ｍｉＲ－１０３通过抑制ＦＢＷ７的表达促进肝癌细胞增殖

摘 要： 【目的】研究ｍｉＲ－１０３对肝癌细胞增殖功能的影响及其作用机制。【方法】Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ方法检测ｍｉＲ－１０３在肝癌组织和细胞中的表达。将ｍｉＲ－１０３ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ转染到肝癌细胞中,分为实验组（转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ）和对照组（转染Ｎｅｇａｔｉｖｅ Ｃｏｎｔｒｏｌ）,通过ＭＴＴ实验检测肝癌细胞的增殖变化。Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ检测转染ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ后肝癌细胞中ＦＢＷ７ ｍＲＮＡ和蛋白的表达变化。通过重荧光素酶报告基因实验检测转染ｍｉＲ－１０３ｍｉｍｉｃｓ 或ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ后ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ活性的变化。【结果】 Ｒｅａｌ ｔｉｍｅ ＰＣＲ结果显示ｍｉＲ－１０３在肝癌组织和ＨｅｐＧ２ 细胞系中均高于癌旁组织和ＬＯ２肝细胞系（Ｐ＜ ０．０５）。ＭＴＴ实验结果显示,转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ实验组肝癌细胞的存活细胞数低于对照组,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。 Ｒｅａｌｔｉｍｅ ＰＣＲ 和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ结果显示,转染ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ实验组肝癌细胞中ＦＢＷ７的ｍＲＮＡ和蛋白表达水平都低于对照组．重荧光素酶报告基因实验结果显示,与对照组相比,转染ｍｉＲ－１０３ｍｉｍｉｃｓ的实验组中ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ报告基因活性显著降低（Ｐ ＜ ０．０５）;与对照组相比,转染ｍｉＲ－１０３ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ的实验组中ＦＢＷ７－３’ＵＴＲ活性显著升高（Ｐ＜ ０．０５）。进一步实验发现,转染ＦＢＷ７后能显著下调由ｍｉＲ－１０３ ｍｉｍｉｃｓ所引起的细胞增殖作用。【结论】ｍｉＲ－１０３可以通过抑制ＦＢＷ７的表达来促进肝癌细胞增殖。     

ＩｇＡ肾病患儿血浆氧化应激水平及早期联用ＡＣＥＩ的影响

【目的】 研究ＩｇＡ肾病（ＩｇＡＮ）患儿血浆氧化应激水平的变化及其与临床病理的关系,探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ＡＣＥＩ）对ＩｇＡＮ患儿血浆氧化应激水平的影响。【方法】３８例ＩｇＡＮ患儿根据按临床表现分为３组：血尿蛋白尿（ＨＰ）组（１４例）,急性肾炎（ＡＧＮ）组（７例）,肾病综合征（ＮＳ）组（１７例）;按病理分级分为３组：病理Ⅲ级组（２２例）,病理Ⅳ级组（１０例）,病理Ⅴ级组（６例）;按初次就诊时是否曾接受激素和（或）免疫抑制剂治疗分为２组：初发组（２８例）,非初发组（１０例）;其中,初发组ＩｇＡＮ患儿根据是否早期联用ＡＣＥＩ治疗随机分为２组：ＡＣＥＩ组（１０例）和非ＡＣＥＩ组（１８例）。选取同期在我院体检的２０例健康儿童为对照组。分别采用Ｗｉｔｋｏ－Ｓａｒｓａｔ法、硫代巴比妥酸分光光度法和黄嘌呤氧化酶法检测病例组和对照组血浆晚期蛋白氧化产物（ＡＯＰＰ）、丙二醛（ＭＤＡ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）水平,并分析其与临床表现及病理改变的相关性。【结果】 ①与对照组相比,ＩｇＡＮ组血浆氧化应激水平明显升高,表现为ＡＯＰＰ和ＭＤＡ水平明显升高［ＡＯＰＰ：（９９ ± ２７） ｖｓ （５３ ± ２１）μｍｏｌ／ｍＬ,ＭＤＡ：（５．３ ± ２．１） ｖｓ （２．５ ± １．４） ｎｍｏｌ／ｍＬ,均Ｐ ＜ ０．０１］,ＳＯＤ水平明显下降［（６７ ± ２１） ｖｓ （９５ ± ２０）Ｕ／ｍＬ,Ｐ＜ ０．０１］。②血浆氧化应激水平在肾病综合征组和病理Ｖ级组最高,且与ＩｇＡＮ患儿的肾脏Ｋａｔａｆｕｃｈｉ评分密切相关。③与非ＡＣＥＩ组相比,ＡＣＥＩ组治疗后血浆氧化应激水平明显降低（Ｐ＜ ０．０５）。【结论】 ＩｇＡＮ患儿存在血浆氧化应激水平的升高,表现为血浆ＡＯＰＰ和ＭＤＡ水平升高,且血浆ＳＯＤ水平下降,氧化应激与ＩｇＡＮ患儿的进展及预后有关,早期联用ＡＣＥＩ治疗可以改善ＩｇＡＮ患儿血浆氧化应激水平。     

