兔自体骨髓间充质干细胞移植对角膜缘干细胞损伤的初步疗效研究

目的探讨兔自体骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对角膜缘干细胞(LSCs)损伤的初步疗效。方法 36只大白兔分为三组:BMSCs组、LSCs组与羊膜对照组,每组12只。BMSCs组采用附着有BMSCs的羊膜治疗角膜缘干细胞损伤,LSCs组将附着有角膜内皮细胞的羊膜治疗角膜缘干细胞损伤,羊膜对照组则仅将羊膜用缝合线固定于浅层巩膜上治疗角膜缘干细胞损伤。于术前、术后1周、术后2周、3周和4周对眼表的形态进行评分;并于术前、术后1周、4周、8周利用聚焦显微镜观察细胞密度和表面积。结果在移植手术实施之前三组兔的眼表形态综合评分之间的差异无统计学意义(P0.05);手术之后4周BMSCs组和LSCs组兔的眼表形态评分得以显著改善,差异有统计学意义(P0.05);手术之后4周羊膜对照组兔的眼表形态评分与手术前相比,差异无统计学意义(P0.05);手术之后4周BMSCs组和LSCs组之间的眼表形态评分之间差异无统计学意义(P0.05)。与羊膜对照组相比,其它两组手术4周之后的眼表形态评分改善更显著,差异有统计学意义(P0.05)。经过共焦显微镜观察,BMSCs组兔移植1周之后的细胞形态为圆形,而非初始的梭边形,细胞较小,密度较高,而随着时间推移,个数逐渐减少,体积变大。随着时间的推移BMSCs组与LSCs组兔移植后的平均细胞密度出现下降。手术前BMSCs组与LSCs组细胞表面积差异无统计学意义(P0.05);手术后1周、4周BMSCs组的细胞表面积显著低于LSCs组,差异有统计学意义(P0.05),手术之后8周和12周时BMSCs组与LSCs组细胞表面积差异无统计学意义(P0.05)。结论与角膜缘干细胞相似,兔自体骨髓间充质干细胞移植治疗角膜缘干细胞可以重建受损的眼表,减轻水肿,抑制血管生成。     

逆行撕离联合原位自体结膜瓣旋转移植治疗翼状胬肉64例

目的:观察逆行撕离联合原位自体结膜瓣旋转转位移植治疗翼状胬肉的临床效果。方法:显微镜下逆行撕离切除翼状胬肉,原胬肉体部球结膜取5mm×2mm长条形结膜瓣,原位旋转360°后与角膜缘结膜及鼻侧球结膜紧密缝合。术后随访3～18mo。结果:所有病例移植片成活良好,64例病例中仅4例复发。结论:逆行撕离联合原位自体结膜瓣转位移植术,减少局部炎症刺激,改变了角膜缘移位,促进角膜缘干细胞微环境的修复并使角膜缘干细胞向角膜上皮细胞分化,是目前治疗翼状胬肉有效的方法之一。     

流行性角结膜炎上皮下浸润应用 1%环孢素 A 治疗临床研究

目的:探究1%环孢素A对治疗的流行性角膜炎上皮下浸润过程中的效果及影响. 方法:调查门诊2011年2月至2013年2月诊诊断为流行性角膜炎伴有上皮下浸润患者20例共26只眼,再将这20名患者随机的分为对照组和实验组,对照组10例( 13眼) ,应用糖皮质激素类眼药水进行点眼治疗;实验组10例( 13眼) ,应用1%环孢素A进行点眼治疗. 观察对比两组患者治疗前后BC-VA,CSIS,IOP的情况,并调查对比两组患者的治愈率,复发率和患者对治疗的满意率. 结果:治疗前后差异有统计学意义( P<0.05) ,两组患者治疗后的症状都有所缓解,但实验组的效果明显比对照组更好. 实验组患者用1%环孢素A后无明显刺激症状.,患者无不适感. 治愈率很高为84.6%,复发率极低( 7.7%) ,患者满意率97.2%. 对照组患者用糖皮质激素后7例产生眼内压升高,治愈率很低为23. 1%,复发率33.3%,患者满意率为70.5%. 结论:局部应用1%环孢素A滴眼液治疗流行性角结膜炎上皮下浸润安全有效,无糖皮质激素治疗的副作用,1%环孢素A比糖皮质激素更加安全有效可靠.     

兔MSCs移植对兔角膜缘干细胞形态、增殖、分化的影响

目的探讨兔骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对兔角膜缘干细胞形态、增殖、分化的影响。方法无菌条件下取兔骨髓,分离得到兔MSCs。取培养3代后MSCs消化后制成细胞悬液,接种于羊膜植片上,常规培养。建立兔角膜碱烧伤干细胞缺损模型4 w后,将18只新西兰兔随机分为空白组、MSCs移植组和模型组,每组6只。MSCs移植组和模型组分别用尼龙缝线将空白和带有兔MSCs的羊膜基质植片间断缝合固定于浅层巩膜上,空白组不做处理。术前、术后观察实验兔眼表形态,并进行评分。术后4 w处死动物,免疫组化检查细胞角蛋白AE5表达情况。结果筛选得到的兔MSCs细胞均一性达98.12%;术后MSCs移植组兔眼表形态综合评分显著降低,而模型组无显著变化,同期与模型组综合评分相比,均显著低于模型组(P<0.05);免疫组化检测结果显示,空白组和MSCs移植组AE5阳性表达率均为100.00%,显著高于模型组(P<0.05)。结论以羊膜基质为载体移植MSCs治疗角膜缘干细胞缺乏症,可增殖分化为角膜上皮细胞而发挥功能,疗效显著,可为其临床应用提供理论基础。     

骨髓间充质干细胞移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的疗效观察

【目的】探讨骨髓间充质干细胞（MSCs）移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的疗效。【方法】选取健康的新西兰兔21只,随机分为角膜缘干细胞缺乏MSCs移植组（A组）、角膜缘干细胞缺乏组（B组）和正常空白组（C组）,每组7只,C组不进行操作,A组、B组使用N aO H破坏角膜来建立兔角膜缘干细胞缺乏动物模型,对兔髂窝处骨髓进行骨髓抽吸,利用密度梯度离心分离并培养MSCs ,A组将培养的MSCs接种在明胶载体膜上,利用组织黏合剂α‐氰基丙烯酸脘基酯,使 MSCs的载体与自体兔角膜植片（机械除去角膜缘干细胞）相互黏合,将载有MSCs的移植片缝合在浅层巩膜上;B组只需将球结膜断裂处缝合在浅层巩膜上。观察评估三组动物的眼表形态和角膜组织恢复情况。【结果】三组手术前的眼表形态评分比较无统计学意义（ P ＞0．05）,在术后第一周开始A组眼表形态评分显著高于B组、C组（ P ＜0．05）;三组细胞层数、表层细胞排列、杯状细胞、胶原纤维排列和炎性细胞比较差异均有统计学意义（P ＜0．05）,A组术后角膜组织恢复情况评分显著高于B组（P ＜0．05）。【结论】MSCs移植于角膜缘,能够改善眼表结构的形态,促进角膜缘组织恢复,治疗角膜缘缺损疗效满意。