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1.
APA微胶囊免疫隔离生物膜制备中的质量控制 总被引:3,自引:0,他引:3
为了优化制备条件, 简化工艺, 控制质量, 本文观测了APA(海藻酸盐-聚赖氨酸-海藻酸盐)微胶囊免疫隔离生物膜制备过程中部分物理因素和化学因素与质量的关系.结果表明: 微囊的粒径与静电微囊发生仪脉冲频率呈负相关; 与推进泵速度呈正相关; 与针头内径呈正相关.随着聚赖氨酸浓度的增加, 膜厚度显著增加.微囊的粒径不随聚赖氨酸成膜反应时间延长而改变, 但影响膜的厚度.柠檬酸钠的液化时间对微囊的粒径与厚度均无明显影响.通过优化制备条件, APA微胶囊免疫隔离生物膜将具有更好的通透性、柔韧性、生物相容性和强度. 相似文献
2.
Vitamin D receptor gene polymorphism in postmenopausal women of the Han and Uygur nationalities in China 总被引:2,自引:0,他引:2
Theriskofosteoporosisiscloselyrelatedtobonemineraldensity (BMD ) ,whichisunderstronggeneticcontrol Morrisonetal1 haveshownastrongrelationshipbetweenpolymorphismatthevitaminDreceptor (VDR)geneandBMD InadditiontoBsmⅠ ,restrictionfragmentlengthpolymorphismatth… 相似文献
3.
APA-3T3细胞微囊的深低温保存 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:通过优选冻存液的成份和浓度,建立低温保存APA微囊化小鼠成纤维细胞(3T3细胞)的方法。方法:用海藻酸钙-多聚赖氨酸-海藻酸钙微囊(APA)包裹3T3细胞制成APA-3T3细胞微囊。以高糖DMEM培养液为基础冻存液,分别加入不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)或牛血清白蛋白(BSA)。分别将不同的冻存液加入APA-3T3中。按程序控制降温梯度,置于液氮中保存。快速复温后,光镜下观察APA-3T3的形态、细胞活率及膜通透性。结果:①10%DMSO组的微囊内细胞活率降低最少,细胞活率达(75.68±1.54)%,P<0.01。微囊完好率达到(94.48±0.90)%,P<0.01。②与其它组相比,4%BSA组的微囊内细胞活率降低程度最小,活率达(73±1.26)%,P<0.01。微囊完好率最高,为(85.1±0.82)%,P<0.01。③加入不同成份和浓度的冻存液对微囊的通透性没有明显影响。结论:在冻存液中加入10%DMSO和4%BSA,可在低温保存的过程中较好地保护细胞的存活及微囊的完整性。 相似文献
4.
目的:在前期微囊化基因工程细胞制备平台的基础上,构建分泌型人肿瘤坏死因子α的真核表达载体PSNAV2.0-TNFα重组质粒,并鉴定其蛋白的体外瞬时表达,为进一步利用该基因进行微囊化细胞移植治疗和改善疾病奠定基础。方法:实验于2006-06/2007-05在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学实验室完成。①以含有人肿瘤坏死因子αcDNA序列的质粒为模板,通过PCR扩增获得人肿瘤坏死因子α基因片段;将其定向插入真核表达载体PSNAV2.0中,获得重组质粒PSNAV2.0-TNFα。采用SalⅠ和EcoRⅠ双酶切法、PCR法及插入片段序列测定法鉴定该质粒。②利用阳离子脂质体介导法,将其转染到人胚胎肾细胞HEK-293细胞中,构建可持续分泌人肿瘤坏死因子α的基因工程细胞,采用RT-PCR法和Western blot法检测转染细胞培养上清液中人肿瘤坏死因子蛋白的体外瞬时表达。结果:①通过SalⅠ和EcoRⅠ双酶切、PCR及测序鉴定证明:在HEK-293中插入片段正确。②采用RT-PCR和Western blot法检测表明HEK-293细胞培养上清中有人肿瘤坏死因子α蛋白,Mr17000。结论:成功构建了重组质粒PSNAV2.0-TNFα真核表达载体,转染HEK-293细胞后可有效分泌人肿瘤坏死因子α蛋白,并能分泌到细胞外。 相似文献
5.
