胃癌组织中HuR表达与临床病理及生存状况的关系

目的研究RNA结合蛋白HuR在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法选择铜川矿务局中心医院2010年8月至2012年3月收治的胃癌根治术患者的73份胃癌组织标本作为胃癌组,选择在同一时期内接受胃切除术的21例正常胃组织作为对照组。通过免疫组织化学技术检测胃组织福尔马林固定标本的表达情况,分别用细胞质和核染色评估HuR表达。比较正常胃组织和胃癌组织中HuR表达的差异。探讨HuR的表达与临床病理特征之间的关系,并比较不同HuR表达患者的生存率差异。通过COX模型确定胃癌根治术后预后的影响因素。结果在胃癌组织细胞中,癌细胞核中HuR的表达在53个样本中表达率很高(72. 6%;得分2,n=33;得分3,n=20)。癌细胞中的细胞质表达在20个样本中表达较高(27. 4%;得分2,n=13;得分3,n=7)。与正常胃组织相比,胃癌细胞核和细胞质HuR的表达显著增高(Z=5. 269、8. 475,P 0. 01)。在癌细胞核中,未观察到HuR表达与临床病理学特征有明显相关(P0. 05);而在癌细胞质中,观察到HuR表达与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤大小明显相关(P 0. 05)。在细胞质中,HuR阴性表达患者的中位生存期(54个月)比HuR阳性表达患者(29个月)更长(P 0. 01)。在细胞核中,HuR阴性表达患者的中位生存期(52个月)比HuR阳性表达患者(44个月)长(P=0. 016)。应用多元Cox回归模型分析独立预后因素,结果表明细胞质HuR蛋白表达、肿瘤大小、淋巴结转移和TNM分期是影响患者生存的独立预后因素(P=0. 046、0. 041、0. 035和0. 012)。结论细胞质HuR表达与胃癌患者的恶性侵袭性和预后显著相关,可作为胃癌根治术后转移的预测指标。     

腹腔镜与开腹胃癌根治术清除淋巴结的临床效果比较

目的比较腹腔镜与开腹胃癌根治术在清扫淋巴结中的临床效果。方法选取2010年10月到2015年10月铜川矿务局中心医院普外科行胃癌根治术患者753例,根据手术方式将患者分为腹腔镜胃癌根治术组(腹腔镜组) 384例和常规开腹胃癌根治术组(开腹组) 369例。记录并比较2组患者手术时间、出血量、切口长度、住院时间及淋巴结清扫情况。采用SPSS 19. 0统计软件对数据进行处理,根据数据类型,组间比较采用独立样本t检验或χ2检验。结果腹腔镜组患者手术时间显著大于开腹组[(275. 16±32. 59) vs (208. 72±27. 37) min,P 0. 001],但与开腹组比较,腹腔镜组患者出血量降低[(151. 62±28. 43) vs (319. 34±98. 15) ml,P 0. 001],切口长度减小[(6. 35±1. 47) vs (17. 53±1. 78) cm,P 0. 001],住院时间缩短[(9. 17±3. 24) vs (15. 64±5. 37) d,P=0. 004],差异有统计学意义。腹腔镜组总清扫淋巴结9984枚,每例患者淋巴结清扫数目15~41(25. 86±5. 47)枚;开腹组总清扫淋巴结9372枚,每例患者淋巴结清扫数目15~46(26. 47±6. 12)枚。2组患者淋巴结清扫总数及每例患者清扫数目差异无统计学意义(P 0. 05)。2组患者在相同的区域、肿瘤胃壁浸润深度、手术方式、肿瘤大小及分化程度间,淋巴结清除数目差异均无统计学意义(P 0. 05)。结论在各种临床病理特征相似的条件下,腹腔镜胃癌根治术的淋巴结清扫效果与常规开腹胃癌根治术无明显差异,但前者整体手术效果优于后者。     

二甲双胍抑制糖尿病视网膜血管内皮细胞中核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白3炎症小体活化和细胞焦亡

