肠杆菌科细菌微量生化数码鉴定板研制及应用研究

目的：研制一种肠杆菌科细菌微量生化数码鉴定板,为微生物鉴定提供一种新的检测手段。方法：作者根据不同细菌的生化反应特性,利用微生物代谢产物,配制高纯度生化基质、采用无菌脱水干燥技术,使不同生化反应培养基吸附在相应结构坚实、透明度高、反应易见的聚苯乙烯载体内。选用15项细菌生化反应按一定顺序排列构成YKS-15 e肠杆菌科细菌微量生化数码鉴定板,同时编制了相应的细菌编码鉴定手册,并进行了真实性、可靠性评价。结果：经6株标准菌株验证：阳性、阴性生化反应明显,结果准确。所有反应均可12 h内完成。60株从各类临床标本分离鉴定临床菌株经肠杆菌科细菌微量生化数码鉴定板与VITEK32法检测,符合率达96.97%。可对24个属85种肠杆菌科细菌进行鉴定。结论：该鉴定板使用方便、具有简易化、标准化、快速化、生化反应明显、结果准确等特点。     

RNA干扰HT-29细胞FGF3基因表达对其生长和迁移速度的影响

目的:研究RNA干扰FGF3基因表达对肿瘤细胞HT-29的作用.方法:制备针对FGF3基因的RNA干扰质粒(pRNATU6.1 /NeoGFP-FGF3),并选用大肠癌细胞株HT-29为实验对象,损伤刮擦实验检测转染细胞的迁移能力,体内抗肿瘤实验观察体内抗肿瘤效果.结果:pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3组的HT-29细胞迁移速度与空白对照组(正常培养的肿瘤细胞)和阴性对照组(空载体pRNATU6.1/NeoGFP)相比明显减缓;pRNATU6.1/NeoGFP-FGF3组小鼠肿瘤明显小于空白对照组和阴性对照组,显示了干扰RNA抑制肿瘤生长的明显效果.结论:构建的RNA干扰质粒(pRNATU6.1 /NeoGFP-FGF3)对HT-29肿瘤细胞的迁移和生长有明显的抑制作用.     

聚丙烯酰胺凝胶颗粒在献血者血液HBsAg筛查中的应用

目的探讨聚丙烯酰胺凝胶颗粒应用于献血者血液HBsAg的筛查效果。方法应用聚丙烯酰胺凝胶颗粒,对经定值参考血清及酶联免疫法2次复检确定的HBsAg"阴性"的123份血清标本浓缩后复测,观察聚丙烯酰胺凝胶颗粒对ELISA法灵敏度的提高和在123份复测血清标本中检出的阳性数。结果聚丙烯酰胺凝胶颗粒使ELISA法检测血清HBsAg的灵敏度由0.50ng/ml升至0.04ng/ml;123份复测血清标本检出4例HBsAg阳性。结论聚丙烯酰胺凝胶颗粒可间接地将ELISA法的灵敏度提高到一个较高水平,具有使用方法简便、快速的特点。     

甲鱼保健液的制备研究

目的：研究一种甲鱼保健液制备方法。方法采取低温冻融提取技术,使甲鱼组织细胞内冰粒形成引起溶胀,造成细胞膜破裂,细胞内蛋白质、核酸及生物活性物质释放到溶液中,通过离心收集、过滤除菌制备甲鱼冻融提取液,配伍黄芪、淫羊藿提取液,甜菊糖调味。结果甲鱼保健液组方为甲鱼冻融提取液（10 g/dl）、黄芪提取液（50 g/dl）、淫羊藿提取液（50 g/dl）、甜菊糖溶液（90 g/dl）按8∶1∶1∶0.07比例构成。结论将滋肝肾之阴的甲鱼与益气健脾的黄芪和补肾壮阳的淫羊藿有机地配合起来,提供了一种强身健体保健品。     

医用聚丙烯酰胺凝胶颗粒的制备

目的 研制一种医用聚丙烯酰胺凝胶颗粒.方法 采用有机玻璃板、钢丝材料,通过切割、粘合、固定制成一种凝胶颗粒制备工具,工具由条形凝胶模具、方形凝胶器、切割器、凝胶造粒器、推进柄五部分构成,确立了医用凝胶颗粒制备方法.结果 制备的聚丙烯酰胺凝胶颗粒,适合医学实验室中对检测样本的浓缩,提高检测灵敏度.结论 聚丙烯酰胺凝胶颗粒,根据凝胶特性设计,结构简单,制作成本低廉,使用方法简便.     

