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1.
氯霉素乙酰基转移酶双抗体夹心ELISA检测方法的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 建立氯霉素乙酰基转移酶(chloramphenicol acetyltransferase,CAT)双抗体夹心ELISA的实验室检测方法。方法 从质粒pBLCAT6经PCR扩增CAT基因序列,插入到原核表达质粒pGEX-2T中,在大肠埃希菌DH5α中诱导表达;以纯化的融合蛋白GST-CAT为抗原免疫实验用兔,得到的CAT抗血清进行生物素标记,并在此基础上利用生物素链和亲和素放大系统建立双抗体夹心ELISA法,构建不同YY1结合位点突变的HPV16LCRCAT报道质粒,体外瞬时转染真核细胞,提取胞质蛋白,以建立的方法进行CAT表达检测。结果 SDS-PAGE显示表达的GST-CAT融合蛋白相对分子质量约为54000;制备的CAT抗血清可有效地识别原核及哺乳动物细胞表达的CAT蛋白;在不同启动子及调节序列的控制下,利用建立的CAT检测技术证明在瞬时转染的细胞中可诱导2-8倍的CAT表达增强。结论 建立的双抗体夹心ELISA方法可敏感地反映上游序列的启动子活性,以及启动子调节序列变化对启动子活性的影响,使CAT作为报道基因的研究更为简单化。 相似文献
2.
目的 研究超声处理对感染羊瘙痒症仓鼠脑组织中PrP^Sc聚集状态的影响,寻找产生PrP^Sc低聚体的条件。方法 裂解液制备脑组织提取物,用各种超声条件处理不同阶段的脑组织提取物;以蛋白酶消化后的Western blot方法和图象分析系统观测PrP^Sc蛋白的分布和聚集状态。结果 适当的超声处理(15s共30次)可增加脑组织匀浆上清中PrP^Sc含量1.29~1.58倍;同样条件下超声处理可明显增加羊瘙痒因子263K感染仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量,而对正常对照仓鼠脑组织匀浆上清中PrP蛋白总量影响不大;对经常规高速离心获得的PrP^Sc的超声处理显示约90%的PrP^Sc存在于离心上清液中。结论 对感染动物脑组织进行超声处理可增加PrP^Sc的提取量,利于实验室检测。适当的超声处理可破碎大的相对分子质量的PrP^Sc聚集物,产生小的相对分子质量的PrP^Sc产物。 相似文献
3.
内皮素1(endothelin1,ET1)是目前已知最强的内源性血管收缩物质[1],降钙素基因相关肽(calcitoningenerelatedpeptide,CGRP)是具有强大扩张血管作用的肽类物质[2],二者均在脑循环的调节中起重要作用... 相似文献
4.
奥美拉唑 (omeprazole)是苯并咪唑类质子泵抑制剂 ,治疗消化性溃疡具有疗效高、疗程短、耐受性好和复发率低的特点。为比较市售注射用奥美拉唑钠 (静脉推注型 )产品的质量 ,我们抽取市售的两种品牌产品 ,测定其含量和有关物质 ,并通过加速实验了解其稳定性。1 试药与仪器奥美拉唑对照品 (U .S .PHARMACOPIA公司 ,批号4 785 0 ) ,奥美拉唑有关物质A ,B ,C ,E对照品 (北京大学药学院 ) ,有关物质D(EUROPEANPHARMACOPOEIA公司 ,批号 90 7-F6 70 2 9) ,奥克注射剂 (国内某公司生产 ,含奥美拉唑 4 0mg ,批号为 :2 0 0 10 70 1,2… 相似文献
5.
