视网膜小胶质细胞在年龄相关性黄斑变性中的作用研究进展

年龄相关性黄斑变性(AMD)是60岁以上人群致盲的主要原因,属于神经退行性病变。目前已证实慢性炎症与老年化是AMD发病的主要因素,可增加AMD的发病风险,促使病情进展。视网膜小胶质细胞(RMG)是视网膜免疫系统的主要细胞,具有"双刃剑"作用,可影响视网膜病变的发展和转归,近年来已成为眼科领域的重点研究方向。本文就RMG在AMD中的异常免疫调节等作用进行综述。     

miR-22-3p对蓝光暴露下大鼠视网膜神经节细胞的保护作用及其机制

目的　探讨miR-22-3p对蓝光暴露下的大鼠视网膜神经节细胞（RGC）的保护作用及机制。方法　取36只清洁级SD大鼠, 将12只SD大鼠随机分为2组:对照组与蓝光暴露组,每组6只。对照组采用正常的12 h明暗循环饲养;蓝光暴露组大鼠先进行暗适应24 h,随后采用复方托吡卡胺散瞳,将大鼠暴露在蓝光（光照强度1500 lux）下2 h;另取24只大鼠随机分为4组:对照组、蓝光暴露组、AAV-miR22组、AAV-miR22&PTEN组,每组6只。对照组采用正常的12 h明暗循环饲养,其余3组均接受蓝光暴露处理,AAV-miR22组注射1 μL含 2.5×10⁹ vg(基因组拷贝数)的AAV-7m8-miR-22-3p,AAV-miR22&PTEN组注射1 μL含2.5×10⁹ vg的AAV-7m8-miR-22-3p&PTEN,对照组与蓝光暴露组向大鼠玻璃体内注射1 μL生理盐水,注射结束使用氧氟沙星眼膏预防感染。取大鼠眼球组织行HE染色,在光学显微镜下观察检测神经节细胞层（GCL）、GCL至外核层 (ONL)的厚度,其中包含有内丛状层（IPL）、内核层(INL)、外丛状层（OPL）;采用NeuN免疫荧光组织化学染色标记RGC,计数视网膜上NeuN标记的阳性细胞数;TUNEL染色检测细胞凋亡;采用Lipofectamine 2000转染试剂盒转染阴性对照、miR-22-3p mimic、miR-22-3p inhibitor至RGC-5细胞,转染48 h后测定miR-22-3p表达量,转染成功即可采用Western blot检测PTEN蛋白表达情况;采用实时荧光定量PCR检测miR-22-3p表达,Western blot检测PTEN、p-Akt、Akt与Nrf2蛋白表达情况;双荧光素酶报告实验在酶标仪上测定荧光素酶活性。结果　HE染色结果证实:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织萎缩,视网膜GCL、GCL至ONL厚度变薄（P<0.05）。另外,NeuN免疫荧光组织化学染色发现:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织RGC数减少（P<0.05）。实时荧光定量PCR实验结果显示:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织内miR-22-3p相对表达量降低（P<0.05）。Western blot检测结果显示:与对照组相比,蓝光暴露组大鼠视网膜组织内PTEN蛋白的表达水平升高,Nrf2蛋白的表达水平和p-Akt/Akt蛋白表达比值均降低（均为P<0.05）;miR-22-3p能够负向调控PTEN蛋白在RGC内的表达水平（P<0.05）。HE染色结果显示:过表达miR-22-3p能够缓解蓝光诱导的大鼠视网膜萎缩,并且能够提高大鼠视网膜GCL、GCL至ONL厚度。NeuN免疫荧光组织化学染色结果证实:过表达miR-22-3p能够通过靶向抑制PTEN表达提高蓝光暴露大鼠视网膜上RGC数。TUNEL实验结果证实:miR-22-3p能够通过抑制PTEN表达缓解蓝光诱导的大鼠视网膜RGC凋亡。结论　miR-22-3p能够通过靶向抑制PTEN的表达,激活PI3K/Akt/Nrf2通路,缓解蓝光诱导的大鼠RGC凋亡。     

间充质干细胞通过调节趋化因子及血管内皮生长因子异常表达减轻大鼠碱烧伤角膜的机制研究

目的分析趋化因子及血管内皮生长因子异常表达与大鼠碱烧伤角膜的关系及间充质干细胞的调节作用,为相关治疗提供参考。方法 50只大鼠(100眼)随机分为5组:对照组、碱烧伤角膜模型组、间充质干细胞小剂量组、间充质干细胞中剂量和间充质干细胞高剂量组(n=20)。除对照组大鼠给予等量的生理盐水处理外,其余各组大鼠采用1 mol/L的Na OH溶液复制大鼠碱烧伤角膜模型,间充质干细胞治疗组采用对应剂量(0.25×10~6,0.5×10~6,1.5×10~6)进行治疗,对照组大鼠给予等量的生理盐水。Western Blotting法分析各组大鼠角膜组织中趋化因子CC趋化因子配体(CCL)2、CCL3、CCL8、CCL14、趋化因子基质细胞衍生因子-1受体4(CXCR4)、基质细胞衍生因子1(SDF1)、VEGF、VEGFR及白细胞介素的表达变化。结果碱烧伤大鼠角膜CCL2、CCL3、CCL8、CCL14、IL-1β、IL-2及IL-6、VEGF及VEGFR表达明显增强,而SDF1和CXCR4表达明显减弱,且与对照组相比差异有显著性(P0.05);经间充质干细胞治疗后上述蛋白的异常表达得到部分恢复(P0.05),且呈剂量依赖性。结论间充质干细胞能够通过调控趋化因子及血管内皮生长因子表达发挥改善大鼠碱烧伤角膜的作用,且作用具有剂量依赖性效果。     

