癌是发病率最高的癌症,同时具有较高死亡率。非小细胞肺癌是肺癌的常见病理类型,由于暴露在油烟等环境下,中国女性非小细胞肺癌的发病率较国外高^[1-3],因起病的隐匿性,患者出现症状就医时已是晚期,含顺铂的化疗方案是常见晚期非小细胞肺癌的治疗手段,其耐药性的出现极大的影响了患者的预后。长链非编码RNA是一种长度大于200个核苷酸单位的不具备编码能力的RNA,许多研究发现其在恶性肿瘤的发生、发展^[4-6]甚至对逆转顺铂耐药发挥了一定的作用,本文就近些年来LncRNA与非小细胞肺癌的发生、发展及对顺铂耐药相关的研究做综述,期待可以为非小细胞肺癌的临床诊治及逆转顺铂耐药提供新的思路及突破口。1 Lnc RNA与非小细胞肺癌的发生发展研究发现LncRNA与非小细胞肺癌的发生发展相关,丁梦杰等^[7]的回顾性研究选取了90例NSCLC患者作为研究对象,     

低表达miR-21对苦参碱诱导的肝癌HepG2细胞凋亡的影响

目的:探讨miR-21低表达能否增强苦参碱(matrine,MAT)对肝癌细胞的促凋亡作用。方法:实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同浓度MAT作用HepG2细胞后miR-21的表达情况。流式细胞术检测miR-21低表达对MAT诱导的细胞凋亡的影响;RT-qPCR和Western blot检测miR-21低表达对MAT诱导的细胞凋亡中Bc1-2和Bax mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:miR-21表达量随MAT作用浓度的增加而增加;miR-21低表达可促进MAT诱导的细胞凋亡,并促进Bax mRNA和蛋白的表达(P0.05),而抑制Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P0.05)。结论:miR-21低表达可通过抑制Bcl-2和促进Bax的表达来增强MAT诱导的HepG2细胞凋亡。     

产肠毒素大肠杆菌定居因子Ⅰ基因克隆与表达

目的：在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌（Enterotoxigenio eseheriehia coli,ETEC）定居因子CFA／Ⅰ,检测重组表达的ETECCFA／Ⅰ。方法：以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA／1重组载体,表达产物用SDS—PAGE鉴定,免疫原性实验验证。结果：成功构建了pBV220-CFA/Ⅰ重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性。结论：CFA／Ⅰ基因的成功克隆为今后的ETECCFA／Ⅰ候选疫苗研制奠定了基础。     

木姜子乙醇提取物对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响及机制初探

目的：探讨木姜子乙醇提取物（Litsea pungens ethanol extract,LPEE）对肝癌细胞侵袭转移能力的影响及其相关机制。方法：MTT法测定LPEE对肝癌细胞株HepG2和QGY-7703的IC50;transwell迁移实验和matrigel侵袭实验检测LPEE对HepG2和QGY-7703细胞迁移和侵袭能力的影响;qRT-PCR和Western blot检测LPEE对各组细胞中E-cadherin和VEGF基因和蛋白水平的表达变化。结果：LPEE可显著抑制HepG2和QGY-7703细胞穿过transwell小室和matrigel基质胶的细胞数（P<0.05）;50和100 μg·mL^-1 LPEE作用组与0组相比,可明显降低VEGF mRNA和蛋白水平的表达（P<0.05）,而促进E-cadherin mRNA和蛋白水平的表达（P<0.05）。结论：LPEE可抑制肝癌细胞的侵袭和迁移能力,其机制可能与抑制VEGF表达和促进E-cadherin表达有关。     

脂肪间充质干细胞治疗脑瘫大鼠的作用机理研究

目的 探讨Notch信号通路在脂肪间充质干细胞治疗锥体束损伤所致脑瘫大鼠中的作用机理。方法 利用脑立体定位技术在大鼠锥体束注射乙醇构建脑瘫大鼠,通过尾静脉注射大鼠脂肪间充质干细胞,通过悬吊实验、旷场实验、姿势异常、肌张力、步态活动进行脑瘫行为学评估;取大鼠锥体束注射部位的脑组织做病理组织切片进行组织病理学分析,取锥体束注射部位脑组织进行荧光定量PCR检测Notch信号通路相关基因timp1、collagen1、hes1、hey1、jag1、notch1的表达。结果与模型组比,干细胞治疗组大鼠玻璃棒悬吊时间明显增长,差异显著;姿势异常、肌张力及步行姿态得到明显改善且差异显著;组织病理学分析证实脑瘫模型组大鼠脑组织纤维束增多,而脂肪间充质干细胞治疗组纤维束明显少;脂肪间充质干细胞治疗组神经细胞数量约为脑瘫模型组的2倍,大脑神经细胞再生非常明显,脑神经细胞形态及脑组织结构破坏较脑瘫组有所改善;与模型组比,干细胞治疗组jag1、timp1、collagen1和hes1基因表达水平显著降低,hey1基因表达水平明显升高。结论脂肪间充质干细胞能够通过调控Notch信号通路促进脑瘫大鼠脑神经修复,改...     

产肠毒素大肠杆菌定居因子I基因克隆与表达

目的:在大肠杆菌DH5α中表达产肠毒素大肠杆菌(Enterotoxigenio escherichia coli,ETEC)定居因子CFA/I,检测重组表达的ETEC CFA/I.方法:以质粒pBV220为基础,构建pBV220-CFA/I重组载体,表达产物用SDS-PAGE鉴定,免疫原性实验验证.结果:成功构建了pBV220-CFA/I重组载体,表达产物的分子量与天然蛋白相同,动物免疫试验表明重组菌具有免疫原性.结论:CFA/I基因的成功克隆为今后的ETEC CFA/I候选疫苗研制奠定了基础.     

炎性因子与类风湿性关节炎相关性的研究

目的：探讨炎性因子与类风湿性关节炎的关系。方法将我院2012年1月-2012年12月125例类风湿关节炎患者设为观察组;收集120例来我院就医的无自身免疫性疾病的志愿者作为对照组。测定两组静脉血IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α水平并行统计分析。结果观察组静脉血IL-1β和TNF-α水平高于对照组,差异有统计学意义;两组IL-2及IL-6水平无统计学差异。结论类风湿性关节炎患者静脉血中的IL-1β、TNF-α水平能对病情及疾病活动性的评估起到一定作用。     

NLRC3低表达对人肺正常上皮细胞BEAS-2b侵袭迁移的影响

目的 探讨NLRC3(NLR family CARD domain containing 3)低表达后对人肺正常上皮细胞株BEAS-2b侵袭和迁移的影响及其机制。方法 采用Lipofectamin 2000转染试剂将NLRC3基因的小干扰片段siNLRC3转染至BEAS-2b细胞;荧光定量PCR检测干扰片段siNLRC3的干扰效率;Transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验检测NLRC3低表达后BEAS-2b细胞迁移和侵袭能力的变化;Western Blot检测NLRC3低表达后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、钙粘蛋白E-cadherin表达的影响。结果 荧光定量PCR实验结果表明siNLRC3干扰效率为77%。Transwell迁移实验和Matrigel侵袭实验结果表明NLRC3低表达后BEAS-2b细胞迁移和侵袭能力增加（P<0.05）。Western blot结果显示NLRC3低表达后BEAS-2b细胞中MMP-2、MMP-9蛋白表达水平上调,E-cadherin蛋白表达水平明显下降（P<0.01）。结论 NLRC3基因低...