目的观察二甲双胍(Met)对糖尿病(DM)微环境下人视网膜微血管内皮细胞(hRMEC)中核苷酸结合寡聚化结构样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体及细胞焦亡的影响。方法实验研究, 分为体内动物实验和体外细胞实验进行。体内动物实验:健康C57BL/6J雄性小鼠9只, 随机分为DM组、正常对照组、DM+Met处理组(DM+Met组), 每组各3只小鼠。DM组、DM+Met组小鼠经链脲佐菌素诱导建立DM模型;DM+Met组给予Met 400 mg/(kg·d)干预。建模后8周, 免疫组织化学染色观察正常对照组、DM组、DM+Met组小鼠视网膜NLRP3、cleaved-膜穿孔蛋白D(GSDMD)、cleaved-半胱天冬酶1(Caspase-1)的表达。体外细胞实验:hRMEC分为常规培养细胞组(N组)、晚期糖基化终末产物(AGE)组、AGE+Met组。AGE组、AGE+Met组加入150 μg/ml AGE诱导细胞, AGE+Met组另加入2.0 mmol/L Met处理细胞。流式细胞仪检测各组细胞焦亡情况;2’’, 7’’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测各组细胞中活性氧(R...     

骨形成蛋白4靶向调控SMAD9表达影响Müller细胞迁移和活性氧产生

目的观察并初步探讨骨形成蛋白4(BMP4)靶向调控SMAD9表达对Müller细胞迁移、活性氧(ROS)生成以及血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法体外培养的Müller细胞分为正常对照组、BMP4组、BMP4+空载质粒组(BMP4+NC组)、BMP4+SMAD9小干扰质粒组(BMP4+siSMAD9)。BMP4组、BMP4+NC组、BMP4+siSMAD9组细胞培养基加入100 ng/ml BMP4诱导细胞24 h。其后, BMP4+NC组转染空载质粒;BMP4+siSMAD9组转染SMAD9小干扰质粒48 h。细胞划痕实验测定BMP4对Müller细胞迁移的影响;流式细胞仪检测BMP4对Müller细胞内ROS生成的影响;蛋白质免疫印迹法(Western blots)、实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测Müller细胞内谷氨酰胺合成酶(GS)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)蛋白、mRNA相对表达量;免疫荧光检测Müller细胞内VEGF的表达。多组间比较采用单因素方差分析。结果细胞划痕实验检测结果显示, BMP4+ siSMAD9组细胞迁移率较BMP4组、BMP4+NC...     

糖尿病小鼠视网膜p21活化激酶4表达上调及其对视网膜血管内皮细胞行为和线粒体功能的影响

目的观察p21活化激酶4(PAK4)对视网膜血管内皮细胞行为和线粒体功能的影响。方法实验研究, 分为体内动物实验和体外细胞实验两部分。体内动物实验:健康C57BL/6J雄性小鼠12只, 随机分为正常对照组、糖尿病组, 每组各6只小鼠。糖尿病组小鼠经链脲佐菌素诱导建立糖尿病模型。建模后8周, 采用蛋白质免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链反应检测正常对照组、糖尿病组小鼠视网膜PAK4表达情况。体外细胞实验:人视网膜微血管内皮细胞(hRMEC)分为常规培养细胞组(N组)、空载体组(Vector组)、PAK4过表达组(PAK4组)。各组加入150 μg/ml糖基化终末产物诱导细胞。细胞划痕实验检测各组hRMEC内细胞迁移情况;流式细胞仪检测各组白细胞粘附于hRMEC数量。Seahorse XFe96细胞能量代谢分析仪测定细胞内线粒体基础呼吸、三磷酸腺苷(ATP)生成、最大呼吸与备用呼吸能力。两组间比较采用t检验;三组间比较采用单因素方差分析。结果体内动物实验:与正常对照组小鼠比较, 糖尿病组小鼠视网膜中PAK4 mRNA、蛋白相对表达量显著升高, 差异均有统计学意义(t=25.372、22.41...