PFGE与MLVA在福建地区肠炎沙门菌分子分型中的应用与评价北大核心CSCD

目的比较和评价脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)和多位点可变数目串联重复序列分析技术(MLVA)在福建地区肠炎沙门菌分子分型中的应用价值。方法采用PFGE和MLVA技术对福建地区88株肠炎沙门菌分离株进行分子分型,结合流行病学资料分析比较分型效果。结果88株肠炎沙门菌经PFGE分型后,相似度系数为43.9%~100.0%,得到46个PFGE型别(PT 0001~PT 0046)、2个优势型别簇(cluster A~B),分辨系数(D值)为0.9459。PT 0002、PT 0011、PT 0013和PT 0029为优势PFGE;经MLVA分型后,遗传关联度介于26.8%~100%之间,得到40个MLVA型别(MT 0001~MT 0040)、2个优势基因簇(cluster 1~2),分辨系数(D值)为0.9235。MT 0005、MT 0004和MT 0014为优势MLVA型别。结论PFGE分辨力略高,与流行病学背景资料更吻合;MLVA在分析菌株之间亲缘关系和遗传相关性方面更具优势。     

2005—2018年福建省人感染猪链球菌分离株特征分析

目的 探讨2005—2018年福建省分离到的猪链球菌的分子流行病学特征。方法 通过对2005—2018年疫情分离的猪链球菌菌株进行相关常规分离培养、生化鉴定及药物敏感实验、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry, MALDI-TOF MS）及聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测猪链球菌相关的16S rRNA基因和部分毒力基因荚膜多糖（capsularpolysaccharide2J,cps2J）、溶菌酶释放蛋白（muramidase-releasedprotein,mrp）、溶血素（suilysin,sly）、胞外因子（extracellular protein factor,ef），同时检测猪链球菌7个管家基因（aro A、cpn60、dpr、gki、mut S、rec A、thr A）分析菌株相关的多位点序列分型（multilocus sequence typing, MLST）型别。结果 10株菌株经...     

提高犬交感神经相关房颤模型建模成功率的新方法

目的对传统实验过程中犬的星状神经节暴露的方法进行改良,建立一种新的暴露犬星状神经节方法,提高交感神经相关房颤模型建模的成功率。方法成年犬28只,随机分为传统组和改良组,每组14只,分别使用传统和改良后的方法分离暴露星状神经节。28只犬均建立交感神经相关房颤模型。术中记录犬生命体征变化和术中生存率,记录刺激星状神经节所需电压,记录刺激前、后心脏电生理的变化。免疫组化检测神经递质释放情况。结果改良组术中存活率较传统组术中存活率显著升高,P0.05。改良组手术时间较传统组明显缩短,P0.05。刺激改良组神经达到阈值所需电压较传统组更小,P0.05。结论改良后的手术方法能够有效的降低犬在手术过程中的死亡率,明显缩短手术时间,减少术中出血量,星状神经节结构更完整,持续刺激过程中所需电压更稳定,更适合用于建立交感神经相关房颤模型。     

特勒凯比尔沙门菌临床血流分离株的毒力研究

目的 构建ICR小鼠感染模型研究特勒凯比尔血清型沙门菌的致病力,对小鼠分离株进行病原学鉴定。方法 通过感染小鼠临床症状、组织病理学、组织细菌载量等的变化,观察排菌周期,评价该血清型沙门菌对小鼠的致病性,计算小鼠LD₅₀;通过飞行质谱、生化鉴定、血清型鉴定、分子分型等实验,与人分离株进行比对;通过PCR实验、全基因组测序等进行毒力基因分析。结果 特勒凯比尔沙门菌LD₅₀为2.67×10⁸ CFU/mL;感染后0.5 h即可出现临床症状,卷缩、被毛松乱;死亡小鼠解剖发现小肠充血严重,可见较多气泡、积液,盲肠坏死,肝尖点状变性坏死,肾脏表面有坏死灶,脾脏萎缩;小鼠脾脏、肾脏、肺脏、肝脏、空肠细菌载量感染后3 d达到高峰,而心脏第6 d达高峰;高剂量组排菌时间超100 d;组织中CD3含量随剂量增加呈递增状态,炎细胞浸润,心肌毛细血管扩张充血,肝细胞大面积空泡、变性坏死,脾窦扩张明显,分区模糊,肾小球基膜增厚,纤毛上皮部分剥脱,空肠绒毛萎缩、脱落;PCR及全基因组测序发现具有cdtB、pltA、pltB等沙门菌相关毒力基因。结论...     