肝动脉灌注化疗联合热疗治疗肝门部胆管癌的临床价值

【目的】 初步评价肝动脉灌注化疗联合局部内生场热疗（热化疗）在肝门部胆管癌治疗的临床应用价值。【方法】对２００３年１０月至２０１３年６月期间３９例接受介入治疗的肝门部胆管癌病人进行回顾性研究,其中热化疗组２０例,于肝动脉置管,灌注吉西他滨后,再行肝动脉持续灌注卡铂及肿瘤区域内生场热疗６０ｍｉｎ,热化疗后连续肝动脉灌注５－Ｆｕ ３ ｄ,第８天静脉应用吉西他滨１次。对照组１９例,肝动脉置管及化疗方案同前,未行热疗。上述治疗每４周为１疗程。化疗期间观察化疗毒副反应、并发症及耐受性,随访期间的疗效评价以无肿瘤进展生存时间（ＰＦＳ）和生存时间（ＯＳ）为主要参考指标,并对两组的生存数据进行生存评估。【结果】热化疗组共行１０７个疗程治疗,ＯＳ为７．２～ ８５．８个月,中位ＯＳ为２３．７个月,ＰＦＳ为７．２～８０．３个月,中位ＰＦＳ为２０．３个月。对照组共行１００个疗程治疗,ＯＳ为６．０ ～ ２２．３个月,中位ＯＳ为１７．５个月,ＰＦＳ为３．５～ １９．５个月,中位ＰＦＳ为１４．２个月。经Ｌｏｇ－ｒａｎｋ检验显示热化疗在延长患者ＯＳ和ＰＦＳ与对照组的治疗有统计学差异（Ｐ ＜ ０．０５）。治疗期间两组均无严重的化疗毒副反应和并发症。【结论】肝动脉灌注化疗联合内生场热疗在治疗肝门部胆管癌具有安全、微创、耐受性良好的特点,有望成为一个新的辅助性治疗。     

ＵＲＳＡ患者蜕膜调节性Ｔ细胞Ｔｏｌｌ受体表达变化的临床意义

【目的】 检测ＵＲＳＡ患者蜕膜ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ Ｔｒｅｇ中ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、ＴＬＲ９的表达,探讨ＴＬＲｓ参与ＵＲＳＡ发生的免疫机制。 【方法】选择从２０１３年１月至２０１３年１１月就诊于广州市妇女儿童医疗中心妇产科的ＵＲＳＡ患者,其中Ｂ超确认胚胎已停育３０例为研究对象,同期选择３０例要求人工流产的计划外妊娠的正常早孕妇女为对照组（Ｃｏｎｔｒｏｌ）。收集ＵＲＳＡ患者、对照组清宫手术后的新鲜蜕膜组织,流式细胞仪检测两组蜕膜组织中ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈＴｒｅｇ 比例以及ＲＴ－ＰＣＲ、Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ方法比较蜕膜组织中ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ Ｔｒｅｇ 中ＴＬＲ２、ＴＬＲ４、ＴＬＲ９表达的差异。【结果】ＵＲＳＡ患者蜕膜ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ Ｔ细胞中ＴＬＲ４、ＴＬＲ９的表达在ｍＲＮＡ、蛋白水平均下调,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０１）,而ＴＬＲ２表达两组间差异无统计学意义（Ｐ＞ ０．０５）。ＵＲＳＡ患者蜕膜中ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ Ｔ细胞低于正常早孕妇女蜕膜（Ｐ ＜ ０．０１）,ＴＬＲ４、ＴＬＲ９的表达与ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈＴｒｅｇ细胞比例呈显著相关（Ｐ ＜ ０．０１,Ｐ ＜ ０．０５）。【结论】 ＵＲＳＡ患者蜕膜中的ＣＤ４＋ＣＤ２５ｈｉｇｈ Ｔｒｅｇ减少与ＴＬＲ４、ＴＬＲ９低表达相关,ＴＬＲｓ异常表达可能参与ＵＲＳＡ的发生。     

Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管在前置胎盘剖宫产术中的应用

【目的】 探讨Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管对前置胎盘剖宫产术中止血的治疗效果。【方法】 对２０１１年５月１日至２０１３年９月３０日在中山大学附属第三医院及岭南分院分娩的前置胎盘患者进行回顾分析,将剖宫产术中出血均大于５００ｍＬ者纳入研究,入组病例共７４例,按照是否应用Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管止血进行分组,应用Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管者（研究组）３４例,未应用Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管者（对照组）４０例,对两组患者的年龄、孕次、分娩周数、新生儿出生体质量、产后２４ｈ出血量、手术时间、术后白细胞及中性粒细胞、子宫切除情况进行对比分析,从而探讨Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管对前置胎盘剖宫产术中止血的治疗效果。将放置Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管后出血减少,无需采取其他治疗措施者定义为治疗成功。【结果】两组比较,患者年龄、孕次、分娩孕周、新生儿出生体质量、产后２４ｈ出血量及白细胞、中性粒细胞对比差异无统计学意义（Ｐ ＞ ０．０５）。研究组急诊手术１３例,手术时间５２．７９（３５ ～ ８５）ｍｉｎ;对照组５例,手术时间７４．３３（４０～ ３３０）ｍｉｎ,差异有统计学意义（Ｐ ＜ ０．０５）。研究组中２例放置Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管后因持续性阴道出血行介入子宫动脉栓塞术,治疗成功３２例,成功率为９４．１２％,无子宫切除病例,对照组中５例行子宫次全切除术,差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０５）。【结论】 Ｂａｋｒｉ子宫填塞球囊导管放置简单快速,可实时观察出血量,可以有效地控制前置胎盘剖宫产术中及产后出血,不增加产褥感染风险,可降低子宫切除率。     

大鼠脑慢性低灌注模型１８Ｆ－ＦＤＧ ＰＥＴ／ＣＴ显像及ＳＵＶｍａｘ值变化

【目的】 建立大鼠脑慢性低灌注模型,观察脑组织脱氧葡萄糖１８Ｆ （１８Ｆ－ＦＤＧ） ＰＥＴ／ＣＴ显像及最大标准化摄取值（ＳＵＶｍａｘ）变化情况。【方法】１６只２５０ ～ ３００ ｇ雌性ＳＤ大鼠通过一侧颈外静脉（ ＥＪＶ）和颈总动脉（ＣＣＡ）端侧吻合,同时夹闭双侧颈外动脉（ＥＣＡ） 及对侧横窦引流静脉建立慢性低灌注模型,在模型建立后２４ｈ,第７ 、３０和９０天 ４个时间点分别随机选择４只大鼠进行１８Ｆ－ＦＤＧ ＰＥＴ／ＣＴ扫描,４只体质量相仿的雌性大鼠作为正常对照,勾画双侧大脑中动脉（ＭＣＡ）供血区皮层感兴趣区（ＲＯＩ）,比较各组ＳＵＶｍａｘ变化及观察双侧大脑半球１８Ｆ－ＦＤＧ摄取是否均一。【结果】模型组大鼠术后２４ ｈ ＳＵＶｍａｘ升高,术后第７天明显降低,第３０天及９０天较第７天升高,但仍低于正常大鼠,组间比较差异有统计学意义（Ｐ＜ ０．０１）。模型组双侧大脑半球１８Ｆ －ＦＤＧ ＰＥＴ／ＣＴ显像及ＳＵＶｍａｘ在各扫描时间点无差别。 【结论】通过一侧ＥＪＶ和ＣＣＡ端侧吻合及双侧ＥＣＡ和对侧横窦引流静脉结扎建立的慢性大鼠低灌注模型,脑组织表现出对１８Ｆ－ＦＤＧ摄取的动态变化;模型建立对双侧大脑半球１８Ｆ－ＦＤＧ摄取影响一致。     

血清胱抑素Ｃ和尿ＮＧＡＬ联合检测在急性肾损伤病情评估及预后中的价值

摘要：【目的】评价血清胱抑素Ｃ（ＣｙｓＣ）及尿中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（ＮＧＡＬ）联合检测在急性肾功能损伤（ＡＫＩ）病情评估及预后中的临床价值及意义。【方法】选取２０１０年１月至２０１１年１２月我院住院收治的９０例ＡＫＩ患者（ＡＫＩ组）的血液标本,均符合ＡＫＩ诊断标准。根据ＡＫＩ分期标准分为ＡＫＩ１期组（３０例）、ＡＫＩ２期组（３０例）和ＡＫＩ３期组（３０例）,记录其血清ＣｙｓＣ、尿ＮＧＡＬ的变化,并对其进行ＡＰＡＣＨＥⅡ评分,分析ＣｙｓＣ及ＮＧＡＬ与ＡＰＡＣＨＥⅡ的相关性,评价两者联合检测在ＡＫＩ患者中的预后价值。【结果】与其它３组相比,ＡＫＩ３期患者血清ＣｙｓＣ及尿ＮＧＡＬ水平显著升高,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;ＡＫＩ患者血清ＣｙｓＣ、尿ＮＧＡＬ与ＡＰＡＣＨＥⅡ成明显线性相关（ｒ值分别为０．８７７、０．７１７,Ｐ＜０．０５）;ＡＫＩ患者死亡率为２８．８９％（２６／９０）,血清ＣｙｓＣ及尿ＮＧＡＬ水平随ＡＰＡＣＨＥⅡ评分增多而升高,存活组与死亡组之间比较差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）;高ＣｙｓＣ＋ＮＧＡＬ组ＡＰＡＣＨＥⅡ评分及病死率明显高于高ＣｙｓＣ及高ＮＧＡＬ组,差异有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。【结论】急性ＡＫＩ患者血清ＣｙｓＣ和尿ＮＧＡＬ均升高,血清ＣｙｓＣ及尿ＮＧＡＬ是反映ＡＫＩ较敏感的生物学标志物,可以作为评价ＡＫＩ患者病情和预后的指标。     

