并轨住院医师规范化培训的眼科专业学位硕士研究生科研能力现状与思考

目的：了解医学专业学位硕士(专硕)研究生培养并轨住院医师规范化培训制度下的眼科专硕科研能力现状，并提出提升科研能力的对策。方法：对哈尔滨医科大学三所附属医院眼科学76名不同年级专硕研究生的科研能力现状、阻碍科研学习的因素、科研训练意愿等进行问卷调查。结果：在目前的培养模式下，专硕科研和临床知识基础相对薄弱及临床学习任务繁重是科研学习的主要障碍。结论：提出教学基地可以因需施教、提供多模式科研训练；强化临床诊疗培训为科研思维培养助力；导师可以结合新时代发展背景优化科研选题策略、拓宽学生科研视野等措施。     

大剂量布地奈德混悬液雾化吸入治疗哮喘急性发作的临床效果及对患儿IL-1β、IL-6水平与NLRP3 mRNA的影响

目的 探讨大剂量布地奈德混悬液雾化吸入治疗哮喘急性发作的临床效果,以为该病治疗方式的选择提供参考.方法 选取2020年4月至2021年4月我院收治的146例哮喘急性发作患儿作为研究对象,采取抽签法将其分为参照组(73例,常规治疗+小剂量布地奈德混悬液雾化吸入+孟鲁司特钠)和试验组(73例,常规治疗+大剂量布地奈德混悬液雾化吸入+孟鲁司特钠).比较两组的临床疗效及治疗前、后的白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)水平与Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)mRNA.结果 试验组的治疗总有效率为97.26％,高于参照组的87.67％,差异具有统计学意义(P<0.05).治疗前,两组的IL-1β、IL-6水平及NLRP3 mRNA比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组的IL-1β、IL-6水平及NLRP3 mRNA均较治疗前降低,且试验组低于参照组,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 大剂量布地奈德混悬液雾化吸入可提升哮喘急性发作患儿的临床疗效,降低IL-1β、IL-6水平及NLRP3 mRNA,具有一定的临床应用和推广价值.     

兔眼小梁切除术后结缔组织生长因子的表达

目的 研究结缔组织生长因子(CTGF)在兔眼小梁切除术后滤过泡中的表达及意义.方法 对照实验研究.将49只健康家兔分为5组:正常眼未手术组(A组),高眼压未手术组(B组),高眼压模型小梁切除术组(C组),正常眼小梁切除术组(D组),正常眼假手术组(E组),并分别在术后第2、5、7、14及21天,取右眼滤过泡部位的球结膜和浅层巩膜组织,A组和B组作为对照组.采用RT-PCR法检测CTGF mRNA的相对表达量,应用免疫组织化学方法 检测CTGF蛋白表达水平,HE染色行组织病理学检查.采用SAS 9.1.3统计学软件,对逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组织化学检测结果 采用析因设计定量资料方差分析.结果 C、D、E组术后CTGF表达水平高于A组和B组,术后第5天CTGF表达水平达到高峰,与其他时间点的表达差异有统计学意义(F=19.54,P<0.05);术后第2和5天,CTGF mRNA表达水平,C组高于同期D组(t=2.300,5.140;P<0.05);术后第2、5、7、14天,D组高于同期E组(t=-2.927,-6.424,-4.176,-4.997,P<0.05).CTGF蛋白表达水平,术后第2、5、7、14天,C组高于同期D组(t=-7.147,-10.955,-9.900,-6.385,P<0.05);术后第2、5、7、14天,D组高于同期E组(F=68.33,P<0.05).组织病理学检查结果 显示,术后第5天,C、D、E组局部炎性反应达高峰,表现为中性粒细胞、单核细胞及巨噬细胞浸润,成纤维细胞增殖达高峰.结论 小梁切除术后家兔CTGF表达水平的变化趋势表明,CTGF在伤口愈合及瘢痕形成过程中可能起重要作用,高眼压状态可促进CTGF表达水平上调.(手华眼科杂志,2009,45:168-174)     

压力对视网膜神经节细胞存活及突起生长影响的研究

目的　建立体外加压培养SD乳鼠视网膜神经节细胞 (RGCs)模型 ,并观察压力对RGCs存活及突起生长状况的影响。方法　取生后 0～ 3天SD乳鼠的视网膜组织 ,用酶化学方法制备成细胞悬液并接种于培养瓶中。用自行设计的体外加压模型 ,使瓶内压力分别达到 2 0mmHg、4 0mmHg、6 0mmHg和 80mmHg,同时设对照组 (压力为 0 )。分别于培养后 2 4h、4 8h和 72h在倒置显微镜下观察RGCs的存活及生长状况 ,并应用Thy 1 .1单克隆抗体对RGCs进行免疫细胞化学鉴定。结果　压力为 2 0mmHg及 4 0mmHg实验组中RGCs生长状况与对照组相似 ,RGCs存活数量及突起生长率无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ;压力为 6 0mmHg及 80mmHg实验组中RGCs存活数量及突起生长率与对照组存在显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论　RGCs可以在体外存活并生长 ,一定的压力 (≥ 6 0mmHg)可以影响RGCs的存活数量及突起生长率。     

