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1.
目的:研究大鼠原代肝细胞长期体外培养后功能和形态的变化。 方法: 采用两步胶原酶原位灌流法分离大鼠肝细胞,并用Percoll分离液进行密度梯度离心进一步纯化肝细胞,采用0.4%台盼蓝染色观察细胞活力。然后将细胞接种于HepatoZYME-SFM培养基中培养,定期收集肝细胞培养液上清检测丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白、尿素氮的水平。采用乙氧基试卤灵O-脱乙基酶活性(EROD)方法检测肝细胞P450的CYPⅠA1功能。 结果: 新鲜分离的大鼠肝细胞总数(2-3)×108cells/whole liver,Percoll分离液纯化后活力和纯度在90%以上。HepatoZYME-SFM培养下肝细胞生长良好并保持正常形态。AST、ALT水平在培养3 d后下降显著,6-9 d后趋于相对稳定的低水平。白蛋白的分泌功能、尿素合成能力在18 d内维持在较高水平。可在3-6 d检测到CYPⅠA1酶活性。 结论: Percoll液纯化新分离肝细胞可提高其活率和纯度,HepatoZYME-SFM培养条件下肝细胞可有效保持良好形态结构和一定的生物合成代谢能力,适合肝细胞的体外长期培养和功能研究。 相似文献
2.
3.
弹伤性脉络膜视网膜病变病例报告庄鹏刘明玉作者单位:漳州市医院眼科(福建363000)收稿:1997-04-28;修回:1997-06-13弹伤性脉络膜视网膜病变(chorioretinopathysclopetaria)是由于高速的子弹或弹片在眼球和... 相似文献
4.
青少年牵牛花综合征的屈光观察 总被引:1,自引:0,他引:1
青少年牵牛花综合征的屈光观察庄鹏,林建山牵牛花综合征(Morningglorysyndrome,MGS)是一种先天性视神经乳头发育异常,自Kindler〔1〕1970年首先描述并命名以来,国内外已有不少病例报告,但很少对其屈光进行研究,今就我们所遇3... 相似文献
5.
中心性浆液性脉络膜视网膜病变(以下简称中浆)多发于中青年,影响劳动力,为此统计漳州市农村中1987~1991年来我院就诊的中浆患者97例102眼,分析讨论其发病特点。 1 临床资料 1.1 例数及眼数本文97例中92例(94.8%)为单眼发病,5例(5.2%)为双眼发病;102眼中右52眼,左50眼;复发者10例(10.4%)11眼。 1.2 性别与年龄男性85例(87.6%)87眼,年龄 相似文献
6.
目的观察α-干扰素(IFN-α)治疗肝癌产生耐药性的过程,探讨其机制。方法裸鼠肝内原位接种裸鼠人肝癌高转移裸鼠模型LCI-D20肿瘤组织,随机分为7组,每组6只。其中治疗组于接种肿瘤后第2天皮下注射给予IFN-α(1.5×10~7 U/kg体重/d)20 d,治疗组A和B裸鼠于停药后第1和21天分别被处死;治疗组C和D于停药后第21天再次给予同剂量IFN-α(1.5×10~7 U/kg体重/d)联合格列卫(100mg/kg体重/d,灌胃)治疗20 d。对照组E~G分别在接种肿瘤后第28、48、68天被处死。观察裸鼠体重,肿瘤大小、体积,检测血清血管内皮细胞生长因子(VEGF)浓度、肿瘤组织微血管密度。抽提A、D、E、G各组总RNA做关于血管生成SuperArray基因芯片。结果A~G组肿瘤的大小分别为0.27、1.54、3.22、2.23、0.68、1.93、3.98 g,其中组A和组E,组D和组G相比,肿瘤大小差异有统计学意义(P<0.05)。外周血VEGF浓度组A和组E,组C、D和组G相比差异有统计学意义(P<0.05)。芯片结果提示在IFN-α治疗过程中,肝癌组织VEGF mRNA和裸鼠血清中的VEGF仍保持较低水平,而PDGF-AA mRNA的表达水平逐渐升高。组A微血管密度显著低于组E,而在组C和组G间差异无统计学意义。HE染色显示治疗组与对照组相比,异常核分裂象增多,肿瘤周围包膜变薄,纤维成分减少。结论肝癌可对IFN-α治疗产生耐药性,可能的机制为肝癌肿瘤血管生成由VEGF依赖转化为PDGF依赖。 相似文献
7.
8.
白内障超声乳化吸除术学习过程中后囊膜破裂的发生与预防 总被引:11,自引:0,他引:11
后囊膜破裂玻璃体脱出是白内障超声乳化吸除术(Phacoemulsification,Phaco)最主要与最常见的术中并发症,也是造成其学习曲线(1earning curve,straightline)长而困难的主要原因,从而影响了手术的普及。即使在国外良好的训练中心,最初100例Phaco的并发症发生率也相当高,如后囊膜破裂玻璃 相似文献
9.
目的探讨利用CRISPR/Cas9敲除系统沉默Fas基因介导的细胞凋亡在肝衰竭发生机制的作用。方法构建靶向Fas基因的CRISPR/Cas系统(pX330-Fas-G1)质粒并转染HepG2细胞(设非转染细胞HepG2为对照组),提取DNA后T7E1酶切法检测突变体;Western blotting检测Fas蛋白的表达。刀豆素A药物处理后MTT法检测细胞增殖,克隆增生法检测细胞增生,AnnexinV/PI荧光双染分析细胞凋亡情况。结果 T7E1酶切分析显示,pX330-Fas-G1质粒的Guide RNA在Fas基因组上产生了有效切割,切割效率为50%;同时Western blotting检测结果显示,pX330-Fas-G1质粒转染至HepG2细胞后,与空白质粒pX330-GFP组比较,Fas蛋白的表达降低,差异有统计学意义(P0.01)。经刀豆素A药物诱导细胞凋亡后,MTT法测定pX330-Fas-G1质粒转染的HepG2细胞组活力值为(68.0±5.0)%,高于非转染细胞组的(51.5±5.8)%,差异有统计学意义(P0.05);克隆增生法检测结果显示,pX330-Fas-G1质粒转染的HepG2细胞组在细胞克隆形成数量为(128.8±5.1),高于非转染组的(100.0±9.3),差异有统计学意义(P0.05)。给予刀豆素A药物处理诱导细胞凋亡后,通过Annexin V和PI双染色,采用流式细胞技术检测显示,经pX330-Fas-G1质粒转染后的细胞组有10.0%的细胞为凋亡细胞,低于对照组细胞的33.3%,差异有统计学意义(P0.01)。结论 CRISPR/Cas9系统可通过下调Fas基因的表达来抑制细胞凋亡的进展,为临床开展急性肝衰竭的基因治疗提供理论依据和技术支持。 相似文献
10.
<正>1病例资料患儿男,8岁,以“右眼被‘水弹’击伤后视物模糊2天”为主诉入院。入院2天前与同龄玩伴玩耍时不慎被距离2.5米水弹枪发射出的“水弹”击中右眼,门诊查右眼裸眼视力为手动/眼前,无法矫正,左眼裸眼视力为0.4,矫正视力为0.8 (-1.50DS),眼压:右眼为17 mm Hg (1 mm Hg=0.133k Pa),左眼为15 mm Hg,予“妥布霉素滴眼液四次/日”“氟美童滴眼液四次/日”局部点眼, 相似文献