HTLV在特殊人群中的感染性调查

为调查我国内陆地区HTLV的传播性,1998年我室对部分吸毒人员、献血人员以及性混乱人群采集样本400份,进行血清抗体检测.结果阳性17份,阳性率4.25％,明显高于广东及沿海等地区,其中吸毒人群为最高,阳性率6.47％本次调查揭示HTLV在我国内陆不同人群的分布以及血源传染的危害性。     

青海省同德县莱姆病血清流行病学调查分析

莱姆病 (Ｌｙｍｅｄｉｓｅａｓｅ) 1 977年首先在美国康涅狄格州莱姆镇发现。是以蜱类为传播媒介 ,由伯氏疏螺旋体引起的自然疫源性疾病 ,流行范围已扩大到世界五大洲 ,在我国业已证实有 1 8个省存在自然疫源地 ,至少 2 3个省区存在伯氏疏螺旋体的感染[1 ] 。我省自 1 993年进行了一次调查外 ,再未进行过此类工作 ,为此 ,我们于 2 0 0 0年 8月对同德县人群进行了莱姆病血清流行病学调查 ,现将结果报告如下。材料与方法1　调查对象　同德县河北、秀麻、谷芒、唐干四个乡随机抽取 2 93人 ,询问感染史 ,统一填写调查表。2　检测方法　①无菌采…     

青海省2006年流感局部爆发流行中的病原体检测

目的：分析上呼吸道疾病局部爆发流行中流感病毒感染的检测方法及意义。方法：采用试剂盒现场快速检测（ELISA法）标本中的流感病毒抗原。标本运输至实验室,接种到狗肾传代细胞（MD-CK）进行病毒分离,血凝及血凝抑制试验鉴定毒株型别。结果：快速检测阳性率12%,病毒分离阳性率73.7%。结论：病毒分离在流感病毒的检测中具有敏感性好的优点,但快速抗原检测在现场诊断中也值得采用。     

小鼠阴道黏膜HSV-2感染细胞凋亡与Fas Bcl-2的关系

目的探讨单纯疱疹病毒2型(herpes simp lex virus type 2,HSV-2)直接感染诱导小鼠阴道黏膜的细胞凋亡情况与Fas,Bc l-2蛋白水平的关系。方法建立HSV-2阴道感染小鼠模型。用TUNEL染色研究HSV-2诱导阴道上皮细胞凋亡,检测Fas,Bc l-2蛋白的水平,分析其与细胞凋亡的相关关系。结果22份标本有凋亡细胞阳性表达,并同时伴有炎症及坏死。Fas蛋白阳性率高(24/24),Bc l-2蛋白阳性率低(2/24)。结论HSV-2直接感染小鼠阴道后可同时诱导阴道上皮细胞凋亡及炎症坏死,Fas蛋白呈高水平,与凋亡细胞指数呈正相关(r=0.9660,P<0.05),提示Fas对HSV-2诱导的黏膜细胞凋亡起上调作用。     

成都地区献血人群Jk(a-b-)表型的DNA序列分析

目的 调查成都地区献血人群Jk(a-b-)表型的分子遗传特征.方法 采用聚合酶链反应-序列特异性引物技术对成都地区8名Jk(a-b-)表型献血者了K基因第4~11外显子及其侧翼区域进行扩增,并对产物进行测序分析.结果 8份样本均为第9外显子c.838AA纯合型,含有无效Jkb等位基因.发现4种突变序列:(1)IVS5-1G>A纯合突变、第7外显子c.588 A>G(P.Pr0196Pro)纯合突变;(2)第9外显子c.896G>A(P.Gly299Glu)纯合突变、第7外显子c.588 A>G(P.Pr0196Pro)纯合突变;(3)IVS5-1 G>A杂合突变、第5外显子c.222C>A(P.Asn74Lys)杂合突变、第7外显子c.499A>G(Met167Val)杂合突变、第7外显子c.588 A>G(P.Pro196Pro)纯合突变;(4)IVS5-IG>A杂合突变、第9外显子c.896G>A(P.Gly299Glu)杂合突变、第7外显子c.588 A>G(P.Prol96Pro)纯合突变.结论 IVS5-IG>A突变、第5外显子c.222C>A突变(p.Asn74Lys)和第9外显子c.896G>A突变(P.Gly299Glu)可能是成都地区献血人群Jk(a-b-)表型的分子遗传基础.     

