舒适护理模式在疫苗接种中满意度的影价值分析

目的分析疫苗接种过程中采取舒适护理模式对家属满意度的影响。方法用"数字随机表分组法"将200名疫苗接种小儿分为100例/组。对照组、观察组分别采取常规护理模式、舒适护理模式。对比依从性、不良反应及家长满意度。结果对比发现,观察组获得的接种依从性(92.00%)、家长满意度(98.00%)更高,不良反应总发生率更低,为8.00%(P0.05)。结论在疫苗接种期间,实施舒适护理模式,可以在很大程度上减少接种不良反应,提高依从性和家属的满意度。     

HIV-1广谱中和活性样本膜蛋白基因序列特征分析

目的分析广谱中和活性感染者不同时间点HIV-1膜蛋白基因的序列特征。方法应用单拷贝基因组扩增技术(Single genome amplification,SGA)扩增获得不同时间点样本的全长膜蛋白(Env)基因,分析Env基因可变区序列长度、糖基化位点数目、细胞嗜性及中和表位关键氨基酸的变异。结果系统进化分析显示在5个不同时间点获得的98条全长Env基因为HIV-1 B’亚型毒株;毒株序列随时间推移基因距离增加,V1V2区序列长度变化大于V4区,V3区与V5区序列长度保持恒定;Env基因共享序列有27个潜在糖基化位点(PNGS),V1V2区的糖基化位点数目变化较大,MPER区次之,V3区数目恒定;部分毒株嗜性随时间推移发生了从CCR5到CXCR4的转变;Env基因与广谱中和活性相关的特征氨基酸位点的突变率在4.76%~100.00%间。结论广谱中和活性感染者不同时间点的Env基因序列差异随时间推移而增加,中和单抗识别的关键位点氨基酸存在不同类型和不同程度的突变,表明广谱中和活性感染者体内毒株在免疫压力下持续进化。     

HIV-1广谱中和活性感染者假病毒的中和表型分析

目的分析HIV-1广谱中和活性感染者基于膜蛋白基因(env)的假病毒对自体血浆和代表性广谱单克隆中和抗体(bm NAbs)的中和表型。方法单基因组扩增(SGA)广谱中和活性感染者第0月血浆的env基因并克隆至pc D-NA~(TM)3.1 Directional TOPO表达载体,将env表达质粒与HIV-1骨架质粒p SG3△env共转染293T/17细胞制备假病毒,用假病毒分别与自体连续时间点血浆和代表性bm NAbs进行中和实验分析中和表型。结果共获得11株功能性假病毒,假病毒对8个连续时间点自体血浆的中和敏感性呈现先升高(第0~15月),后下降(第16~32月),之后再上升(第33~45月)的波动。所有假病毒对10E8、PGT121和VRC01中和敏感(IC_(50)6μg/m L);各有18.2%(2株)的假病毒对12A21和2G12高度敏感(IC_(50)1μg/m L);所有病毒均对PGT135呈中和抗性。结论假病毒对当前时间点血浆的中和敏感性低,对之后时间点血浆中和敏感性增强,提示感染者体内病毒与中和抗体的动态进化过程。同一时间点假病毒对特定bm-NAbs的敏感性差异明显,提示感染者准种毒株间中和表型的复杂性。     

昆明市静脉吸毒感染者HIV-1env基因C2-V4区序列特征分析

目的 分析昆明市静脉吸毒（intravenous drug user,IDU）感染者艾滋病病毒1型（human immunodeficiency virus type 1,HIV-1） env基因C2-V4区序列特征及代表性广谱单克隆中和抗体（broadly monoclonal neutralizing antibodies,bmNAbs）的表位变异。方法 在昆明市收集165份IDUHIV-1感染者血浆样品,提取RNA,通过逆转录得到cDNA,巢式聚合酶链反应（nested-polymerase chain reaction,nested-PCR）扩增HIV-1膜蛋白基因C2-V4区,应用BioEdit和MEGA等生物信息软件分析所获得序列的特征,并分析2G12、PGT135、PGT128、b12和VRC01等bmNAbs的表位变异。结果 165条序列主要为CRF08_BC （74.55%）和CRF07_BC （23.03%）重组毒株,各可变环变异程度由小到大为V3区 < C3区 < V4区,并且CRF08_BC样本的C2-C4、V3区、C3区和V4区基因离散率分别大于CRF_07BC的相应区域;V3环顶端四肽存在5种类型：GPGQ （95.76%）、GPGR （1.82%）、GPRQ （1.21%）、GPGL （0.61%）和RPGQ （0.61%）;辅助受体主要为CCR5（97.58%）。90%以上的CRF08_BC和CRF07_BC重组毒株存在与2G12识别相关的糖基化位点的缺失;而b12、VRC01、PGT135和PGT128等抗体识别的位点在CRF08_BC和CRF07_BC重组毒株中的变异率低。结论 CRF08_BC和CRF07_BC为昆明市IDU感染者的主要流行毒株;CRF08_BC基因离散率高于CRF07_BC毒株;V3区序列变异程度小于C3区及V4区;2G12、PGT135、PGT128、b12和VRC01等代表性bmNAbs表位在CRF08_BC和CRF07_BC毒株存在不同程度的变异。