青岛市城市道路保洁作业质量影响因素调查研究

为了提高青岛市城市道路保洁精细化水平和城市洁净度,以道路尘土量为评价指标,对工具设备配置、清扫保洁作业模式、人行道铺设模式、考核管理方法等道路保洁作业质量影响因素进行了分析。结果表明:人行道铺设模式对保洁作业效果有较大影响;工具设备配置及作业应规范化;建议推广"机扫+洒水+冲洗+人工清扫"保洁作业模式。     

细粒棘球绦虫EgM123蛋白融合霍乱毒素B亚单位疫苗的构建表达及免疫原性研究

目的 构建和表达细粒棘球绦虫成虫特异表达EgM123基因与霍乱毒素B的融合蛋白(CTB-EgM123);并确定CTB-EgM123蛋白的抗原性。方法 将合成EgM123基因序列连接到pET28a/CTB原核表达载体中,并转化至大肠杆菌BL21中。利用IPTG诱导目的基因的表达;用SDS-PAGE及Western-Blotting对表达蛋白进行分析和鉴定;用纯化蛋白免疫小鼠及犬,用ELISA方法对小鼠及犬的血清抗体效价和肠黏液的抗体亚类进行分析。结果 PCR和测序确定CTB-EgM123基因片段长度为804 bp,pET28a/CTB-EgM123原核表达阅读框序列正确。在37 ℃条件下,经IPTG 0.4 mmol/L诱导5 h,获得CTB-EgM123高表达的包涵体蛋白,分子质量为37 kDa。免疫小鼠结果表明复性CTB-EgM123蛋白具较好免疫原性,抗体效价> 320 000;以IgG2a为主。检测免疫犬血清效价,结果发现用融合蛋白免疫后的犬血清抗体效价> 64 000,效价高于EgM123免疫组(t=0.0064,P< 0.05);且在4周时,抗体呈上升趋势,并能较长时间维持抗体水平。结论 原核表达载体pET28a/CTB-EgM123在大肠杆菌中成功表达,纯化蛋白接种小鼠和犬表明具有高的抗原性。表明CTB可以增强蛋白的免疫原性,并刺激小鼠和犬体内产生高水平的体液和黏膜免疫。本研究为研发犬用包虫病疫苗奠定了基础。     

新疆新源县多房棘球蚴病病例特征及其病原基因多态性分析

目的 了解新疆新源县人群多房棘球蚴病(AE)病例特征及其病原基因多态性情况，为制定AE预防控制策略提供参考。方法 收集2016—2020年新疆医科大学第一附属医院生物样品库中新源县AE患者的病例信息及其手术切除的肝脏病灶样品，提取肝脏病灶样品基因组DNA,PCR扩增线粒体NADH脱氢酶2(nad2)基因并测序，PCR产物经测序剪接后进行BLAST比对，用MEGA10.0软件采用邻接法构建系统进化树，DnaSPv5软件分析扩增序列的基因型，Network10.0软件制作nad2基因型网络图。结果 共收集AE病例28例，其中农区7例，巩乃斯河两岸流域21例；男性17例，女性11例，二者差异无统计学意义(χ~2=0.704,P>0.05)；民族分布中，汉族12例、哈萨克族11例、维吾尔族3例、蒙古族1例、其他民族1例；职业分布中以农牧民为主，占92.86%(26/28)，其他职业仅占7.14%(2/28)，不同职业间病例数差异有统计学意义(χ~2=3.89,P<0.05)；年龄分布中以20～49岁年龄组为主，占78.57%(22/28)，其他年龄组占21.43%(6/28)，不同...     

