中线非霍奇金恶性淋巴瘤组织中p53蛋白的表达

中线非霍奇金恶性淋巴瘤（Midlinenon－Hodgkln’sMalignantLymphoma，MNHL）是发生在上呼吸道，包括鼻腔、鼻窦、软硬胯、咽及喉等中线部位的一种结外型肿瘤，其发病原因不明。近年来的研究证实，P53基因突变是许多人类恶性肿瘤发展中常见的基因改变之一。人们发现P53基因的改变与头颈肿瘤的发展和预后有一定关系。我们应用ABC免疫组织化学染色检测MNHL组织中P53蛋白的表达情况，并探讨与MNHL的临床表现、细胞类型、临床分期及恶性程度的关系。1材料与方法1．在材料来源材料取自1991～1997年我院收治的MNHL患者的活俭样本20例，…     

人外周血CD4~+树突状细胞的纯化及鉴定

目的　建立人外周血树突状细胞 (dendriticcell,DC)的分离方法 ,观察其形态学和免疫组织化学特点 ,为下一步细胞融合提供DC来源。方法　以免疫磁珠分选法从人外周血单个核细胞中分离CD4 + DC ,流式细胞仪检测所得细胞的纯度 ,光镜、电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察其形态 ,SP免疫细胞化学方法检测DC的分子表达。结果　此纯化方法所得细胞纯度可达到 80 %以上 ,形态学观察可见纯化细胞具有典型的DC特征 ,该细胞能高表达HLA DR和S 10 0分子。结论　免疫磁法可获得较高纯度典型DC ,为进一步进行DC与肿瘤的融合实验及临床应用提供了可能     

固定剂、封片剂、温度及除菌方式对量子点标记细胞的影响

目的:观察不同固定剂、封片剂、温度及除菌方式对3种量子点标记小鼠腹腔巨噬细胞和正常皮肤的影响.方法:利用发射波长为610、 523和576 nm的3种量子点,以具有吞噬能力的小鼠腹腔巨噬细胞及正常皮肤为载体,观察不同的固定剂、封片剂、温度及除菌方式对量子点标记细胞及组织的影响.结果:3种量子点对小鼠腹腔巨噬细胞和皮肤组织没有明显的毒性,并且在6～72 h内保持荧光不衰减.高于56℃的温度会使量子点失去发射荧光的特性.较好的除菌方式为 60Co照射和微孔滤膜过滤.最稳定的封片剂为水溶性的ClearmountTM.吞噬了量子点523的巨噬细胞,可使用多种固定液固定.结论:不同波长量子点标记小鼠腹腔巨噬细胞和皮肤组织的效能受固定剂、封片剂、温度和除灭菌方式的影响.     

大鼠胰岛移植物制备与异种移植

增加胰岛收获量，提高胰岛纯度一直是胰岛移植中面临的重要问题，本实验经胰管注射胶原酶，胰静止消化分离成年大鼠胰岛纯度一直是胰岛葡聚糖离心纯化。纯化后胰岛收获量为６１０－８２０个／胰纯度达９２％；胰岛形态结构完整，内分泌细胞超微结构保持良好，对葡萄糖刺激反应胰岛素释放量是基本分泌水平的８倍；异种移植可逆转实验性糖尿病小鼠的高血糖达一周。     

小针刀对移植于裸鼠的人皮肤增生性瘢痕组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的影响

目的探讨小针刀对移植于裸鼠皮下人增生性瘢痕真皮组织Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的作用。方法将6例人无表皮的增生性瘢痕组织分别移植于24只裸鼠背部皮下,建立增生性瘢痕裸鼠动物模型。术后10天,分为对照组、0.1mg/ml曲安奈德组、0.2mg/ml曲安奈德组和小针刀组,每组6只,14天取材,利用免疫组织化学染色检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的变化。结果Ⅰ、Ⅲ型胶原分布于各组成纤维细胞的胞浆及组织中。图像分析结果,0.1mg/ml曲安奈德组和0.2mg/ml曲安奈德组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量（0.09±0.03,0.11±0.05;0.12±0.02,0.11±0.01）低于对照组（0.17±0.04,0.19±0.03）（P〈0.05）;小针刀组Ⅰ、Ⅲ型胶原含量（0.12±0.02,0.12±0.02）与曲安奈德组差异无显著性（P〉0.05）。结论小针刀可降低移植于裸鼠皮下增生性瘢痕真皮组织中Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白的含量。     

亚硒酸钠对大鼠胃癌形成和胰岛 B、D细胞的影响及机制

目的探讨亚硒酸钠对大鼠胃癌形成和胰岛B、D细胞的影响及机制.方法用MNNG(20 mg/kg)给大鼠灌胃,每天一次,连续10天,以诱导大鼠胃癌形成.用HE染色与AB-PAS染色方法观察硒对MNNG诱导Wistar大鼠胃癌形成的影响;用免疫组织化学SP法显示胰岛内胰岛素细胞(B细胞)、生长抑素细胞(D细胞),并对其结果进行图像分析和统计学处理.结果饮水中加入2 mg/L和4 mg/L的亚硒酸钠加重了胃粘膜的糜烂、出血,促进了胃粘膜的肠上皮化生,高硒组比实验对照组(P<0.01),出现了浆膜下平滑肌瘤,增加了平滑肌瘤的发生率.B细胞的面数密度(NA)各组之间没有显著性差异(P>0.05),但平均光密度(MOD)低硒组比正常对照组和实验对照组显著升高(P<0.01).D细胞的面数密度实验对照组和加硒各组比正常对照组显著降低(P<0.01),但是MOD值各组之间没有显著性差异(P>0.05).结论在MNNG所致胃癌的过程中,饮水中加入2 mg/L、4 mg/L亚硒酸钠不能降低大鼠胃癌的发生;其机制可能与亚硒酸钠的胰岛素模拟作用有关.     