纳米ＴｉＯ２：Ｃ涂层对口腔常见细菌的抗菌效果观察

摘要：【目的】考察纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层的抗菌性能,为其在种植体周围炎防治中的应用奠定实验基础。【方法】制备ＴｉＯ２及ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层,根据贴膜法,每个样品做３个平行样,每个样品重复３次实验,检测其对不同口腔常见细菌的抗菌效果;通过Ｘ射线能谱仪检测牙龈卟啉单胞菌胞膜的离子种类并计算离子含量,从而分析探讨纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层的抗菌机理。【结果】本研究合成的纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层厚度均匀,对口腔常见细菌２０ｍｉｎ可见光催化抗菌率均达到９０％以上,具有良好的抗菌效果。Ｘ射线能谱显示牙龈卟啉单胞菌Ｎａ离子、Ｃａ离子含量随着光催化时间的延长而降低,而Ｐ元素变化趋势无规律。【结论】纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层对口腔细菌有很强的抗菌效果,改善了基体材料的抗菌性能。纳米ＴｉＯ２：Ｃ薄膜涂层的可见光催化抗菌机理之一可能为改变细胞膜的结构,影响细胞膜的通透性。     

ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５在未刺激多囊卵巢综合征卵巢组织中的异常表达

摘要：【目的】检测未经过促排卵刺激的ＰＣＯＳ患者和正常排卵妇女卵巢组织中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的蛋白表达水平以及比较两组之间的表达差异。【方法】收集未经过卵巢刺激的ＰＣＯＳ患者（ＰＣＯＳ组）和正常排卵妇女（对照组）的卵巢组织,采用免疫组织化学染色的方法检测卵母细胞和颗粒细胞中ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５的蛋白表达水平。【结果】ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５蛋白在未刺激卵母细胞和颗粒细胞中均有表达,并且呈现阶段依赖性。ＧＤＦ９蛋白在ＰＣＯＳ早期卵泡卵母细胞和颗粒细胞中的表达水平均低于对照组并且表达滞后（Ｐ＜０．０５）,ＢＭＰ１５蛋白在ＰＣＯＳ早期卵泡的颗粒细胞中也存在表达水平降低和滞后现象（Ｐ＜０．０５）,但是在ＰＣＯＳ卵母细胞中的表达与对照组没有差异（Ｐ＞０．０５）。【结论】ＧＤＦ９和ＢＭＰ１５蛋白在未刺激卵母细胞和颗粒细胞中均呈现阶段依赖性表达;两种因子在ＰＣＯＳ早期卵泡阶段存在表达水平降低并且滞后现象,提示可能与ＰＣＯＳ卵泡发育紊乱有关。     

海洛因成瘾患者的大脑白质结构网络的拓扑特性

【目的】 探讨海洛因成瘾患者的大脑白质结构网络的拓扑特性。【方法】 采集２０例海洛因成瘾者及１７例健康对照组的扩散张量成像和大脑高分辨率解剖结构像,利用纤维追踪技术和图论模型,构建了每个被试的大脑白质结构网络,计算大脑网络的拓扑特性。【结果】 在全局参数上,海洛因成瘾者的大脑网络的最短路径长度显著低于健康对照组,全局效率高于健康对照组（Ｐ ＜ ０．０５）;在节点参数上,海洛因成瘾者的节点效率显著增加 （Ｐ ＜ ０．０５）,这些显著增加的脑区主要分布在控制系统和感觉运动系统。【结论】 海洛因成瘾患者的大脑结构网络的拓扑属性发生了显著改变。利用图论的方法可以便于我们探测海洛因成瘾所致的大脑结构网络变化,为探索成瘾所致的大脑连接的变化提供了一个有效的工具。