福建省首次自临床血流感染病例检出特勒凯比尔沙门菌

目的 研究福建省首次报道自临床疑似脓毒血症患者血液检出特勒凯比尔沙门菌的生物表型和流行病学特征。方法 通过纯化菌株的系统生化、飞行质谱和标准化血清识别程序进行表型鉴定和耐药性测试,并对患者临床病史进行回顾性流行病学调查和分析。结果 本次临床血流感染的病原菌符合特勒凯比尔沙门菌定义,经沙门菌血清型数据库比对为国内首次发现的沙门菌血清型,对所有测试抗生素均敏感。结论 福建省沙门菌血清型比较复杂,应引起临床和公共卫生部门的重视。     

福建地区鼠伤寒沙门菌喹诺酮耐药基因特征及MLVA分子分型北大核心CSCD

目的了解福建地区鼠伤寒沙门菌喹诺酮耐药状况及其分子分型机制。方法采用微量肉汤稀释法测定萘啶酸、环丙沙星和左氧氟沙星对83株鼠伤寒沙门菌的最小抑菌浓度(MIC);PCR扩增沙门菌的喹诺酮耐药区(QRDR)基因(gyrA,parC)和质粒介导的喹诺酮耐药基因(PMQR)(aac(6’)-Ib-cr,oqxA,oqxB);采用多位点可变数目串联重复序列分析(MLVA)比较菌株间的遗传相似性。结果 83株鼠伤寒沙门菌对萘啶酸、环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为27.7%(23/83),13.2%(11/83)和4.8%(4/83),QRDR基因突变率为25.3%(21/83)。21株基因突变株存在gyrA和parC两个突变类型,突变氨基酸类型分别为Ser83Tyr、Ser83Phe、Asp87Tyr和Asp87Asn,其中以第87位氨基酸突变为主,占总突变数的52.4%(11/21)。parC基因突变菌1株,为第80位氨基酸突变Ser80Arg,该菌株同时为gyrA:Ser83Phe突变。PMQR基因(aac(6’)-Ib-cr,oqxA,oqxB)在83株鼠伤寒沙门菌中的检出率分别为20.5%(17/83)、15.7%(13/83)和16.9%(14/83)。72株鼠伤寒沙门菌经MLVA分型后遗传关联度介于42.3%~100%之间,按照100%的相似度可分为18个型别,其中次优势型MT5菌株耐药基因与MLVA分型表现出一定的关联性。结论福建地区鼠伤寒沙门菌对喹诺酮类药物的耐药率不高,但环丙沙星和左氧氟沙星中度敏感菌中存在耐药基因突变,并具有一定的聚集性,需继续加强检测。     

福建省沙门菌毒力基因sitC及iroN分布特征分析

目的 比较福建省腹泻患者与健康人群分离的沙门菌毒力基因sitC及iroN分布特征;同时分析两种毒力基因在福建省分离率较高的4种常见血清型沙门菌中的分布差异,为进一步有效防控沙门菌病提供依据。方法 选择福建省从腹泻患者和健康人群中分离到的沙门菌166株,其中腹泻患者121株、健康人群45株,包括鼠伤寒、肠炎、德尔卑和斯坦利四种血清型,运用常规PCR方法扩增毒力基因sitC及iroN。结果 毒力基因sitC及iroN在166株沙门菌分离株中的总检出率分别为51.81%(86株)和39.76%(66株)。在腹泻患者和健康人群两个组别中,sitC及iroN的检出率差异无统计学意义(χsitC2=0.347,P=0.556;χiroN2=3.322,P=0.068)。在鼠伤寒、肠炎、德尔卑和斯坦利四种血清型中,sitC及iroN的检出率差异有统计学意义(χsitC2=11.634,P=0.009;χiroN2=15.020,P=0.002)。sitC+iroN+及sitC-iroN-是最常见的基因携带模式。结论 福建省沙门菌分离株中均检出了一定比例的sitC和iroN毒力基因。这两个毒力基因的分布存在血清型差异,但在健康人群和腹泻病人的沙门菌分离株中不存在分布差异。所以健康人群的沙门菌分离株与腹泻病人的沙门菌分离株一样都具有较强的生存能力和一定的致病潜能。     

青蒿琥酯对多囊卵巢综合征模型大鼠卵巢组织形态的影响

目的 基于p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 MAPK）/核因子-κB(NF-κB)信号通路探究青蒿琥酯（ART）对多囊卵巢综合征（PCOS）模型大鼠卵巢组织形态的影响。方法 对雌性SD大鼠皮下注射经过注射油剂稀释的脱氢表雄酮（1次/d）,连续28 d,建立PCOS大鼠模型。造模成功的120只大鼠随机分为PCOS组、达英-35组、ART低剂量（25 mg/kg,ART-L）组、ART高剂量（50 mg/kg,ART-H）组、ART-H+p38 MAPK特异性激活剂茴香霉素（anisomycin）组,每组24只;另选取24只大鼠皮下注射等量生理盐水作为正常组。达英-35组、ART-L组、ART-H组、ART-H+anisomycin组大鼠连续28 d给予相应药物,正常组给予与PCOS组大鼠等量生理盐水,1次/d。吉姆萨染色观察大鼠动情周期阴道细胞形态;全自动生化分析仪检测大鼠空腹血糖（FPG）水平;酶联免疫吸附试验检测大鼠血清空腹胰岛素（FINS）、卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）、雌二醇（E2）、睾酮（T）、白细胞介素（IL）-18、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-1β水平,...