目的 探讨腹式呼吸放松训练在缓解海军特勤人员睡眠障碍和异常情绪中的效应。方法 回顾性分析2017年8月-2018年8月在疗养院特勤科疗养的70例患有睡眠障碍海军特勤人员,其中对照组30例为常规疗养,干预组40例是在常规疗养的基础上进行腹式呼吸放松训练,进行为期30 d的腹式呼吸放松训练,利用匹兹堡睡眠质量指数量表(PSQI)评估睡眠质量。抑郁和焦虑分别采用抑郁自评量表(SDS)和焦虑自评量表(SAS)进行评估。情绪状态采用简明心境状态测试量表(POMS)进行评估。结果 对照组睡眠障碍海军特勤人员的PSQI总分及各维度自身干预前后对比无统计学意义(P>0.05)。干预组PSQI总分及PSQI量表主观睡眠质量、睡眠潜伏期、睡眠时间、睡眠障碍、日间功能障碍自身干预前后对比有统计学意义(P<0.05),睡眠效率自身干预前后对比无统计学意义(P>0.05)。干预组与对照组比较,SDS、SAS、POMS的评分降低,提示海军特勤人员焦虑、抑郁心理障碍减轻,POMS的评分降低提示海军特勤人员疲劳和紧张的情绪得到缓解。干预组与对照组比较,PSQI总分降低,提示海军特勤人员睡眠质量得到改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 腹式呼吸放松训练治疗30天后,可以有效的改善海军特勤人员睡眠质量,缓解心理压力和焦虑,缓解海军特勤人员疲劳和紧张的异常情绪。腹式呼吸放松训练方法对疗养期间海军特勤人员进行放松训练更适合。由于坚持30 天腹式呼吸放松反馈训练依从性更高,从而降低海军特勤人员的应激水平,提高海军特勤人员睡眠质量和心理健康水平。 相似文献
6.
目的自行建立分泌人肿瘤坏死因子α的基因工程细胞,将其与肝癌细胞共培养,观察体外培养中分泌肿瘤坏死因子hTNF/293基因细胞表达的情况及对人肝癌细胞的抑制作用。方法(1)建立可稳定分泌人肿瘤坏死因子α/293细胞;采用RT-PCR、Western blot、ELISA和流式细胞仪等技术检测人肿瘤坏死因子表达和分泌;(2)观察体外培养中分泌肿瘤坏死因子hTNF/293基因细胞对人肝癌细胞的抑制作用,于不同的时间点,用MTT法检测490 nm下的吸光度值。结果RT-PCR、Western blot和ELISA等技术检测表明hTNFα/293 细胞组和TNFα阳性组对共培养的HepG2细胞的增殖具有明显的抑制作用,且具有良好的量效关系。结论提示TNF-α/293基因细胞可有效分泌hTNFα蛋白,并能分泌到细胞外;体外培养的人肿瘤坏死因子基因的工程细胞,所分泌肿瘤坏死因子α对人肝癌细胞增殖有明显抑制效应,且呈现出良好的数量依赖关系。 相似文献
7.
目的:观察海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹对不同特性细胞生长的影响。方法:实验于2004-04/2005-04在解放军总医院老年医学研究所细胞生物学研究室完成。细胞:牛肾上腺嗜铬细胞、Swiss小鼠胚胎成纤维细胞株(3T3)、人早幼粒白血病细胞株。仪器和试剂:加拿大Sun氏静电微囊发生仪;体视显微镜;海藻酸钠,聚赖氨酸、氯化钙、柠檬酸钠。制备海藻酸钙微球和海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊,分别用其包裹3T3细胞、牛肾上腺嗜铬细胞及人早幼粒白血病细胞。按照细胞的不同及包裹材料的不同,分为裸细胞组、海藻酸钙微球组、海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊组。在光镜下观察体外培养的微球、微囊及细胞的形态、存活率、增殖率。细胞增殖率=培养后细胞数-培养前细胞数/培养前细胞数×100%。结果:光镜下见包裹后即刻海藻酸钙微球和海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊呈大小均一的半透明圆球,直径150~300μm,表面光滑。培养24h时,牛肾上腺嗜铬细胞、3T3或人早幼粒白血病细胞均呈单个细胞,均匀分散于微球或微囊内。培养120h时,牛肾上腺嗜铬细胞、3T3和人早幼粒白血病细胞在海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内聚集成团块,而在海藻酸钙微球内仍呈单个细胞散在分布。