银杏叶提取物改善肺内淋巴转运对大鼠矽肺病程的影响

[目的]通过银杏叶提取物改善矽肺大鼠肺内淋巴转运,探讨其对矽肺病程的影响。[方法]Wistar雄性大鼠随机分为正常对照组、处理对照组、染尘组及处理组,每组按不同采样时间又分为第7天、第14天、第28天、第42天、第56天5个亚组,每组6只。染尘组及处理组大鼠以非气管暴露法气管内注入1 mL二氧化硅混悬液(50 mg/mL);处理组每日经食道灌注银杏叶提取物混悬液(100 mg/kg);正常对照组灌入等剂量生理盐水,处理对照组灌入等剂量银杏叶提取物混悬液。分别检测肺组织中羟脯氨酸、血管内皮生长因子受体-3(VEGFR-3)及淋巴液中硅元素水平。[结果]染尘组和处理组与对照组相比,大鼠染尘后VEGFR-3及淋巴液硅元素水平均在时间上呈先增高后降低趋势,于第14天达高峰;羟脯氨酸含量持续增加。与染尘组比较,处理组第28~56天VEGFR-3水平升高(P0.05),淋巴液硅元素水平在第7~28天亦升高(P0.05);各时间点处理组羟脯氨酸含量均低于染尘组(P0.05)。Pearson相关性分析显示,染尘组及处理组淋巴液硅元素与肺组织VEGFR-3均呈正相关(r=0.651,P0.01;r=0.613,P0.01);硅元素与肺组织羟脯氨酸均呈负相关(r=-0.786,P0.01;r=-0.899,P0.01)。[结论]银杏叶提取物可能通过促进淋巴循环,加快肺内二氧化硅的排除。     

HPLC法测定线叶旋覆花中1，5-二咖啡酰奎宁酸含量

目的：建立线叶旋覆花中1,5－二咖啡酰奎宁酸（IBE－5）的HPLC测定方法。方法：采用高效液相色谱法，色谱条件：Seienhome C18（250mm×4．6mm，5μm），流动相：甲醇－乙腈－5％醋酸（5：20：75，V／V/V），流速：0．8ml／min，柱温：25℃，检测波长：327nm。结果：IBE-5在0．3-1．5 μg／ml之间与峰面积呈现良好的线性关系，其回归方程为Y=3397．5X-46．92，r=0．9999，平均加样回收率为103．5％，RSD为2．28％（n=3），旋覆花中IBE-5的平均含量为2．35％。结论：该测定方法简便、准确、分离效果好，可用于测定线叶旋覆花中IBE-5的含量。     

抑制PPARγ对游离SiO_2诱导肺泡巨噬细胞CD36表达及脂质蓄积的调节作用

[目的]探讨在游离SiO_2诱导大鼠肺泡巨噬细胞泡沫化过程中抑制过氧化物酶增殖体激活性受体(PPARγ)对CD36表达以及脂质蓄积的调节作用。[方法]常规体外培养大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383细胞,给予PPARγ特异性抑制剂GW9662阻断PPARγ信号通路,观察细胞的泡沫化情况;细胞分为抑制剂组(GW9662)、溶剂对照组(DMSO)、实验组(GW9662+SiO_2+ox-LDL)、模型组(DMSO+SiO_2+ox-LDL),培养36 h。油红O染色镜下观察脂质蓄积情况;酶法测定细胞中总胆固醇、游离胆固醇表达情况,计算胆固醇酯占总胆固醇的比例,鉴定泡沫细胞的形成;应用Western blot和实时荧光定量聚合酶链式反应技术分别检测PPARγ和CD36的蛋白和基因表达情况。[结果]实验结果显示,与模型组[(31.41±1.36)mg/g]比较,实验组[(8.78±0.49)mg/g]、抑制剂组[(6.23±0.27)mg/g]和溶剂对照组[(6.99±0.30)mg/g]细胞内总胆固醇含量明显降低(P0.05);且实验组(28.43%)、抑制剂组(27.02%)和溶剂对照组(24.92%)的胆固醇酯占总胆固醇比例均小于50%,3组之间差异没有统计学意义(P0.05);与模型组相比,实验组泡沫细胞数目明显减少。实验组CD36蛋白(0.55±0.13)和m RNA(1.30±0.39)表达也较模型组[分别为(1.08±0.31)和(3.38±0.70)]明显降低(P0.05)。[结论]游离SiO_2所诱导的CD36表达可能是由PPARγ介导所致。     

功能化修饰多壁碳纳米管对人外周血单个核细胞的毒性研究

目的 探讨不同功能化修饰的多壁碳纳米管(F-MWCNTs)对人外周血单个核细胞(PBMC)的细胞毒性的影响.方法 利用透射电镜表征5种直径和长度均相同的MWCNTs(羟基、羧基、氨基、镀镍修饰和未修饰的MWCNTs(P-MWCNTs))在生理盐水溶液中的分散性.体外实验中先通过Ficoll密度梯度离心从人外周血中分离出PBMC,再将5种MWCNTs分别超声分散于含血清的培养基中,与PBMC共培养12、24、48、72 h,通过CCK-8试剂盒检测5种MWCNTs对PBMC的细胞毒性.结果 5种MWCNTs的分散性相对良好,尤其是各F-MWCNTs.细胞毒性实验结果 表明,MWCNTs的细胞毒性呈剂量-效应关系和一定的时间-效应关系.F-MWCNTs与P-MWCNTs相比,细胞毒性发生显著变化,其中羟基、羧基和氨基修饰的MWCNTs的细胞毒性减小,尤以氨基修饰的细胞毒性减小最为显著(P＜0.05);而镀镍修饰的MWCNTs的细胞毒性反而明显增大,其处理细胞24 h和48 h时的细胞存活率较同剂量(25 μg/ml)的P-MWCNTs均有所降低,差异均有统计学意义(P＜O.01,P＜0.05).结论 功能化修饰不仅影响MWCNTs在水溶液中的分散性,还影响MWCNTs对人外周血淋巴细胞的细胞毒性.