细粒棘球绦虫分泌抗原B调控Th17/Treg抑制过敏性哮喘的研究北大核心CSCD

目的探讨细粒棘球蚴分泌抗原B(EgAgB)对过敏性哮喘的抑制作用及其机制。方法将32只小鼠随机分为4组(每组8只),其中A组为高剂量干预组(HAgB:20μg EgAgB+OVA),B组为低剂量干预组(LAgB:2μg EgAgB+OVA),C组为过敏性哮喘组(OVA),D组为PBS对照组。采用ELISA法检测小鼠抗体水平;HE、PAS组织染色检测小鼠肺组织病理变化及黏蛋白分泌水平;利用流式细胞术分析肺脏和脾脏组织中淋巴细胞的分群及活化比例。结果 EgAgB免疫小鼠血IgG、IgM和IgG2b抗体水平显著高于PBS对照组(D组)(P<0.01),IgG1、IgG2a和IgE水平与PBS对照组(D组)相比差异无统计学意义(均P>0.05);HE、PAS染色显示,EgAgB接种组与C组相比能够显著抑制小鼠气道炎症及气道粘液的分泌(均P<0.01);流式细胞术检测显示,免疫高剂量EgAgB组小鼠肺组织及脾脏组织嗜酸性粒细胞和Th17的数量显著减少(均P<0.01),Treg数量显著增多(P<0.01)。结论 EgAgB能够通过调节宿主免疫平衡抑制过敏性哮喘,可作为防治自身免疫性疾病和过敏性疾病的候选小分子蛋白。     

细粒棘球绦虫抗原B对免疫性血小板减少症小鼠模型免疫调节作用的初步研究北大核心CSCD

目的探讨细粒棘球绦虫(Echinococcus granulosus sensu stricto,E.granulosus s.s.)囊液自然抗原B(natural antigen B,nAgB)对免疫性血小板减少症(Immune thrombocytopenia,ITP)的调节作用。方法50只8~10周龄Balb/C雌性小鼠随机分5组,每组10只进行腹腔注射实验:I组:PBS处理组即空白对照组;II组:大鼠抗小鼠CD41单克隆抗体(anti-CD41 Ab)免疫组即ITP模型组;III组:nAgB对照组;IV组:nAgB连续免疫5 d后给予anti-CD41 Ab免疫组即nAgB+ITP组;V组:在anti-CD41 Ab免疫建立和维持ITP模型基础上,注射nAgB组即ITP+nAgB组。观察各组血小板(PLT)指标的变化。结果小鼠干预前血PLT计数均为(749.86±84.61)×10^(9)/L。II组和V组给予anti-CD41 Ab 2 d后分别与干预前比较差异均有统计学意义(t=31.299,t=20.955,均P<0.001),ITP建模成功。II组建模成功后与IV组PLT计数比较差异有统计学意义(t=7.493,P<0.001)。II组建模成功后第2 d与V组PLT计数比较差异有统计学意义(t=10.829,P<0.001)。II组建模成功后平均血小板体积(MPV)数值和血小板压积(PCT)数值分别与I组MPV数值和PCT数值比较差异有统计学意义(t=9.615,P<0.001;t=28.698,P<0.001)。结论AgB对免疫损伤所致ITP具有预防及治疗作用。     

青岛市生活垃圾物理特性分析及变化趋势研究

通过对青岛市生活垃圾组分、密度、含水率、发热量等物理特性的分析,得出2009年青岛市生活垃圾物理特性的数据;并对比15 a历史数据预测未来5 a青岛市生活垃圾物理特性的变化趋势.     

细粒棘球蚴感染对小鼠炎症性肠病的保护机制研究

目的 观察细粒棘球蚴感染对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠炎症性肠病(IBD)症状的保护作用及可能机制。方法 建立继发性细粒棘球蚴感染小鼠模型,再给予DSS诱导IBD症状,解剖后ELISA法检测小鼠血清中囊液抗原水平,并观察腹腔内的包囊;根据每日体重监测、解剖后结肠长度测量及结肠组织病理学评分指标评估细粒棘球蚴感染对炎症性肠病的保护作用;采用流式细胞术CBA法检测模型鼠血清中Thl/Th2/Thl7水平,评价细胞因子对炎症性肠病的保护作用。结果 小鼠感染细粒棘球蚴后血清HCF抗体阳性率与成囊率均为100%。细粒棘球蚴感染减轻了DSS引起的小鼠体重下降程度;结肠变短程度减小,HE染色检查小鼠结肠组织炎性症状显著改善。CBA检测显示细粒棘球蚴感染小鼠血清IL-4、IL-10、IL-17A、IL-6、IFNγ含量均较正常小鼠显著增加,表现为Th2为主的免疫反应;细粒棘球蚴感染合并IBD模型组小鼠Th2/Th1型细胞因子比率同IBD组相比显著升高。结论 细粒棘球蚴感染IBD模型小鼠血清IL-4、IL-10水平升高,Th2高水平状态削弱了DSS引发的Th1反应,表明细粒棘球蚴感染可改善IBD小鼠...     