①海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内高增殖活性的3T3或人早幼粒白血病细胞的存活率显著高于牛肾上腺嗜铬细胞(74.38±7.72,89.08±3.05,87.48±3.43,92.40±7.56,72.67±2.08,89.33±5.13,P<0.01);海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内细胞存活率均显著高于海藻酸钙微球内同一种细胞的存活率(87.88±3.38,89.08±3.05,89.63±5.55,85.33±4.86,92.40±7.56,95.08±3.81,83.67±5.51,89.33±5.13,85.33±2.08,P<0.01)。②在不同状态下,培养72和120h时,人早幼粒白血病细胞或3T3细胞的增殖率存在差异,海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊内同种细胞的增殖率显著高于裸细胞组(2.54±0.65,5.20±2.38,2.30±0.70,2.26±0.83,3.89±1.89,13.37±16.14,P<0.05);而在不同状态下牛肾上腺嗜铬细胞的增殖率差异无显著性(P>0.05)。③在相同状态下,培养72和120h时,人早幼粒白血病细胞增殖率明显高于3T3或牛肾上腺嗜铬细胞(18.66±7.76,39.11±16.06,P<0.01);而3T3与牛肾上腺嗜铬细胞的增殖率差异无显著性(P>0.05)。④对同一种细胞,培养24,72和120h时,海藻酸钙微球与海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊相比,其细胞的增殖率差异均无显著性(P>0.05)。结论:在培养条件下,海藻酸钙微球或海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹似更利于该3种细胞的生长;海藻酸钙-聚赖氨酸-海藻酸钙微囊包裹较海藻酸钙微球包裹更利于同种细胞的生长。 相似文献
8.
高宇红 《安徽卫生职业技术学院学报》2012,11(1):50-51
目的:探讨输卵管妊娠行腹腔镜手术的护理措施,确保手术的安全有效。方法:对120例输卵管妊娠行腹腔镜手术的患者进行心理支持,充分的术前准备,术后密切观察病情变化,监测各项生化指标,保持引流管通畅,同时在出院前开展计划生育及生殖健康的知识普及。结果:120例患者手术中无大出血,术后24小时拔除腹腔引流管及导尿管,无并发症发生,计生知识的知晓率达90%以上。结论:良好的围手术期护理是确保输卵管妊娠行腹腔镜手术成功的保障。 相似文献
9.
目的通过分析烟雾病患者远红外热像图的变化,探讨红外热像仪在烟雾病诊断中的价值。方法将解放军总医院临床诊断为烟雾病的患者28例作为患者组,30例健康体检者作为正常对照组,受检者暴露检查部位。检查在环境温度为20℃~25℃的检查室中进行。使用远红外热像仪采图,同时对人体头面部的红外热像图进行分析,观察烟雾病患者组与正常对照组的身体各部位左右两侧的温差变化,并进行统计学分析。结果 28例烟雾病患者的红外热像图中,头面部充血性改变呈红色或深红色,缺血性改变呈蓝色或浅绿色。患者组的额颞区、内眦区两侧对称区域温度差值明显大于正常组,差异有统计学意义(t=1.453,1.636,P0.05)。结论红外热像图可通过皮肤温度变化,敏感地反映烟雾病患者的身体热分布及功能状况,对于烟雾病诊断具有重要价值。 相似文献
10.
神经干细胞体外诱导分化为胆碱能神经细胞 总被引:2,自引:0,他引:2
本文观察骨形态发生蛋白4(BMP4)在体外对原代分离培养的大鼠脑神经干细胞(NSCs)的胆碱能诱导分化效应.将从两月龄大鼠脑海马、纹状体等区域分离的细胞, 培养于含EGF和bFGF的DMEM/F12培养液中, 在光镜下观察细胞的形态特征, 并行nestin免疫细胞化学染色.24h后, 一半细胞改换成含有BMP4的培养液培养作为实验组, 另一半细胞继续用原培养液培养作为对照组.在培养第8天, 采用间接免疫荧光染色, 观察培养细胞的胆碱乙酰转移酶(ChAT)抗原的表达.结果表明实验组呈ChAT阳性的细胞较多, 发出较强的绿色荧光, 具有神经元的形态特征;对照组呈ChAT阳性的细胞较少, 发出的荧光较弱.另外行FITC标记的流式细胞术, 检测NSCs的分化、结果表明实验组有16%的细胞呈ChAT阳性,而对照组只有约7%.由此认为BMP4具有诱导NSCs分化成具有胆碱能特性的细胞的功能. 相似文献