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目的构建携带跨膜信号序列的凋亡蛋白(apoptin)的原核表达载体PET-28a(+)-apoptin,诱导表达并纯化重组apoptin蛋白,制备多克隆抗体。方法用多重PCR的方法扩增跨膜信号序列(PTD)及apoptin的编码序列,构建原核表达载体PET-28a(+)-PTD-apoptin,转化大肠杆菌BL21(DE3),低温条件下IPTG诱导目的基因表达,SDS-PAGE方法鉴定蛋白表达,经镍亲和层析方法纯化目的蛋白后,免疫BALB/c小鼠,制备多克隆抗体。结果DNA测序鉴定表明成功构建了原核表达载体PET-28a(+)-PTD-apoptin,该重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),经低温和IPTG诱导后,获得重组apoptin蛋白,制备的多克隆抗体经ELISA方法和免疫印迹法证实能特异性地识别apoptin。结论成功获得了携带跨膜信号序列的重组蛋白apoptin及其多克隆抗体,为进一步研究其特异性诱导肿瘤细胞凋亡功能及相关机制奠定了基础。 相似文献
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目的 了解惠州市国家级死因监测点死因监测的漏报情况,为今后监测工作提出建议.方法 两个监测县(区)各随机抽取3个乡镇(街道),每个抽中的乡镇(街道)随机抽取3个行政村(居委会),抽中村(居委会)的所有家庭均为被调查家庭,调查对象包括调查家庭的所有成员.本次调查覆盖人口为2013年1月1日-2014年12月31日期间的监测县(区)(共6个镇街18个村/居委)户藉人口死亡情况,与人口死亡信息登记管理系统网络报告数进行比较.结果 两个监测县(区)(共6个镇街18个村/居委)户藉死亡人数共1 847人,漏报人数为170人,漏报率为9.20%.漏报率在城乡之间、不同性别和不同原因(疾病和伤害)之间差异无统计学意义(P>0.05).但不同死亡地点之间的差异有统计学意义(P<0.05),未发现18岁以下的未成年人有死亡漏报的情况.结论惠州市国家级死因监测点死因监测的总体漏报率较低,但仍应通过加强与有关部门的合作,进一步健全死亡病例的报告工作制度,减少在家中死亡人员的漏报,提高死因监测工作质量. 相似文献
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生物化学是医学院校的一门重要的专业基础课程,针对中西医临床医学专业学生中文科生较多、生物学与化学基础知识比较薄弱的特点,就授课内容的选择、教学方法和手段的灵活应用、优化课堂教学效果等方面进行了探讨。建议基于学生化学、生物基础知识储备不足,可在大一第1学期开设有机化学、医学生物学选修课,从而缓解学生在生化学习过程中的难度。 相似文献
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目的观察当归多糖对AD模型小鼠学习记忆功能,测定脑组织中NO含量、p16蛋白含量、NOS及AchE活性,探讨当归多糖治疗衰老的作用机制。方法 KM小鼠72只,采用Y型迷宫实验测定小鼠的学习记忆能力,应用生化法测定脑组织NO含量、NOS及AchE活性,ELISA法测定p16蛋白含量。结果当归多糖各剂量组小鼠学习记忆能力明显得到改善,脑组织中NO浓度、NOS活性、AchE活性和p16蛋白含量与对照组比较显著降低。结论当归多糖具有延缓衰老的作用,可能机制是通过抗氧化作用和调控细胞周期实现的。 相似文献
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