浓缩剂-聚丙烯酰胺凝胶颗粒的研究

目的 研制一种新型微小蛋白质浓缩凝胶颗粒,应用于医学免疫试验中待检样品的浓缩,间接提高检验试剂的灵敏度.方法 研究聚丙烯酰胺凝胶颗粒制备原理,以丙烯酰胺(ACR)为原料,采用自定工艺制备流程,通过化学聚合方法,进行聚丙烯酰胺凝胶颗粒的聚合、切割、干燥、成粒;不同交联度胶粒吸附蛋白质、吸水试验;胶粒吸水吸血清性能、速度试验;低含量HBsAg定值参考水样品、血清样品浓缩试验.结果 研制7mm×2mm×2mm长方体脱水干燥的聚丙烯酰胺凝胶颗粒.每粒平均重量0.05克,吸水倍率7.66倍、吸血清倍率6.33倍.浓缩HBsAg定值参考水样品及血清样品后经酶联免疫法检测灵敏度达0.025 ng/ml、0.04 ng/ml,大于目前检测HBsAg ELISA试剂盒灵敏度为0.5 ng/ml水平.结论 聚丙烯酰胺凝胶颗粒,具有使用简单、方便、快速、成本低廉等特点.通过对样品浓缩,能够提高检验试剂的灵敏度,为医学检验提供了一种新的蛋白质浓缩手段.     

荠苨多糖的提取工艺研究及含量测定

目的研究沙参属药用植物荠苨中多糖成分的提取方法并测定其含量,为进一步开发利用提供可靠依据。方法采用正交设计法考察提取温度、时间、次数、料液比4个指标对多糖提取率及含量的影响;多糖含量采用苯酚-硫酸法测定。结果最佳提取条件为温度60℃、时间3h、次数1次、料液比1:30。最佳条件下,多糖提取率达18.17%,多糖含量为87.39%。结论本法操作步骤简单易行,荠苨多糖含量较高。     

长春花同源四倍体的诱导与鉴定

目的:为提高长春花中有效成分生物碱的含量,利用秋水仙素诱导出长春花同源四倍体,为获得优质长春花四倍体株系打下基础。方法:以秋水仙素为诱导剂,对实生苗顶芽进行处理,考察不同浓度和不同的处理时间对诱导率的影响。对获得的变异株通过形态、染色体计数、流式细胞术等方法进行鉴定,筛选出同源四倍体。结果:毛细管法诱导实体幼苗的顶芽效果较好,0.1%秋水仙素处理72h和0.2%处理48h,四倍体的诱导率分别达到46%和58%。各处理组共获得四倍体38株,四倍体的性状发生了明显变化,茎、叶、花、果变大,四倍体单株干重也高于二倍体。     

干扰RNA对HT-29细胞周期和凋亡活性的影响

目的：研究干扰RNA质粒载体对肿瘤细胞的作用。方法：制备了针对FGF3基因的干扰RNA质粒载体（pRNATU6．1／NeoGFP—FGF3）,并选用大肠癌细胞株HT-29为实验对象,流式细胞仪观察干扰RNA质粒载体对HT-29细胞周期和凋亡活性的影响。结果：细胞周期分析发现转染pRNATU6．1／NeoGFP-FGF3后,HT-29细胞增殖能力减弱;细胞凋亡实验表明干扰RNA质粒载体有明显的促进肿瘤细胞凋亡作用。结论：干扰RNA质粒载体能明显抑制HT-29肿瘤细胞的增殖,并且能显著促进细胞凋亡。