近视眼视网膜神经纤维层厚度分析

目的:分析近视眼患者与正常人视网膜神经纤维层厚度的差异,探讨近视程度对视网膜神经纤维层厚度的影响。方法:采用视神经分析仪-GDxVCC(美国激光技术诊断公司生产)测量正常人23例42眼和近视眼患者85例166眼视网膜神经纤维层厚度,近视眼患者按等效球镜屈光度分为低、中、高、超高度近视四组,将所得结果用SPSS11.5统计软件包进行统计分析。结果:视乳头周围2.4～3.2mm的环形区域视网膜神经纤维层平均厚度正常人与低、中、高度及超高度近视组比较无显著性差异,不同程度近视眼组两两之间进行比较无显著性差异;上方120°区域视网膜神经纤维层厚度高度、超高度近视眼组与其他各组进行比较有非常显著性差异(P<0.01),高度与超高度近视组之间进行比较有显著性差异(P<0.01),其他各组两两之间进行比较无显著性差异;下方120°区域视网膜神经纤维层厚度各组之间进行比较无显著性差异;环形区域RNFL厚度平均值的标准差超高度近视组与其余各组之间的差异具有显著性(P<0.05);神经纤维指数高度近视组、超高度近视组与其他各组差异有显著性,且与屈光度呈线性关系(P<0.05)。结论:随着近视程度的增加,近视眼患者上方120!范围内视网膜神经纤维层厚度逐渐变薄,神经纤维指数逐渐增加。     

低氧诱导因子-1α干扰RNA对血管内皮生长因子mRNA表达的抑制作用

目的 探讨低氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor-1α．HIF-1α）特异性小片段干扰RNA表达载体pSUPER^H1-SiHIF1α对低氧诱导因子-1α和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor．VEGF）mRNA表达的抑制作用。方法 构建HIF-1α特异性小片段干扰RNA表达载体pSUPER^H1-SiHIF1α通过脂质体Lipofectamine2000分别介导pSUPER^H1-SiHIF1α转染低氧状态下培养的人低分化鼻咽鳞癌细胞（nasopharyngeal carcinoma cell line，CNE2），对照组转染pSUPER空载体．采用半定量RT—PCR方法检测HIF-1αmRNA和VEGF mRNA的表达。结果 转染DSUPER^H1-SiHIF1α的CNE2细胞中HIF-1α mRNA和VEGF mRNA的表达较对照组分别降低79．4％和65．7％。结论 HIF-1α特异性小片段干扰RNA表达载体pSUPER^H1-SiHIF1α能明显抑制HIF-1α mRNA和VEGF mRNA的表达。     

血管内皮生长因子干扰性RNA对鼠视网膜新生血管的抑制作用

视网膜新生血管性疾病是一组严重的致盲性眼病，目前尚无有效的药物疗法。传统的治疗方法主要是视网膜激光光凝、冷冻和玻璃体切除，然而这些治疗本身具有破坏视网膜正常结构和影响视功能的副作用，因而非常有必要从分子和基因水平寻找更有效的方法来阻止和预防视网膜新生血管的发生和发展。血管内皮生长因子(VEGF)小片段干扰性RNA(siRNA)在抗肿瘤新生血管临床研究中已经取得了显著疗效，能有效抑制肿瘤的生长及转移。我们通过高氧诱导C57BL/6J小鼠视网膜新生血管模型，探讨VEGF165 siRNA在抑制视网膜新生血管方面的作用。     

视网膜Müller细胞谷氨酸转运体GLAST的表达

目的:探讨人、鼠视网膜Muller细胞体外培养的方法,并研究视网膜Muller细胞谷氨酸转运体GLAST(L-谷氨酸/L-门冬氨酸转运体)的表达与分布。方法:采用视网膜组织块的方法培养引产胎儿及产后3 d(P3)乳鼠视网膜Muller细胞,振荡法分离纯化细胞,观察细胞形态和生长特性,并对Muller细胞进行免疫细胞化学荧光染色。结果:采用组织块培养的Muller细胞,约需15~20 d细胞基本融合,振荡法分离的细胞纯度高。培养的细胞神经胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)、波形蛋白(Vimentin)及其谷氨酸转运体GLAST抗体染色阳性,GLAST主要分布在Muller细胞膜及突起上。结论:用组织培养的方法可成功培养出人、鼠视网膜Muller细胞,Muller细胞膜上有广泛的谷氨酸转运体GLAST的表达及分布。     

