NF-κB介导大鼠肾小球系膜细胞Visfatin对促纤维化因子和细胞外基质表达的影响

目的观察大鼠肾小球系膜细胞中内脏脂肪素(Visfatin)对促纤维化因子和细胞外基质(ECM)表达的影响并探讨核因子-κB(NF-κB)在此过程中的作用。方法分别构建Visfatin表达质粒及Visfatin RNAi质粒,将细胞分为八组:A组:正常糖对照组;B组:正常糖+NF-κB特异性抑制剂吡咯烷二硫基甲酸酯(PDTC)组;C组:过表达Visfatin组;D组:过表达Visfatin+PDTC组;E组:空白表达载体组;F组:空白表达载体+PDTC组;G组:Visfatin RNAi组;H组:空白沉默载体组。比较过表达或沉默Visfatin前后促纤维因子及细胞外基质基因及蛋白表达的变化。用Realtime-PCR方法检测转录生长因子β(TGF-β)、结缔组织生长因子(CTGF)、纤维蛋白溶解酶原激活物抑制剂(PAI-1)、纤维连接蛋白(FN)、I型胶原(Col I)、IV胶原(Col IV)等基因表达的变化,用Western Blot检测Visfatin、CTGF、FN等蛋白的表达,用电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测NF-κB活性;以及通过观察PDTC处理对照组、过表达Visfatin组、空白表达载体组前后上述指标的变化。结果大鼠肾系膜细胞过表达Visfatin后,NF-κB活性、Visfatin、TGF-β、CTGF、PAI-1、FN、Col I、Col IV的m RNA表达量及Visfatin、CTGF、FN蛋白表达量显著升高(P0.05)。下调Visfatin表达后,NF-κB活性、Visfatin、TGF-β、CTGF、PAI-1、FN、Col I、Col IV的m RNA表达量及Visfatin、CTGF、FN蛋白表达量均显著降低(P0.05)。PDTC处理的各组,NF-κB活性、TGF-β、CTGF、PAI-1、FN、Col I、Col IV表达量与对应的未经PDTC处理组相比显著降低(P0.05)。结论在大鼠肾小球系膜细胞中,Visfatin可通过NF-κB通路诱导促纤维化因子和细胞外基质的表达。     

降钙素原和凝血功能对脓毒血症患者预后的评估价值

目的 探讨脓毒血症患者的凝血功能状况变化及降钙素原变化趋势与预后的相关性。 方法 选取本院2015年1月~2016年6月入住急诊ICU的脓毒血症患者作为研究对象,按照预后分为死亡组和存活组。分别检测两组患者血浆凝血酶原时间、活化部分凝血活酶时间、凝血酶时间、纤维蛋白原和血清降钙素原水平。 结果 死亡组的PCT和凝血功能水平均高于存活组（P<0.05）,ROC曲线显示血清降钙素原最佳截断点为34.24时,曲线下面积（AUG）为93.4,敏感度87.1%,特异度93.1%;血浆凝血酶原时间最佳截断点为14.75时,AUG为72.5,敏感度54.8%,特异度93.1%;国际标准化比值最佳截断点为1.31时,AUG为72,敏感度48.4%,特异度89.7%;活化部分凝血活酶时间最佳截断点为39.20时,AUG为71.7,敏感度67.7%,特异度86.2%;Fbg最佳截断点为3.31时,AUG为90.3,敏感度58.6%,特异度93.1%。 结论 降钙素原和凝血功能与脓毒血症病情密切相关,可作为监测病情及预后的重要指标。       

Sysmex XE-2100全自动五分类血液分析仪常见故障分析及排除

日本东亚公司推出的全自动五分类血液分析仪Sys-m ex XE-2100是目前世界上测试速度最快的血细胞分析仪,每小时可检测150个标本,它具有灵活的七种检测模式和真正随机进样分析,满足临床不同标本检测要求,并节约试剂成本,真正随机进样分析功能可实现完全无人化的操作。Sysm ex XE-     

Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪嗜酸性粒细胞绝对值计数的评价

目的了解SysmexXE-2100全自动血细胞分析仪嗜酸性粒细胞绝对值计数的准确性。方法分别用仪器法和目测法计数60份抗凝静脉血的嗜酸性粒细胞数,再将两者的结果进行比较;并对5份嗜酸性粒细胞数值不同的抗凝静脉血分别用仪器法和目测法计数,每份标本重复计数10次,然后计算出CV值进行比较。结果60份抗凝静脉血仪器法和目测法计数结果之间无显著性差异,P>0.05;相关系数(r)为0.9996,P<0.01。仪器法和目测法对5份嗜酸性粒细胞数值不同的标本重复计数的平均CV值分别是1.98%和6.63%,显示仪器法的精密度明显高于目测法。结论用SysmexSE-2100全自动血细胞分析仪计数嗜酸性粒细胞绝对值(0～9.02×109/L)是一种快速和较准确的方法,可满足临床诊断、治疗和疗效观察的需要。     

