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目的探讨血管生成素-1(angiopoietin-1,Ang-1)对高浓度葡萄糖中培养的猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)的保护作用。方法RF/6A分3组培养:对照组(DMEM培养基含25mmol/L葡萄糖)、高糖组(DMEM培养基含40mmol/L葡萄糖)、Ang-高糖组(DMEM培养基含40mmol/L葡萄糖+0.25mg/LAng-1)。利用台盼兰染色法及MTT比色法检测体外培养的各种RF/6A存活率及细胞活力,利用western-blotting法检测各组suivivin表达。结果1d时各组细胞存活率及活力无差异。3、5、7d时高糖组和Ang-高糖组细胞存活率及细胞活力均较正常组下降(P〈0.05),高糖组细胞存活率及细胞活力低于Ang-高糖组(P〈0.05)。5d时,Ang-高糖组survivin表达明显较其他两组增多(P〈0.05)。结论高糖能降低RF/6A的存活率和活力,而Ang-1能明显增强高糖环境中RF/6A的存活率和活力,其机制可能与Ang-1上调凋亡抑制基因survivin的表达有关。 相似文献
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Ang-1对高糖环境中RF/6A单层的保护作用 总被引:1,自引:1,他引:0
目的探讨高浓度葡萄糖及血管生成素-1(Ang-1)对内皮细胞(EC)单层通透性的影响。方法将猴脉络膜-视网膜内皮细胞(RF/6A)接种于0.8μm聚碳酸酯微孔滤膜,形成致密单层后分3个组培养。正常对照组:含葡萄糖25mmol/L;高糖组:含葡萄糖40mmol/L;Ang-高糖组:含葡萄糖40mmol/L+Ang-1(250ng/mL)。于1、3、5、7d,4个时间点建立EC单层通透性模型,检测蛋白质渗透压反射系数(δ)及滤过系数(Kf),以监测EC单层通透性的变化;利用Westernblot(NBT/BCIP显色法)检测5d时survivin的表达。结果3、5、7d时,高糖组EC单层通透性增高(P〈0.01),Ang-高糖组在5d及7d时,EC单层通透性升高(P〈0.01),但仍低于高糖组;Westernblot结果显示,Ang-高糖组survivin表达明显高于其他各组(P〈0.01)。结论高糖能够增加EC单层通透性,Ang-1能对抗高糖的这种生物学作用。可能是通过上调凋亡抑制基因survivin的表达,抑制RF/6A的凋亡而发挥生物学作用的。 相似文献
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黄芩苷提取与纯化工艺的比较研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:优化黄芩苷提取分离工艺。方法:采用正交设计,利用高效液相色谱法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)检测生药粒度、不同提取纯化方法对黄芩苷纯度及得率的影响,优选提取纯化方案。以优选方案为实验组,常规煎煮法为对照组,进行平行实验。结果:20目生药粒度,微波提取6min,超滤柱过滤后酸沉为优选的提取方案,黄芩苷得率为5.77g%,纯度为89.98%。常规煎煮法黄芩苷得率为4.55g%,纯度为77.77%。平行实验结果表明,优选方案在黄芩苷纯度及得率上都要明显高于常规煎煮法(P〈0.05)。结论:微波提取、超滤柱过滤后酸沉的提取方法能够改善黄芩苷的提取率和纯度。 相似文献
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