B7-H3基因体内诱导特异性抗肿瘤免疫的研究

目的:研究人B7-H3基因在特异性抗肿瘤免疫中的作用.方法:建人免疫重建荷人口腔鳞癌SCID小鼠嵌合模型,瘤体内注射人B7-H3基因腺病毒表达载体, 1 周定期检测肿瘤体积,于第4、7 周分别尾静脉取血,ELISA法检测人IgG含量;9 周后处死模型动物,RT-PCR、免疫荧光显微镜检测肿瘤组织人B7-H3 mRNA、蛋白表达;流式细胞仪检测SCID鼠外周血CD4+、CD8+ T淋巴细胞.结果:第4、7 周可在免疫重建小鼠外周血测得人IgG. 荧光显微镜观察人B7-H3组小鼠肿瘤组织可见大量绿色荧光,RT-PCR检测到人B7-H3 mRNA表达,其余各组均未检测到人B7-H3表达. 人B7-H3组小鼠肿瘤体积小于其它组(P<0.05),生长明显受到抑制;免疫重建鼠均能检测到人CD4+、 CD8+ T淋巴细胞,人B7-H3组高于其它组.结论:人B7-H3基因在肿瘤组织的表达增强能成功诱导CD4+、 CD8+ T淋巴细胞增殖,产生有效的特异性抗肿瘤免疫应答.     

阈值期和阈值前期早产儿视网膜病变的远期视网膜电图特征

目的 观察阈值期和阈值前期早产儿视网膜病变（ROP）的远期视网膜电图特征。方法 诊断为阈值期或阈值前期ROP的24例患儿48只眼（ROP组）纳入研究。选择出生年龄、体重与之匹配的未发生ROP的早产儿10例20只眼为对照组。经过湖南省儿童医院医学伦理委员会批准并取得所有受检者父母的知情同意后,所有受检儿行全视野闪光视网膜电图（F-ERG）检查,记录视杆反应、最大混合反应以及视锥反应。结果 与对照组比较,ROP组患儿的视杆反应b波潜伏期明显延长,差异有统计学意义（t=5.643,P＜0.05）;振幅明显降低,差异也有统计学意义（t=7.068,P＜0.05）。与对照组比较,ROP组患儿的最大混合反应a、b波潜伏期均延长,差异有统计学意义（t=3.099、2.886,P＜0.05）;振幅均降低,差异也有统计学意义（t=5.614、2.850,P＜0.05）。与对照组比较,ROP组患儿的视锥细胞反应a、b波潜伏期（t=0.819、0.948）及振幅（t=0.904、0.850）无明显变化,差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论 阈值期和阈值前期ROP患儿远期视网膜视杆反应b波及最大混合反应a、b波潜伏期延长,振幅降低;视锥反应a、b波无明显变化。     

自噬抑制剂3-MA对结直肠癌细胞Jagged-1蛋白表达及其增殖的影响

目的:探索自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-methyladenine 3-MA)对结直肠腺癌细胞Jagged-1蛋白表达及其增殖活性的影响。方法:实验分为对照组和3-MA药物组(5 mmol/L),利用CCK-8法检测细胞活性;用Annexin/PI双染法检测细胞凋亡率;采用免疫组化和Western blot检测Jagged-1蛋白在两组中的表达差异。结果:Western blot及免疫组化结果表明:3-MA作用后,与对照组比较,结直肠腺癌细胞内Jagged-1蛋白的表达显著被抑制(P<0.05);3-MA作用后,结直肠腺癌细胞增殖率为(85.23%±5.61%),与对照组增值率比较具有显著差异(P<0.05);3-MA作用后,结直肠腺癌细胞凋亡率为(11%±4.3%),与对照组凋亡率(4.5%±2.1%)比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:3-MA可能通过抑制结直肠腺癌细胞中Jagged-1蛋白表达和结直肠腺癌细胞增殖、促进凋亡,从而发挥抗肿瘤生物学作用。     