目的:研究国产与进口非那雄胺片的人体生物等效性。方法:采用高效液相色谱法测定18名健康男性志愿者随机交叉单剂量口服非那雄胺片10mg后血清中的药物浓度,计算药动学参数和相对生物利用度,并进行生物等效性评价。结果:国产及进口非那雄胺片的AUC0~t 分别为(990 .80±302. 80)、(1007 .46±333. 65) (μg·h)/L ,Cmax 分别为(119. 22±18. 48)、(114. 08±22 .97) μg/L ,tmax 分别为(2. 89±1. 02)h、(2. 64±0. 54)h ,国产制剂相对于进口制剂的人体生物利用度为(103. 35±29 .75) %。结论:国产与进口非那雄胺片具有生物等效性。 相似文献
6.
目的:了解药品不良反应(ADR)在我院(北京天坛医院)的发生情况及相关因素。方法:对404例ADR病例报告进行分类统计和分析评价。结果:涉及ADR的药物共有62个品种,其中抗感染药的发生率居首位,其次为中药制剂、神经系统药物。合并用药占22.5%;给药途径以静脉用药为主。主要的ADR类型为皮肤损害,其次是心血管及消化系统损害。结论:应继续加强对ADR的监测。 相似文献
7.
目的:比较国产与进口非那雄胺片的人体生物等效性.方法:18例健康男性单次随机交叉口服非那雄胺10mg后,用HPLC法测定血清中各时的药物浓度,计算两者的药物动力学参数和相对生物利用度,进行生物等效性评价.结果:国产及进口非那雄胺片的主要药动学参数如下:AUC0-t分别为(1039.13±272.37)和(1008.60±244.77)μg·h·L-1,Cmax分别为(128.72±26.69)和(117.32±25.20)μg·L-1,Tmax分别为(2.69±0.39)和(2.69±0.49)h,供试制剂相对于参比制剂的人体生物利用度为(106.58±27.79)%.结论:国产与进口非那雄胺片具有生物等效性. 相似文献
8.
通过系统分析中国社会办医的现状,为进一步促进社会办医提出政策建议。根据国内外文献,社会办医疗机构和公立医疗机构在医疗费用和服务质量方面并没有显著差异,并且由于社会办医促进市场开放与公平竞争,公立医院和整个医疗卫生服务市场的绩效也因此有所提高(正向溢出效应)。尽管如此,由于中国长期计划经济自上而下的资源配置与行政干预,社会办医长期未能得到健康发展,主要政策障碍包括准入方面存在隐形限制、经营方面缺乏税收鼓励、用人方面缺少优质医师资源。因此,建议调整区域卫生规划的功能从“封顸”向“兜底”过渡,尽快制定有利于社会办医的土地政策和人才政策,进一步完善相关配套措施,促进社会办医在中国的健康发展。 相似文献
9.
脊柱微创手术(MISS)具有创伤小、术后恢复快等优点,而脊柱内镜技术是脊柱微创手术的研究热点.本文主要综述两种内镜方式包括经鼻神经内镜治疗颅颈交界区病变和经皮颈椎内镜治疗颈椎疾病.这两种内镜方式都有着较好的疗效,其中经皮颈椎内镜更是目前骨科常见的手术方式之一,后路经椎板间入路、前路经椎间隙入路和前路经椎体入路也都有不同... 相似文献
10.
目的研究敲低Polo样激酶1(PLK1)后对宫颈癌HeLa细胞生长的作用。方法流式细胞术评测LAH4-L1载体对小干扰绿色荧光蛋白基因(siGFP)的递送效率;反转录PCR检测PLK1 mRNA水平,Western blot法检测PLK1蛋白水平;敲低PLK1水平后,采用CCK-8法检测HeLa细胞活性和生长抑制情况。结果 LAH4-L1-siPLK1纳米复合物可下调HeLa细胞PLK1约70%,并降低PLK1蛋白的表达,敲低PLK1后,可明显抑制HeLa细胞增殖。另外,LAH4-L1载体的基因递送效率能够稳定维持在较高水平。结论敲低HeLa细胞PLK1抑制癌细胞生长,LAH4-L1是一个较好的基因递送载体。 相似文献