血管内皮生长因子干扰RNA对鼠视网膜中血管内皮生长因子mRNA表达的抑制作用

目的 研究血管内皮生长因子（vascular endothelial cell growth factor,VEGF）小片段干扰RNA（small interference RNA,siRNA）对鼠视网膜VEGF mRNA的抑制作用,探讨其对视网膜新生血管治疗的可行性.方法 体外培养人鼻咽癌细胞（CNE-2Z）,分成正常氧培养组（20% O2）和低氧培养组（1% O2）.采用脂质体（LF 2000）将VEGF siRNA转染两组细胞,RT-PCR检测VEGF mRNA的表达,确立VEGF siRNA对VEGFmRNA的抑制效率.然后,建立高浓度氧（75%）诱导的C57BL./6J小鼠视网膜新生血管动物模型,以脂质体为载体,将VEGF siRNA重组质粒注射到鼠玻璃体腔内,RT-PCR检测视网膜组织中VEGF mRNA的表达水平.结果 正常氧培养的CNE-2Z细胞有VEGF mRNA表达,低氧状态下VEGFmRNA表达增多,两者之间差异有显著性（P＜0.01）;与未转染组和转染空载体组相比,在正常氧和低氧状态下,VEGFsiRNA均能明显抑制VEGFmRNA的表达（P＜0.01）;正常氧状态下VEGF siRNA的抑制效率比低氧状态高.高浓度氧诱导的C57BL/6J小鼠视网膜新生血管动物模型中,玻璃体腔注射VEGF siRNA组视网膜组织中VEGF mRNA表达明显下降（P＜0.01）.结论 VEGF特异的siRNA能有效地抑制人鼻咽癌细胞CNE-2Z和C57BL/6J 小鼠视网膜新生血管动物模型视网膜中VEGF mRNA的表达.     

青光眼视网膜神经纤维损害激光偏振光扫描测量的价值

目的:探讨青光眼的视网膜神经纤维层缺损特征,评价激光偏振光扫描测量仪(GDxVCC)在青光眼早期诊断方面的应用价值。方法:采用激光偏振光扫描测量仪(GDxVCC,美国)对60例110眼正常人及46例85眼青光眼患者视网膜后极部水平方向40°、垂直方向20°范围进行激光偏振光扫描测量视网膜神经纤维层厚度(RNFL),同时进行中央30°视网膜光阈值检查(Humphrey视野分析仪,Central30-2thresholdtest,美国),并对结果进行统计分析。结果:正常眼RNFL厚度与性别、眼别无关,而与年龄呈负相关;各期青光眼患者的RNFL均值显著低于正常对照组(年龄匹配,P<0.01);早期、进展期、晚期青光眼患者的RNFL厚度均值比较也有显著性差异(P<0.001)。GDxVCC检测RNFL厚度值与Humphrey视野检查指数平均缺损值(MD)具显著正相关性(r=0.795,P<0.001)。青光眼的视网膜神经纤维层图像可表现为局限性变薄或缺损(85.2%)、弥漫性变薄(6.6%)、弥漫性变薄并局限性缺损(8.2%),以鼻上方的局限性变薄或缺损最常见(56.7%)。有23.3%的早期青光眼患者视野检测正常而GDxVCC检测发现有不同程度的视网膜神经纤维层缺损。结论:GDxVCC能准确定量检测RNFL厚度值,视网膜神经纤维层的检测能比视野检测更早地发现青光眼的视神经的损害,因而可作为青光眼患者早期诊断的重要指标之一。随着青光眼患者病情的发展,RNFL厚度逐渐变薄,视野的平均缺损值逐渐增加。GDxVCC联合视野检查对于追踪青光眼患者的病情变化,确立靶眼压的水平,制定个性化的治疗方案有着重要的价值。