阈值和阈值前期早产儿视网膜病变儿童视网膜电图观察

目的用全视野闪光视网膜电图（F-ERG）评价既往患阈值或阈值前期早产儿视网膜病变（ROP）JL童的视网膜功能。方法用F-ERG检查34例（68眼）既往有早产儿童,患阈值或阈值前期ROP者24例（48眼）,出生年龄体重匹配的未患ROP者10例（20眼）。统计分析两组儿童暗视和明视各反应a波、b波潜伏期和振幅的差异。结果ROP组较对照组暗视视杆反应和最大混合反应a波、b波潜伏期延长,振幅降低,差异有统计学意义,P〈O．05。ROP组与对照组明视视锥反应a波、b波振幅和潜伏期无明显差别,P〉0．05。结论阈值或阈值前期ROP视网膜功能受到影响,以视杆细胞的功能降低为主。F-ERG是评价早产儿视网膜功能有效检测手段。     

脑瘫患儿的视觉功能综合评估

目的：采用多项客观指标综合评估脑瘫患儿视觉功能,探讨脑瘫患儿的视觉障碍的临床特点。方法：对43例86眼眼部有视觉障碍脑瘫患儿进行眼追随实验、视动性眼震、屈光、眼底、斜视、图形视觉诱发电位(pattern visual evoked potential,P-VEP)及头颅磁共振成像( magnetic resonance imaging,MRI)等客观指标检查;对脑瘫患儿的视觉功能进行综合评估,分析不同性质脑瘫患儿的视觉障碍发生特点和可能机制。结果：(1)43例86眼合并视觉障碍患儿中,25例50眼(58.1%)脑瘫患儿发现屈光不正;24例48眼(55.8%)患儿存在斜视;12例24眼(27.9%)患儿伴有眼球震颤;19例38眼(44.2%)眼底视神经萎缩或者发育异常;35例70眼(81.4%)患儿VEP表现为异常;其中痉挛型脑瘫患儿中视觉障碍发生率与其他各组差异有显著统计学意义(P<0.01);(2)脑瘫患儿中内斜视发生者为16例32眼(37.2%),外斜视发生者为6例12眼(14.0%),垂直斜视发生者为2例4眼(4.7%)。痉挛性脑瘫中斜视最多见,发生者为13例26眼(30.2%),并都表现为内斜视,而肌张力低下型及其他型脑瘫容易并发外斜视;(3)在患屈光不正的脑瘫患儿中,远视为23例46眼(53.5%),近视为8例16眼(18.6%),散光为16例32眼(37.2%),屈光参差为14例28眼(32.6%);(4)脑瘫患儿VEP多表现为增幅下降,潜伏期延长,波形分化较差;其中痉挛性脑瘫VEP异常发生率高;(5)枕叶皮层受损和脑室周围白质软化( periventricular leukomalacia, PVL)伴发视觉障碍的发生率最高,PVL与枕叶皮层组发生率差别没有统计学意义(P>0.05),皮质损害脑瘫患儿无眼球震颤发生。结论：脑瘫患儿的视觉障碍在临床常见,各类型脑瘫患儿视觉障碍发生率有差别并有着不同临床特点;客观综合指标评估方法对脑瘫患儿视觉功能评估准确可靠。     

三氧化二砷对炎症细胞的影响及其分子机制

目的观察三氧化二砷(As2O3)对人T淋巴细胞和人树突状细胞(DCs)凋亡以及对树突状细胞表型、细胞因子分泌的影响,探索As2O3洗脱支架局部抗炎作用的有关机制。方法分离培养人T淋巴细胞,用rhGM-CSF和rhIL-4诱导单个核细胞分化为树突状细胞,流式细胞仪检测As2O3对T淋巴细胞和树突状细胞凋亡的影响;用LPS诱导树突状细胞分化成熟,流式细胞仪检测As2O3干预对树突状细胞成熟表型的影响,ELISA检测As2O3对树突状细胞分泌细胞因子的影响。结果 As2O3在1umol/L浓度时即可明显诱导人T淋巴细胞凋亡,在5umol/L浓度时可诱导树突状细胞凋亡,且均呈剂量依赖性;As2O3在低于凋亡诱导剂量时即可抑制LPS诱导的树突状细胞成熟,下调树突状细胞表面分子CD83和CD86的表达率,并减少树突状细胞IL-10、IL-12和IFN-γ等细胞因子的释放。结论 As2O3具有诱导T淋巴细胞、树突状细胞凋亡以及抑制树突状细胞的免疫成熟的作用,As2O3洗脱支架的局部抗炎作用和As2O3的上述作用有关。