婴幼儿泪囊炎病原菌208株分布和耐药性分析

目的了解婴幼儿泪囊炎病原菌的分布及耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法用常规方法对婴幼儿泪囊炎分泌物标本进行病原菌分离培养鉴定,用纸片扩散法（K-B法）进行药物敏感性试验,对分离出的病原菌分布及耐药性进行分析。结果共分离出非重复病原菌208株,其中革兰阴性杆菌105株占50.5%（105/208）,革兰阳性球菌100株占48.1%（100/208）,真菌3株占1.4%（3/208）。分离率居首位的为肺炎链球菌占17.3%（36/208）,其次为表皮葡萄球菌占13.0%（27/208）、肺炎克雷伯菌占10.6%（22/208）和副流感嗜血杆菌占9.6%（20/208）。氧氟沙星和左氧氟沙星对以上4种主要病原菌耐药率均〈30%。结论婴幼儿泪囊炎病原菌以肺炎链球菌、表皮葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和副流感嗜血杆菌为主。氧氟沙星和左氧氟沙星对婴幼儿泪囊炎病原菌均具有较好的体外抗菌活性。     

肺癌患者血清microRNA-21表达临床意义探讨

目的:探讨miRNA-21在肺癌患者血清中的表达及其在肺癌早期诊断的应用价值。方法:收集中山大学孙逸仙纪念医院2011-06-09-2012-10-06收治的90例肺癌患者、40例肺部良性疾病患者和90名健康体检人群作为研究对象,采用Taqman探针实时定量PCR对miRNA-21血清含量进行半定量测定,并依据肺癌患者和两对照组血清miRNA-21相对表达量,利用ROC曲线评价其在肺癌诊断上的灵敏度和特异度。结果:健康组、良性病变组和肺癌组miRNA-21血清平均表达量分别为0.70±0.49、1.38±0.67和1.86±0.85。肺癌患者miRNA-21血清水平显著高于健康对照组和良性肺部疾病组(LSD-t=10.918,P<0.001;LSD-t=3.523,P<0.001),其相对表达量与患者年龄(u=940.000,P=0.626)、性别(u=801.000,P=0.243)、病理类型(χ2=4.109,P=0.128)和临床分期(u=777.000,P=0.085)无关。ROC曲线下面积为0.808(0.750~0.866),当临界值取1.32时,其灵敏度为0.711,特异度为0.823。结论:肺癌患者血清miRNA-21水平显著升高,提示可能是肺癌诊断的潜在肿瘤标志之一。     

Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪与显微镜目测法测定白细胞分类结果比较

目的探讨Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪白细胞分类结果与显微镜目测法两种结果的可比性,为现代化仪器的推广应用提供临床实验室依据.方法取一份标本,连续测定10次,观察其批内精密度;用质控物,连续测定23天,观察其批间精密度;将90例血标本的Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪检测结果与显微镜目测法结果进行相关性回归分析.结果Sysmex XE-2100血细胞分析仪白细胞分类的批内精密度和批间精密度均在允许范围内,仪器法白细胞分类结果与显微镜目测法结果之间亦具有良好的相关性,中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞相关系数(r)分别为0.9859,0.9775,0.8053,0.8695,0.5243(P＜0.01).结论Sysmex XE-2100全自动五分类血细胞分析仪是一种较为理想的血细胞分析仪,具有简便、快捷、精密、准确等优点,能满足临床应用要求,值得推广使用.     

Sysmex XE-2100全自动血细胞分析仪与显微镜目测法测定白细胞分类结果比较

目的探讨SysmexXE-2100全自动血细胞分析仪白细胞分类结果与显微镜目测法两种结果的可比性,为现代化仪器的推广应用提供临床实验室依据。方法取一份标本,连续测定10次,观察其批内精密度;用质控物,连续测定23天,观察其批间精密度;将90例血标本的SysmexXE-2100全自动血细胞分析仪检测结果与显微镜目测法结果进行相关性回归分析。结果SysmexXE-2100血细胞分析仪白细胞分类的批内精密度和批间精密度均在允许范围内,仪器法白细胞分类结果与显微镜目测法结果之间亦具有良好的相关性,中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞相关系数(r)分别为0.9859,0.9775,0.8053,0.8695,0.5243(P<0.01)。结论SysmexXE-2100全自动五分类血细胞分析仪是一种较为理想的血细胞分析仪,具有简便、快捷、精密、准确等优点,能满足临床应用要求,值得推广使用。     

儿童癫痫患者外周血B淋巴细胞CD20的表达

目的 探讨癫痫患儿外周血B淋巴细胞CD20表达的变化与癫痫发作的关系.方法 应用流式细胞仪测定本院2008年1月至2010年12月就诊的620例儿童癫痫患者外周血B淋巴细胞CD20的表达,并与健康对照组(n=36)进行比较.同时分析96例儿童癫痫患者(症状性癫痫患者37例,特发性癫痫患者59例)应用静脉注射免疫球蛋白(IVIG)治疗前后的B淋巴细胞CD20表达的改变,并评价IVIG治疗各型癫痫的有效率.结果 癫痫儿童外周血B淋巴细胞CD20+比例较健康对照组明显升高[(21.50±8.41)％比(16.13±4.19)％,P＜0.05].96例儿童癫痫患者经IVIG治疗6个月后外周血B淋巴细胞CD20+细胞比例较治疗前下降[(16.74±5.12)％比(21.61±8.03)％,P＜0.05].IVIG治疗癫痫总体有效率为76.04％(73/96),症状性癫痫治疗有效率为86.49％ (32/37),特发性癫痫治疗有效率为69.49％(41/59).结论 儿童癫痫患者存在B淋巴细胞功能异常,IVIG治疗能改善癫痫患儿的细胞免疫功能.