细粒棘球绦虫表面抗原EpC1的生物信息学分析北大核心CSCD

目的采用生物信息学方法分析细粒棘球绦虫表面抗原EpC1的结构和功能等。方法从NCBI数据库中下载EpC1氨基酸序列,采用ProtParam预测蛋白的理化性质,SignalP-5预测信号肽,Euk-mPLoc 2.0进行亚细胞定位,ProtScale、SOSUI、DNASTAR预测其亲疏水性,SOMPA预测二级结构,NetPhos预测磷酸化位点,MotifScan预测修饰位点,Swissmodel预测三级结构,TMHMM分析跨膜区域;运用ABCpred、IEDB预测B细胞抗原表位,SYFPEITHI预测T细胞抗原表位。结果预测EpC1由174氨基酸序列组成,分子式为C_(884)H_(1403)N_(245)O_(268)S_(9),不稳定指数为46.27,为亲水蛋白,无信号肽和无跨膜区,且定位于细胞膜及细胞质中。二级结构中α螺旋占44.25%,β折叠占14.94%,β转角占5.75%,无规则卷曲占35.06%,EgEpC1具有能与HLA-A*02-01的结合能力,且能被HLA-DRB*0401(DR4Dw4)分子呈递。结论生物信息技术分析EpC1蛋白存在多个B、T细胞表位,含有钙结合结构域,可为该蛋白的基因克隆表达及细粒棘球绦虫感染的防治研究提供理论基础。     

细粒棘球蚴抗原B对小鼠巨噬细胞RAW264.7的极化作用

目的探讨细粒棘球蚴抗原B (AgB)对巨噬细胞极化的调控作用。方法将RAW264.7巨噬细胞培养24 h后，分为M1、 M2、 AgB、 AgB+M1、 AgB+M2和空白对照组（M0组），每组3孔。待所有巨噬细胞贴壁3 h后，AgB、 AgB+M1、 AgB+M2组均加入羊源细粒棘球蚴囊液提取的天然AgB （终浓度为1 000 ng/ml），刺激1 h后，M1组和AgB+M1组加入脂多糖（LPS，终浓度为100 ng/ml）和γ干扰素（IFN-γ，终浓度为20 ng/ml）刺激分化20 h;M2组和AgB+M2组加入白细胞介素4 (IL-4)、IL-13 （终浓度均为20 ng/ml）刺激分化20 h；空白对照组不更换培养液，同步培养20 h。显微镜下观察巨噬细胞形态。提取各组巨噬细胞总RNA, RT-PCR检测刺激后巨噬细胞表面标志物精氨酸酶1 (Arg-1)、肿瘤坏死因子α (TNF-α)的mRNA相对转录水平；蛋白质免疫印迹（Western blotting）分析巨噬细胞蛋白Arg-1、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的相对表达量；ELISA检测刺激后巨噬细胞培养上清中IL-10...     

胚胎干细胞发育相关基因PLK1在细粒棘球绦虫体外不同发育时期差异表达研究

目的 探究PLK1基因在细粒棘球绦虫不同发育时期的表达情况。方法 体外培养细粒棘球绦虫原头蚴在犬胆汁刺激下向成虫方向发育，收集不同发育时期的虫体，通过免疫组化定位PLK1基因的表达。光学显微镜下切割分离成虫头节和后颈节段，收集样本运用荧光定量qPCR量化PLK1基因在虫体不同发育时期或不同部位的表达量水平，用SPSS 26.0软件进行单因素方差分析。结果 成功建立了细粒棘球绦虫原头蚴向成虫方向发育的体外培养模型，体外培养的虫体56 d获得4个节片；PLK1基因在细粒棘球绦虫包囊生发层中高表达量。虽然在成虫和原头蚴表达较低，但免疫组化显示在原头蚴吸盘的底部和成虫头节的下部链体延长区域的表达高于其他部位(F=14.87,P<0.05)。结论 细粒棘球绦虫干细胞相关基因PLK1的表达明显位于生发层细胞和激活原头蚴的头节底部以及链体增长区域，PLK1是棘球绦虫成虫发育干细胞区域的高表达基因。