两种方法建立大鼠慢性青光眼模型的对比研究

目的评价2种大鼠慢性青光眼模型的效果。方法通过单纯烙闭3条大鼠巩膜上静脉（单纯手术组,n=19）和烙闭巩膜上静脉同时给予5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-Fu）（手术给药组,n=23）2种方法制作大鼠慢性高眼压模型,观察术前和术后1d、3d、5d、1周、2周、1个月和2个月早晚眼压变化,并于术后1周、2周、1个月和2个月摘除眼球,光镜观察大鼠视网膜各层组织厚度变化,荧光金逆行标记视网膜神经节细胞（retinal ganglion cells,RGCs）并计数,TUNEL染色,比较2组模型检测指标。结果2组模型大鼠术后眼压均明显升高,随着高眼压时间持续延长,RGCs逐渐减少及视网膜神经纤维层逐渐变薄,剩余RGCs数量逐渐减少,但2组间差异无统计学意义（P〉0.05）。结论持续高眼压导致大鼠RGCs的病理改变过程及其结果符合青光眼视神经损伤的病理特点。单纯烙闭大鼠巩膜上静脉即可获得稳定有效的慢性青光眼模型。     

大鼠BDNF基因克隆和重组逆转录病毒pLXSN-BDNF的构建

目的克隆大鼠脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factors,BDNF)基因并构建含BDNF基因片段的真核表达载体pLXSN-BDNF,用于视神经损伤修复的基因治疗。方法利用RT-PCR的方法从大鼠海马组织的总RNA中扩增BDNF基因片段,序列两端分别引入限制性内切酶识别位点EcoR I和Xho I,并将其定向克隆入pMD18-T Si mple载体,测序正确后亚克隆入逆转录病毒载体pLXSN。结果经过PCR、酶切和测序鉴定,所克隆的BDNF基因序列正确,克隆的BDNF基因已经正确插入到逆转录病毒载体pLXSN中。结论成功克隆了BDNF基因并且构建了真核表达载体pLXSN-BDNF,为进一步研究基因治疗视神经损伤疾病奠定基础。     

慢性高眼压状态下大鼠视网膜内神经营养因子表达的变化

目的检测高眼压状态下大鼠视网膜神经营养因子的表达变化。方法通过烙闭大鼠巩膜上静脉制作慢性高眼压模型,并对模型进行评估。应用免疫组化技术和RT-PCR检测正常大鼠和高眼压下大鼠视网膜上神经营养因子及其受体的表达水平。结果大鼠造模后1d、3d、5d、1周、2周、1个月和2个月的早晨800眼压分别为(14.387±3.527)mmHg(1kPa=7.5mmHg)、(13.833±3.473)mmHg、(13.833±3.473)mmHg、(13.388±3.473)mmHg、(14.350±2.727)mmHg、(15.310±3.495)mmHg、(15.053±3.467)mmHg,升高幅度达到基础眼压的50%以上。高眼压状态下,神经生长因子出现微弱表达,其mRNA水平及受体TrkA表达水平低下;脑源性神经营养因子在造模后2周出现较强阳性表达,并持续到造模后2个月,其mRNA水平短期增高,受体TrkB的mRNA水平降低;神经营养素-3在内核层出现阳性表达增强,mRNA水平逐渐降低,神经营养素-3受体TrkC表达水平随时间延长表达强度逐渐增加,mRNA水平一过性增高;神经营养素-4蛋白和mRNA水平在造模后都出现一过性表达增强;p75的mRNA水平低于正常大鼠。结论神经营养因子及其受体的蛋白和mRNA水平随着高眼压时间变化而相应改变,蛋白与mRNA变化趋势一致,但是神经营养因子及其受体变化的水平趋势不完全一致。     

大鼠视神经损伤的病理学和组织化学研究

目的:拟通过对于视神经损伤后轴突的病理变化和GFAP及星形胶质细胞分泌的ECM阻抑性大分子CSPG的表达分布情况,观察视神经损伤后的修复反应,为进一步研究中枢神经纤维的再生提供实验资料。方法:首先建立大鼠视神经不完全损伤的挤压伤模型,于损伤后不同时间段取材进行HE染色和GFAP及CSPG的免疫组织化学研究。结果:HE染色示大鼠视神经损伤后3～7d小胶质细胞增殖吞噬功能活跃,伤后14d,损伤处可见多处新生血管。免疫组织化学结果示大鼠视神经损伤后7d,GFAP在损伤区缺乏表达,而CSPG在损伤区中心呈强阳性表达。结论:CNS轴突再生失败可能与损伤局部瘢痕形成的机械性阻碍和CSPG沉积的化学性阻碍有关。     

住院医师规范化培训学员的心理压力分析及心理干预

目的探究黑龙江省哈尔滨市住院医师规范化培训学员心理压力及影响因素,以便针对性提供心理干预。方法采用一般情况问卷、心理压力因素问卷、一般自我效能感量表,对哈尔滨医科大学附属第二医院规范化培训住院医师展开调查,分别测评住培医师的一般情况、心理压力情况、自我效能感水平。结果共发放270份问卷,收回有效问卷252份,有效率93.3%,心理问题检出率24.2%。多元逐步回归分析显示,学员心理问题与身份类型、周工作时间、成就感因素相关。结论住院医师规培学员心理问题突出,主要原因在于其正处于临床医师转型发展阶段,对此应积极采取相关措施改善学员心理现状。     

精准教学在全科医学住院医师眼科教学中的应用

2014年开始,为提高"5+3"全科医师的专业能力,我院眼科将精准医学中准确定位,个性化、靶向化的理念引入教学工作中,建立精准教学理念,并将该教学理念贯彻到全科医师的培训中。设立提高全科医师的岗位胜任力的教学终极目标,设计针对性强,实用性强,适用性高的教学培训计划,制定个性化教学方案,通过多种教学方法(案例法,PBL法)从多角度多层次提高全科医师的临床技能和服务能力,增强医患沟通意识,培养科研基本素养,为全科医师的培养拓展新的教学思路。