深圳市南山区人民医院2011年细菌耐药监测

[目的]了解本院2011年临床住院病人分离菌株对各种常用抗菌药物的耐药性,以指导临床合理用药.[方法]应用微量肉汤稀释法,检测临床分离菌对各种常用抗菌药物的耐药性,参照CLSI2010版判断结果,并用WHONET5.4软件统计分析.[结果]2011年1~12月收集的临床住院病人分离菌共2137株,其中革兰阳性(G+)菌占35.1%,革兰阴性(G-)菌占64.9%.金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中甲氧西林耐药株所占的比例分别为 24.1%和62.6%.葡萄球菌属中甲氧西林耐药株对β-内酰胺类抗生素和其他测试药的耐药率显著高于甲氧西林敏感株,但仍有约50%~80%的菌株对四环素、复方新诺明或利福平敏感,未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株.肠球菌属中粪肠球菌对大多数测试药物的耐药率低于屎肠球菌,粪肠球菌中发现2株对利奈唑胺耐药的菌株,经使用微量肉汤稀释法鉴定后确认为耐利奈唑胺的粪肠球菌,未发现万古霉素及替考拉宁耐药株.大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株所占比例分别平均为46.6%和25.5%.肠杆菌科细菌中产ESBLs菌株对测试药物的耐药率均比非产ESBLs菌株高.肠杆菌科细菌对碳青霉烯类仍高度敏感,总耐药率小于1.0%.铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南耐药率分别为 32.2%和21.9%,不动杆菌属(鲍曼不动杆菌占90.8%)对两者的耐药率均为45.4%.嗜麦芽窄食单胞菌对复方新诺明、左氧氟沙星敏感率均在80.0%以上.[结论]2011年本院分离的细菌以G-杆菌为主,细菌多重耐药性严重,利奈唑胺耐药肠球菌和碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌有增多趋势,尤其G-杆菌增多.鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药的增加,对临床构成严重威胁.合理选用抗菌药,加强感染控制措施是当务之急,各医院采取有效控制措施刻不容缓.     

225例肠球菌的临床分布及耐药性分析

目的 了解该院临床分离的肠球菌属的临床分布及对常用抗菌药物的耐药性.方法 采用全自动细菌鉴定仪及配套鉴定与药物敏感试验试剂,检测临床分离菌的菌种分布、样本来源和构成比及对常用抗菌药物的耐药性及敏感性,并用WHONET5.4软件进行统计分析.结果 2010-2011年临床共分离到225株肠球菌,泌尿道分离的标本113株（50.2%）,临床分布前三位分别是泌尿外科、重症医学科及新生儿科,粪肠球菌比屎肠球菌对大多数的测试药物的耐药率低,但对氯霉素及四环素的耐药率明显的高于屎肠球菌,未发现耐万古霉素及替考拉宁的肠球菌,此次监测发现1株耐利奈唑胺的粪肠球菌.结论 不同种类的肠球菌耐药性差别较大,在治疗时,我们需根据药物敏感试验及耐药特点,合理选择抗菌药物治疗,防止出现替考拉宁、万古霉素及利奈唑胺耐药的菌株.     

利奈唑胺体外诱导粪肠球菌中介耐药及机制研究

目的 研究利奈唑胺对粪肠球菌中介耐药的体外诱导作用并探讨其耐药机制.方法 采用多步诱导法对4株临床分离粪肠球菌以及质控菌株进行体外诱导耐药试验,采用琼脂平皿二倍稀释法测定诱导前后的MIC值,采用PCR测序法检测粪肠球菌4个23S rRNA V区基因的变异.结果 4株临床分离粪肠球菌和质控菌株均诱导出中介株和稳定耐药株,在中介株和耐药株中均检测到了G2576U、G2505A和C2424U变异,2株中介株和耐药株还同时存在G2576U和C2424U变异.结论 利奈唑胺可体外诱导粪肠球菌产生中介株和稳定性耐药株,粪肠球菌中介株即可出现23S rRNA V区基因变异.     

深圳南山医院2010年细菌耐药性监测

目的了解某院2010年临床住院患者送检标本分离菌株对常用抗菌药物的耐药性。方法采用全自动细菌鉴定仪及配套鉴定与药物敏感试验试剂,检测临床分离菌对常用抗菌药物的耐药性,并用WHONET5.4软件进行统计分析。结果2010年1-12月共分离病原菌2 192株,其中革兰阳性菌占32.03%,革兰阴性菌占67.97%。金黄色葡萄球菌和凝固酶阴性葡萄球菌中,甲氧西林耐药株(MRSA 和 MRCNS)分别占 19.69%和54.59%。葡萄球菌属中耐甲氧西林株对β 内酰胺类抗生素和其他测试抗菌药物的耐药率显著高于甲氧西林敏感株。 MRSA对复方磺胺甲口恶唑、利福平、四环素、庆大霉素的耐药率分别为1.67%、41.54%、44.62%、58.46%;MRCNS对利福平、四环素的耐药率分别为17.27%和36.70%;未发现万古霉素、替考拉宁和利奈唑胺耐药株。肠球菌属中,粪肠球菌对大多数测试抗菌药物的耐药率低于屎肠球菌;此次监测首次在该院发现1株耐利奈唑胺的粪肠球菌,未发现耐万古霉素菌株。大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌中产超广谱β 内酰胺酶(ESBLs)株分别为 44.29%和 15.79%。肠杆菌科细菌中产ESBLs株对抗菌药物的耐药率均比非产ESBLs株高。铜绿假单胞菌对亚胺培南和美罗培南的耐药率分别为 26.73%和13.79%,不动杆菌属(鲍曼不动杆菌占92.91%) 对二者的耐药率分别为31.35%和 27.17%。结论细菌耐药性仍呈增长趋势, 尤其革兰阴性杆菌;鲍曼不动杆菌及铜绿假单胞菌对碳青霉烯类抗生素耐药性的增加,对临床构成严重威胁。合理选用抗菌药物,及早检测泛耐药菌, 加强感染控制措施是当务之急。     

肠致病性大肠埃希菌EspB基因的体外诱导表达研究

目的:研究肠致病性大肠埃希菌(enteropathogenic E.coli,EPEC)EspB基因的体外诱导表达情况,获得纯化的EspB蛋白。方法:体外构建重组质粒pET-28a-EspB,转化BL21感受态细菌培养,提取重组质粒并行琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定。重组质粒pET-28a-EspB经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白质印迹试验(Western blot)分析。pET-28a-EspB表达产物再次经纯化,获得的纯化蛋白进一步经SDS-PAGE和蛋白质Western blotting分析验证。结果:经双酶切和测序验证pET-28a-EspB重组质粒构建成功。pET-28a-EspB重组质粒经IPTG诱导后,在诱导表达不同时间点,培养菌液、沉淀和上清中均有良好的蛋白表达。经SDS-PAGE和蛋白质Western blotting分析验证我们获得了纯化的EspB蛋白。结论:体外可成功诱导EPECEspB蛋白稳定高效表达并获得纯化EspB蛋白产物。