间充质干细胞联合环孢霉素A对大鼠角膜移植排斥的效果分析及炎症反应因子的参与作用研究

目的探讨间充质干细胞联合环孢霉素A对角膜移植排斥的效果及炎症反应因子的参与作用。方法采用远交系Wistar雌性大鼠和SD雌性大鼠建立穿透性角膜移植排斥模型。随机分为空白对照组(尾静脉及肌肉分别注射不含药物的PBS,0.1 ml/kg和1 ml/kg),角膜移植排斥组(尾静脉及肌肉分别注射不含药物的PBS,0.1 ml/kg和1ml/kg)、治疗高剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 10 mg/(kg·d)]、中剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 5 mg/(kg·d)]、低剂量组[尾静脉注射MSCs(5×106)+肌注Cs A 2 mg/(kg·d)],每组8只。观察各组大鼠治疗后的角膜植片存活情况,并检测血清中相关的炎症反应蛋白水平。结果与空白对照组比较,角膜移植排斥组大鼠的角膜植片存活时间明显缩短(P0.01),而治疗组大鼠的存活时间明显延长,且存在剂量依赖性(P0.05,P0.01);角膜移植排斥组大鼠炎症反应因子白介素细胞(IL)-2、IL-6、IL-10、纤维介素蛋白2和单核细胞趋化蛋白1、转化生长因子(TGF-β)、Smad1及Smad3、内质网跨膜蛋白肌醇酶1(IRE1)及其下游转录因子(XBP1)水平明显高于对照组(P0.01),而治疗组大鼠的上述炎症因子水平明显降低,且存在剂量依赖性(P0.05,P0.01)。结论间充质干细胞联合环孢霉素A对角膜移植排斥有良好的治疗效果,且其作用可能与调控体内炎症反应因子水平异常有关。     

基于微信平台的管理模式对视网膜脱离术后患者心理情绪、并发症及生活质量的影响

  目的  通过前瞻性、随机、单中心研究探讨基于微信平台的管理模式对视网膜脱离术后患者焦虑抑郁情绪、并发症及生活质量的影响。  方法  选取2018年9月—2019年11月南部战区总医院眼科就诊并手术治疗的92例视网膜脱离(RD)患者作为研究对象,采用随机数字表法将患者分为对照组和微信组,各46例,对照组实施常规护理,微信组在对照组的基础上增加基于微信平台的管理模式,采用焦虑自评量表(SAS)和抑郁自评量表(SDS)对患者干预前后心理情绪进行评估,采用生命质量核心量表(QLQ-C30V3.0)评估患者生活质量,并比较2组患者术后并发症发生情况及护理满意度。  结果  护理后,微信组患者SAS、SDS量表评分均低于对照组(P＜0.05)。微信组颈背部肌肉酸痛、头痛头晕、失眠并发症发生率低于对照组(2.17% vs. 19.57%、2.17% vs. 13.04%、2.17% vs. 15.22%,χ2=7.180、3.866, 4.929, 均P＜0.05)]。护理后,微信组患者生活质量各维度均高于对照组(均P＜0.05)。微信组满意度为95.65%(44/46),高于对照组的80.43%(37/46),差异有统计学意义(χ2=5.059,P=0.024)。  结论  基于微信平台的管理模式有助于缓解视网膜脱离患者术后的焦虑抑郁情绪,促进患者生活质量及满意度的提高。      

外周血Tfh细胞比例及其胞内IL-21含量与蓝光视网膜损伤的相关性

目的 探讨外周血滤泡辅助性T细胞（Tfh细胞）比例及其胞内白介素-21(IL-21)含量与蓝光视网膜损伤的相关性。方法 随机将Brown Norway(BN)大鼠均分为4组，采用蓝光全身每天照射3小时建立大鼠视网膜光损伤模型。按照射时间分为光照0天组即对照组（0 d组）、3天组（3 d组）、7天组（7 d组）和14天组（14 d组）。光照后采用流式细胞术和ELISA法分别检测大鼠外周血中Tfh细胞的比例及其胞内白介素21(IL-21)含量；视网膜电流图（ERG）检查评价视网膜功能；眼底照相和HE染色分别检查眼底改变和视网膜外核层厚度变化。结果 与对照组相比，视网膜蓝光损伤后外周血Tfh细胞比例和胞内IL-21含量均随光照时间延长显著增加（均P <0.05）;ERG显示随光照时间延长视网膜功能损害加重，a、b波潜伏期和振幅分别随光照时间延长而延长和降低（均P <0.01）；大鼠眼底在光照3 d出现色素脱失样改变，随光照时间延长出现视网膜血管变细及渗出样改变；HE染色显示随光照时间延长ONL厚度显著变薄（均P <0.05）。相关性分析提示外周血Tfh细胞比例及其胞内IL-...     

弓形虫眼病1例

南部战区总医院于2022年5月25日收治1例37岁女性“弓形虫眼病”患者，患者自述左眼视物上方遮挡伴轻微视物变形5 d,不否认接触猫类动物接触史。入院后查体，左眼前房房水细胞(++),前段玻璃体炎性细胞(+++);眼底：黄斑水肿，颞下方血管见增殖膜；实验室血清学及外送眼内液检测：外周血弓形虫IgM抗体(+),眼内液弓形虫IgG抗体(+)且Goldmann-Witmer系数超过正常值。结合眼科查体及血清学等相关检查后诊断为“弓形虫眼病”,予以局部使用皮质类固醇、全身驱虫等治疗，用药第9天复查，患眼视力提高，视网膜下液吸收。