胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用

背景 甲状腺相关眼病(TAO)是一种自身免疫性疾病,目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上.胰岛素样生长因子-1(IGF-1)功能的发挥需要IGF-1受体(IGF-1R)的参与,IGF-1在促甲状腺激素受体(TSHR)的信号传导通路中也起着重要作用. 目的 探讨IGF-1对TAO患者眼眶成纤维细胞(OFs)增生及IGF-1R、TSHR表达的影响,探讨IGF-1在TAO发病机制中的作用. 方法 收集2016年3-6月于四川大学华西医院行TAO眼眶脂肪切除术取得的眶组织标本17例17份及正常人美容手术取得的眼眶组织4人4份,采用含体积分数5％胎牛血清的DMEM/F12培养液培养OFs.分别于培养液中加入不同质量浓度(0、50、100、125 μg/L)的IGF-1,采用MTS比色法绘制OFs生长曲线,评估IGF-1对TAO和正常来源OFs增生的影响;采用流式细胞术测定不同质量浓度IGF-1对TAO和正常来源OFs中IGF-1R、TSHR表达水平的影响.结果 TAO患者与正常人来源的OFs均生长良好,呈梭形,细胞质丰富,TAO患者与正常人来源的OFs形态学特点一致.培养的OFs波形蛋白呈阳性反应,结蛋白、S-100、肌红蛋白和角蛋白均呈阴性反应.不同质量浓度IGF-1作用后TAO组和正常组OFs增生均呈逐渐上升趋势,总体比较差异有统计学意义(F分组=219.639,P＜0.001;F质量浓度=17.752,P＜0.001),以100 μg/L IGF-1的促进作用最强.0、50、100、125 μg/L IGF-1作用后TAO组OFs中IGF-1R表达量分别为(0.009 1 ±0.008 7)％、(0.095 3±0.023 3)％、(0.083 7±0.0227)％和(0.070 9±0.024 1)％,正常组OFs中IGF-1R表达量分别为(0.002 3±0.000 6)％、(0.009 3±0.001 2)％、(0.0073±0.001 5)％和(0.008 3±0.001 2)％,其中50、100和125 μg/L IGF-1作用后各组OFs中IGF-1R表达量均高于无添加IGF-1者,TAO组OFs细胞中IGF-1R的表达量均明显高于正常组,差异均有统计学意义(均P＜0.05);0、50、100和125 μg/L IGF-1作用后TAO组和正常组OFs中TSHR表达量的总体比较差异均无统计学意义(F分组=0.133,P＞0.05;F质量浓度=0.004,P＞0.05). 结论 IGF-1对TAO患者和正常人OFs的生长均有促进作用并能上调OFs中IGF-1R的表达,但其对OFs中TSHR的表达变化无明显影响.