脑源性神经营养因子对大鼠视网膜节细胞损伤的保护作用

目的：观察脑源性神经营养因子（brain-derived neurotrophic factor,BDNF)对Sprague-Dawly(SD)大鼠视神经损伤后视网膜节细胞（retinal ganglin cells,RGC)存活的作用。方法：将SD大鼠分为正常对照组,夹伤对照组,溶剂对照组,BDNF治疗组4组,每组20只眼。荧光金逆行标记RGC后7天,除正常组外行球后视神经夹伤,将100ng BDNF注入BDNF治疗组大鼠玻璃体腔内,分别于5,7,14,21,28天行RGC计数。结果：视神经夹伤后第7天RGC开始减少,14天时降至正常对照的70．2％,28天时降至40．5％。与正常组相比BDNF治疗组14天时RGC数开始减少,但7、14、21、28天RGC数均明显多于夹伤组（P＜0．01）。结论：在视神经夹伤后眼内注射BDNF能减少RGC的死亡,对RGC损伤有保护作用。     

显微摄影技术：如何制作显微镜照片（下）

彩色摄影用于彩色摄影的胶片，根据最终所需图像可选用反转片和负片。无论是使用负片彩扩照片还是目前逐渐普及的反转片直接印刷，从画质来看，反转片优于负片。此外，在使用负片彩扩时，反转片可用来显示拍摄物色彩的标准。彩色胶片的色彩，由于制造商、商标、显影地（彩扩店）的不同而不同，应固定某种胶片和彩扩店。事先用不同染色的3～5种标本（基准标本）进行摄影，根据得到的结果选定适当的曝光量和色补正数据。当使用新型胶片时，用基准标本拍摄并与已有的拍摄记录进行比较，即可得到新数据。1使用反转片。2标本染色浓度淡的情况下，…     

人颗粒酶B融合蛋白对转染的HeLa细胞的作用

目的 观察颗粒酶B（granzyme B)融合蛋白对转染的HeLa细胞的作用。方法 用RT－PCR法获取人granzyme B全长cDNA，经重组PCR将活性型序列的5′端与一段PE转膜肽序列融合。将所获重组基因克隆入绿色荧光蛋白（GFP）共表达载体pIRES2-EGFP,转染HeLa细胞。用免疫组化染色法检测目的蛋白的表达，荧光显微镜和电镜观察转染细胞的形态和结构。结果 成功地获得了野生型granzyme B cDNA及其融合蛋白基因，并构建了融合蛋白基因与GFP基因共表达的真核载体。转染HeLa细胞后，检测到目的蛋白的表达。荧光显微镜观察转染细胞有两种变化：一种表现为体积增大并常伴随多核现象；另一种出现细胞质和细胞核的固缩。电镜观察显示，多核巨细胞生长状态良好，固缩的小细胞则呈现凋亡的典型特征。结论 granzyme B融合蛋白在HeLa细胞中异位表达，可使转染细胞的形态发生变化，出现多核的大细胞和核固缩的小细胞。     

低倍率组织切片的摄影及像质探讨

低倍率组织切片的摄影通常使用低倍放大摄影装置或光学显微镜。两者成像不同,低倍放大摄影装置是一次成像的像,而光学显微镜是二次成像的像,由于光学特性的不同,出现成像的差异。本研究是通过低倍放大摄影装置和光学显微镜对组织切片分别拍摄,用光学理论加以分析对比,以便在实践中选择应用。倍率及摄影装置(低倍放大摄影装置与光学显微镜)的选择是基于成像是否有良好的解像度,由实验结果得出,低倍放大摄影装置适合于×5以下的拍摄,细微部可以得到良好的显现。×1与×2低倍率显微镜物镜的球面差较大,不适于低倍率摄影。但是,放大机的再次成像时,可取底片中心的60％～70％制成照片,会消除一些由于低倍物镜球面差引起的不足。在摄影装置的选择使用时,还应注意物镜的光圈数。     

神经激肽B受体在猫三叉神经脊束核尾侧亚核和脊髓内的分布

目的 了解神经激肽Ｂ受体（ＮＫ３受体）与伤害性信息的传递和调制的可能关系，调查ＮＫ３受体在三叉神经尾介亚核和脊髓内的分布状况。方法 免疫组织化学技术。结果 ＮＫ３受体样免疫反应产物在三叉神经尾侧亚核和脊髓内的分布基本一致。致密的免疫反应产物分布Ⅱ内层（ｉｎｎｅｒ ｐａｒｔ），而Ⅰ层和Ⅱ外层染色浅谈。     