硒对大鼠胃癌的作用及对其内分泌细胞的影响

目的　探讨硒在机体自然抗肿瘤发生过程中的作用。方法　给断乳雄性 Wistar大鼠 MNNG(N甲基 - N -硝基 - N亚硝胍 2 0 mg/kg)灌胃 ,每天一次 ,连续 1 0 d,以诱导大鼠胃粘膜异倍体形成 (大鼠胃癌模型形成 )。第 2 5wk时 ,用流式细胞仪测定硒对大鼠胃幽门粘膜异倍体形成的影响 ,用免疫组织化学 ABC法观察大鼠胃粘膜异倍体形成过程中 ,其胃的胃泌素细胞 (G细胞 )、生长抑素细胞 (SS细胞 )、5-羟色胺细胞 (5- HT细胞 )的免疫组织化学变化 ,并对以上结果进行定性、定位、定量分析以及统计学处理。结果　 1 .硒能抑制 MNNG所致大鼠胃粘膜细胞异倍体的形成。 2 .实验对照组与正常对照组比较 ,大鼠胃粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学反应明显增强 (P<0 .0 1 ) ,SS细胞、5- HT细胞也有增强的趋势 (P>0 .0 5)。 3.加硒各组与实验对照组比较 ,大鼠胃粘膜胃泌素细胞的免疫组织化学反应明显减弱 (P<0 .0 1 ) ,SS细胞、5- HT细胞也有减弱的趋势 (P>0 .0 5)。结论　内分泌细胞可能与 MNNG所致大鼠胃粘膜细胞异倍体的形成和发展有关 ;硒可能对大鼠胃内分泌细胞的功能有一定影响     

SARS患者脾内IL-6、IFN-β和IP-10的免疫组织化学观察及定量分析

目的 通过对严重急性呼吸综合征(SARS)患者脾内白细胞介素6(IL-6),干扰素β(IFN-β)和干扰素γ诱导蛋白10(IP-10)的免疫组织化学结果分析,深入探讨SARS患者脾组织的病理变化及其发病机制. 方法 通过免疫组织化学技术观察6例SARS死亡患者脾和6例意外死亡者正常脾组织细胞内IL-6、IFN-β和IP-10的表达情况,并进行图像分析.结果 SARS患者脾红髓内含大量IL-6阳性细胞,阳性产物呈团块状分布于细胞质和细胞核.图像分析结果显示,SARS患者脾红髓内IL-6阳性细胞的平均吸光度值(AA)与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.05);SARS患者脾红髓内阳性细胞的细胞核、细胞质呈IFN-β阳性,阳性产物呈棕黄色团块状,图像分析结果显示,SARS患者脾组织内IFN-β阳性细胞的AA值与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.05);SARS患者脾红髓内含大量IP-10阳性细胞,阳性产物呈棕黄色团块状,分布于细胞核和细胞质.图像分析结果显示,SARS患者脾组织内IP-10阳性细胞的AA值与正常对照组比较,有显著性差异(P<0.05).3种细胞因子在SARS患者残存的脾白髓内均呈阴性. 结论 SARS患者脾内细胞的IL-6、IFN-β和IP-10反应均相对增强,提示SARS患者脾组织的病理性损伤以及免疫功能缺陷可能与上述促炎症因子、免疫抑制因子及趋化因子的相对增多有关.     

新生小鼠骨骼肌卫星细胞在成肌过程中的形态学变化

背景:目前对于大鼠、恒河猴等骨骼肌卫星细胞的研究较多,但有关小鼠骨骼肌卫星细胞的研究报道较少。目的:观察体外培养的小鼠骨骼肌卫星细胞在成肌过程中的光电镜结构及免疫组织化学特性。设计:单一样本研究。单位:天津中医学院组织胚胎学教研室。材料:实验在北京大学基础医学院人体解剖学与组织胚胎学系唐军民导师研究室完成。新生5d昆明种小鼠5只,雌雄不限(购自北京大学医学部实验动物中心)。干预:分离新生小鼠骨骼肌卫星细胞,进行体外培养。在倒置显微镜下观察肌卫星细胞的成肌过程,并应用透射电镜及免疫细胞化学技术观察小鼠成肌细胞的超微结构及结构蛋白的分布。主要观察指标:①小鼠骨骼肌卫星细胞的分离纯化与原代培养的形态学观察。②免疫组织化学观察。结果:卫星细胞生长、分化良好,最终由单个核圆形细胞逐渐变化为多个核的长圆柱的肌管状细胞。免疫细胞化学技术显示,细胞呈α-肌动蛋白阳性。结论:采用两步消化法分离,得到的骨骼肌卫星细胞质量较好;且α-肌动蛋白对鉴定小鼠骨骼肌卫星细胞具有特异性。     

吗啡依赖及戒断后雄性大鼠前列腺组织的病理学研究

目的　观察吗啡依赖及戒断后大鼠前列腺的组织学变化。方法　皮下注射吗啡 ,建立吗啡依赖大鼠模型 ,戒断后制成戒断模型 ,实验后将前列腺组织作HE染色 ,光镜下观察。结果　吗啡依赖大鼠的前列腺组织与正常组相比明显萎缩 ,且短期戒断后这些改变仍然存在。结论　吗啡依赖可引起雄性大鼠前列腺组织萎缩