缺氧对脑脊液-视神经屏障中脑膜上皮细胞ATP水平和细胞色素C表达的影响

背景脑膜上皮细胞（MECs）是构成脑脊液-视神经屏障的主要细胞成分。脑脊液-视神经屏障的损害可能会导致脑脊液组分的失衡,使视神经受到各种致病因素的攻击。目前对于MECs在视神经疾病中的病理作用研究甚少,机制尚不明确。目的探讨缺氧条件下人MECs的功能变化,为视神经疾病发病机制的研究提供新的线索。方法将培养的人MECs株分别制备成密度为2．5×10^3个／孔、5．0×10^3个／孔和1×10^4个／孔的细胞悬液,各取100μl分别接种于96孔板中,分别在常规培养基及体积分数21％O2（常氧组）和1％O2（缺氧组）环境下孵育2d,采用MTS法测定和比较不同氧环境下人MECs的吸光度（A490）值;采用CASY1法检测和比较不同氧环境下细胞体积及直径的变化;采用光度计测定MECs暴露不同氧环境下1d、2d后线粒体产生ATP量的变化;采用免疫荧光技术测定不同氧环境下细胞内细胞色素C的表达和定位。结果缺氧组2．5×10^3个／孔、5．0×10^3个／孔、1×10^4个／孔细胞密度组MECs的增生值（A490）分别为0．399±0．009、0．393±0．009和0．496±0．026,分别较相应的常氧组的0．424±0．131、0．413±0．111和0．537±0．021明显下降,差异均有统计学意义（t=3．777,P=0．004;t=3．251,P=0．009;t=3．037,P=0．013）。与常氧组细胞比较,缺氧组细胞的直径和体积均明显增加[（20．970±0．127）μm vs．（21．198±0．048）μm,t=-3．762,P=0．006;（5805±73）fl vs．（6026±106）fl,t=-4．124,P=0．002）]。缺氧组和缺氧＋底物组细胞分别培养2d后,细胞中ATP产生量分别为（0．900±0．225）mmol／（L·g）、（0．952±0．075）mmol／（L·g）,均明显低于常氧组的（1．389±0．145）mmol／（L·g）和常氧＋底物组的（1．401±0．122）mmol／（L·g）,差异均有统计学意义（P=0．001、0．002、0．001）。常氧组细胞中细胞色素C的绿色荧光主要分布于线粒体,而缺氧组MECs中细胞色素C的释放弥散分布于细胞质。结论缺氧环境下MECs的生理功能明显减退,推测MECs的功能损害是脑脊液和视神经之间的屏障完整性受到损害的主要机制。     

小鼠β防御素1与甲型流感病毒M2e融合基因表达及其免疫特性研究

目的构建mBD1与M2e融合基因的真核表达载体,并检测其在MDCK细胞中的表达情况,初步探讨其免疫特性。方法利用PCR方法分别扩增mBD1与M2e基因片段,再通过重叠延伸PCR技术(SOE-PCR)将mBD1与M2e通过一段多肽接头Gly4Ser连接为融合基因mBD1-M2e。将该融合基因插入真核表达载体pcDNA3.1(+)获得重组质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,用脂质体转染MDCK细胞,通过免疫荧光、RT-PCR产物序列分析检测融合蛋白表达情况,最后采用MTT法检测mBD1-M2e融合蛋白刺激淋巴细胞增殖能力。结果经鉴定后证实构建真核表达质粒pcDNA3.1(+)/mBD1-M2e正确,该重组质粒能在MDCK细胞中稳定表达,该细胞培养上清液能刺激淋巴细胞增殖。结论本研究成功构建mBD1-M2e融合基因的真核表达质粒,并证实其融合蛋白能在MDCK细胞中稳定表达,这一结果为进一步研究新型高效通用的流感病毒核酸疫苗奠定了坚实的基础。     

皮肤消毒方法:前瞻性评估和实施后的结果

静脉采血部位的最佳皮肤消毒,对最大限度降低在献血时血液污染至关重要,因为在污染血液成分中检测到的大多数细菌为部分皮肤定居和暂居菌.     

是重新考虑检测血小板捐献者中性粒细胞抗体的时候了

Reil等在2011年第1期Transfusion上发表的原创性研究论文,是一系列代表着在中心粒细胞免疫领域重大进展的界标性论文中的第3篇.第1篇为Reil等关于人类中性粒细胞抗原(human neutrophil antigen,HNA)-3系统的特征描述.第2篇为发现HNA-3a和HNA-3b源自胆碱转运子样蛋白2基因的单核苷酸多态性.这些该结果已被其他研究者所证实.而本文则重点描述采用序列特异性引物聚合酶链反应(sequence-specific primers polymerase chain reaction,SSP-PCR)技术检测HNA-3a和HNA-3b基因型及对大样本高加索人群HNA-3a和HNA-3b基因频率的研究,并评价了与妊娠有关的同种异体免疫风险.这3篇文章标志着对5个HNA系统:HNA-1,-2,-3,-4和-5特征研究的完成,这可能将导致对HNA基因分型和抗体检测方法学的改进.     

一例稀有血型JK(a-b-)表型家系调查分析

本研究旨在检测Kidd血型系统的稀有JK(a-b-)表型的先证者及其家系中其他个体的表型及基因型,探讨本例JK(a-b-)表型的分子机理,分析遗传背景,为稀有血型个体输血治疗寻找相合供者提供科学依据。采用4 mol/L尿素溶血试验,筛选JK(a-b-)表型先证者,并对其进行家系调查。用血清学方法确认表型;用PCR-SSP方法检测基因型,并对JK基因外显子4-11及其侧翼的区域扩增后测序,分析序列信息。结果表明,先证者及其哥哥具有相同的表型JK(a-b-)和基因型Jkb/Jkb;其父母的表型为JK(a+b-),基因型为Jka/Jkb;妹妹的表型和基因型分别为JK(a+b-)和Jka/Jka。对外显子及其侧翼测序发现,先证者及其哥哥的内含子5的3’端拼接接受位点碱基g>a突变,其父母的该位点均为a/g杂合,其妹妹的该位点没有突变;内含子3(外显子4侧翼)nt-99位的碱基为g,其父母的该位点均为g/a杂合,其妹妹的该位点是a。结论:先证者及其哥哥具有相同的表型JK(a-b-)和基因型Jkb/Jkb,JK基因内含子5的3’端拼接接受位点的g>a突变可能是造成其JK(a-b-)表型的原因之一;家系中内含子3的nt-99位的碱基也具有多态性(ncbi:rs8090908),该位点多态性是否与JK(a-b-)表型相关值得进一步研究。本例家系Kidd血型系统符合显性遗传规律。对于稀有JK(a-b-)表型个体的家系,尤其是同胞兄妹进行血型调查,发现表型和基因型均相同的个体可能性大。