投射于腰骶髓后连合核的传递伤害性刺激的初级传入纤维的来源探索—c-fos表达方法

本课题组的既往研究曾发现 ,膀胱的初级传入投射纤维中有一部分传递伤害性刺激 ,投射于腰骶髓的后连合核。本研究的目的是通过比较盆腔内脏和后肢躯体性结构的伤害性刺激诱导 FOS阳性反应在大鼠后连合核的表达状况 ,藉以确定投射于后连合核的传递痛信号的初级传入的来源。本实验分别向盆腔内脏的膀胱和直肠以及坐骨神经支配的小腿外侧皮肤及腓肠肌等四个不同部位注入 2 %福尔马林溶液 ,用免疫组织化学方法观察了腰骶段脊髓内 FOS的表达状况 ;并向此四部位注射生理盐水作为对照。结果证明 ,将 2 %福尔马林溶液注入膀胱或直肠内腔后可主要诱导 L6,S1 ,S2 节段后连合核出现大量 FOS阳性细胞核( 2 5～ 95个 /片 ) ;向小腿外侧皮肤或腓肠肌注射福尔马林溶液 ,则主要在背角浅层出现浓密的 FOS阳性细胞核而在后连合核仅发现极少量的 FOS阳性细胞核 ( <5个 /片 ) ;在不给予福尔马林刺激的对照组 ,后连合核内也出现极少量散在的 FOS阳性细胞核 ( <3个 /片 )即后连合核内出现极少量的传递躯体伤害性刺激的传入成分与不给予福尔马林刺激的对照组结果无明显差别 ,这种极少量的神经元在神经机能的传递上不应有何作用。因而 ,本研究结果提示 ,盆腔内脏来源的痛信号初级传入成分是后连合核内唯一的有机能意义的痛传入成     

雪旺细胞源营养神经活性物质对大鼠视网膜节细胞损伤的作用

目的 观察雪旺细胞(Schwann cells,SC)源营养神经活性物质 (SC derived neurotrophic activity,SCNA)对Sprague-Dawly(SD)大鼠视神经损伤后视网膜节细胞(retinal ganglion cells,RGC)存活的影响。 方法 体外培养日龄3～5 d SD乳鼠SC,收集无血清条件培养液,经超滤浓缩后制成冻干粉。SD大鼠分为正常对照组,视神经夹伤对照组,视神经夹伤溶剂对照组,视神经夹伤SCNA 治疗组,每组20只眼。荧光金逆行标记RGC后7 d,除正常对照组外均行球后视神经夹伤,SCNA治疗组将100 ng SCNA注入大鼠玻璃体腔内。分别于视神经夹伤后第5、7、14、21、28 d 将动物灌注固定,做全视网膜铺片,行RGC计数。 结果 视神经夹伤后第7 d RGC开始减少,14 d时降至正常对照的70.2%,28 d时降至40.5%。SCNA治疗组7 d时RGC数开始减少,但14、21、28 d RGC数均明显多于视神经夹伤对照组及视神经夹伤溶剂对照组(P＜0.01)。 结论 在视神经夹伤后眼内注射SCNA能减少RGC的死亡对RGC损伤有保护作用。（中华眼底病杂志,2000,16：1-70）     

基于锡尔系数的广东省2008-2017年健康险区域差异分析

[目的]对广东省健康险近10年的发展概况和区域发展差异的分析,为健康险的区域均衡发展提出方法建议。[方法]计算广东省2008-2017年保费收入和保险密度的锡尔系数,并对锡尔系数进行分解。[结果]健康险保费收入、保险深度和保险密度不断增长,2016年保费收入比2008年增长6.5倍,2017年底保险深度为0.59%、保险密度为486.86元,比2008年分别增长7.38倍、6.6倍,四大区域市场格局占比差距比较大,珠三角地区一直占市场的80%以上;在保费收入方面,广东省健康险的区域发展较为不平衡,区域内部各市县发展的不平衡已成为健康险区域整体发展不平衡的主要原因;在保险密度方面,广东省各市县发展迅速,但是各市县之间发展不均衡问题较为突出,保险密度值已经从273.5元增长至990.63元。[结论]2008-2017年广东省健康险保费收入、保险深度和保险密度不断增长,但保费深度、人均保费仍较低,各区域间及区域内发展不平衡。     

如何计算显微镜下视野面积

在显微镜下进行病理读片,是病理医师工作中的重要内容之一.显微镜观察和记录的结果是临床诊断的科学依据.正确标准的使用显微镜,观察和记录读片结果才具有科学性.众所周知,显微镜的成像首先是由物镜对标本放大成像,然后由目镜一次放大被人们肉眼观察到.