二硫化碳对大鼠睾丸组织细胞凋亡线粒体通路的影响及环孢素A的干预作用

[目的]研究二硫化碳(carbon disulfide,CS2)对大鼠睾丸生殖细胞凋亡线粒体通路的影响及其可能的分子机制,同时观察环孢素A(cyclosporin A,Cs A)对细胞凋亡的干预作用。[方法]选取清洁级雄性SD大鼠48只并随机分为6组:对照组、3个CS2染毒组(50、250、1 250 mg/m3)、干预组[CS2(1 250 mg/m3)+Cs A(12.5 mg/kg)]和Cs A(12.5 mg/kg)组。静式吸入染毒,每天2 h,每周5 d,共10周,对照组仅吸入新鲜空气,Cs A则依据大鼠体重并按相应比例先溶解在牛奶中然后灌胃。染毒结束后取睾丸组织做HE染色,观察其形态学改变;TUNEL荧光法检测大鼠睾丸组织细胞凋亡情况;Western Blot法检测各组细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸天冬氨酸酶原9(Procaspase-9)、Procaspase-3、Bcl-x L抗凋亡和促凋亡蛋白Bad的表达含量。[结果]随着CS2染毒浓度的增加,HE染色大鼠睾丸组织形态损伤情况不断加剧,中、高浓度组的凋亡指数高于对照组(P<0.05),Cs A干预对大鼠睾丸组织形态损伤有一定缓解;与高浓度CS2染毒组相比,干预组的凋亡指数明显下降(P<0.05),但仍高于Cs A组(P<0.05)。CS2染毒组Cyt C、Bad蛋白含量与对照组比较有所增加,而Procaspase-9、Procaspase-3和Bcl-x L蛋白含量则有下降的趋势(P<0.05)。Cs A干预后与高浓度CS2染毒组比较,干预组Cyt C蛋白含量下降(P<0.05),Bcl-x L蛋白含量则提高(P<0.05);Procaspase-9、Procaspase-3和Bad蛋白含量均有不同程度的变化,但与CS2高浓度组相比差异无统计学意义。[结论]CS2染毒可影响细胞凋亡线粒体通路继而诱导大鼠睾丸生殖细胞凋亡,而细胞凋亡线粒体通路相关蛋白的表达可能与Cs A的干预有关。     

二硫化碳对大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡线粒体途径相关基因表达的影响

[目的]研究二硫化碳（carbondisulfide,CS：）染毒对大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡线粒体途径相关基因表达的影响。[方法]选用22～24d龄清洁级雄性SD大鼠,建立睾丸生精-支持细胞体外共培养体系,将细胞分为4组：1个对照组和3个不同浓度csz染毒组（1、2、4μmol／mL）,提取RNA,应用荧光实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测Cyto C、 Apaf-1、Caspase-3、Caspase-9、Aif、EndoG、Smac、IAPS、 Bax、 Bcl-2 mRNA表达水平。[结果]大鼠睾丸支持一生精共培养细胞中,CS2染毒可导致CytoC、Smac、IAPS、Caspase-3、BaxmRNA的表达水平和Bax／Bcl-2mRNA表达水平值均明显升高（P〈0．05）,同时使Apaf-1、Aif、Bcl-2和EndoGmRNA的表达水平明显下降（P〈0．05）。[结论]CS2染毒可影响大鼠睾丸支持-生精共培养细胞凋亡线粒体途径相关基因的表达,并且这一机制与CS2导致生殖损伤相关。     

CS_2吸入染毒对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴超微结构的影响及NO干预作用

[目的]探讨二硫化碳（CS2）对雄性大鼠下丘脑-垂体-性腺轴超微结构的影响及一氧化氮（NO）的干预作用。[方法]将24只雄性SD大鼠按体重随机分为4组：对照组、CS2染毒组、硝普钠（sodium nitroprusside,SNP）干预组和N-甲基-L-精氨酸（L-NMMA）干预组。除对照组外,其余3组均以1250mg/m3CS2进行静式吸入染毒,2h/d,5d/周,共10周,SNP和L-NMMA干预组在动物染毒结束前10d开始分别腹腔注射SNP（5mg/kg）和L-NMMA（2mg/kg）,1次/d。染毒结束后,取下丘脑、垂体和睾丸组织,利用透射电子显微镜观察组织超微结构的改变。[结果]CS2染毒可造成下丘脑神经元、垂体促性腺激素细胞、生长激素细胞和睾丸支持细胞线粒体肿胀,内质网扩张,SNP对CS2引起的下丘脑、垂体、睾丸组织的损伤具有拮抗作用,而L-NMMA则进一步导致病变的发生。[结论]CS2可造成下丘脑、垂体和睾丸组织超微结构的改变,NO在此过程中发挥重要作用。     

二硫化碳职业暴露对男工性功能及其配偶生殖结局的影响

[目的]探讨CS2职业暴露对男工性功能及其配偶生殖结局的影响,为制定干预对策提供科学依据。[方法]对276名CS2暴露男工（其中仅男工暴露132人为单纯组,男工及其妻子均暴露144人为混合组）和126名非CS2暴露男工的基本情况、性功能及其配偶生殖结局进行回顾性队列研究。[结果]性功能调查结果显示,年龄〈40岁或工龄≥10年的CS2暴露组男工性生活和谐及性生活频度降低,性生活厌恶增加（P〈0.05）;各组间男工妻子妊娠并发症差异无统计学意义（P〉0.05）。生殖结局调查结果表明,混合组的自然流产率与单纯组、对照组比较具有统计学意义（P〈0.05）;混合组与对照组比较,子代低出生体重率较高（P〈0.05）,子代智力发育及体格发育差异无统计学意义（P〉0.05）。[结论]长期、低浓度CS2暴露可明显影响男工性生活态度、频率并可能导致不良的生殖结局,但对子代的智力及体格发育影响不明显。