一对可以用于喜马拉雅旱獭性别鉴定的引物筛选

目的从用于黄鼠性别鉴定的sw和smcY引物中筛选出能够用于喜马拉雅旱獭性别鉴定的引物。方法用1对sry引物和4条smcY引物的3对组合对已知性别的雌雄各10只喜马拉雅旱獭基因组DNA进行扩增,同时,用1对微卫星引物来验证反应体系的有效性。结果在验证了PCR反应有效性的前提下,sry引物从100～1000bp间扩增出多个条带,且未发现雄性特异性条带,smcY引物组合1在雄性旱獭中扩增出100bp左右的亮带,但是部分雌性样品中在600bp左右扩增出较弱的条带,组合2未扩增出任何条带,组合3的所有雄性在250bp处扩增出明亮的条带,雌性个体中未见任何条带。结论smcY引物组合3可以用于喜马拉雅旱獭性别鉴定。     

22种配方驱避剂驱蚊效果观察

目的观察不同配方的驱避剂驱蚊效果,筛选效果较好的配方。方法采用实验室（GB/17322.10-1998）和现场的药效测试方法进行效果测试。结果 20种配方的驱避剂中有10种对实验室饲养的白纹伊蚊有效保护率〉80%,平均驱避效果在10h以上;2种现场试验使用配方3组,试验的平均有效保护时间分别为4.8、4.5、4.8h。结论现场试验效果较实验室效果差,可能由于夏季出汗较多、活动量大,致使驱避剂被擦失或被皮肤吸收等造成。由于实验室试验与现场试验使用的不是同一种配方,还需要进一步试验证实各种驱避剂的驱避效果。     

黄胸鼠微卫星分子标记的筛选

目的研究黄胸鼠不同地理区域种群的遗传差异,用磁珠富集法筛选其微卫星位点。方法将黄胸鼠基因组DNA用限制性内切酶消化后的小片段与接头连接,再用生物素标记的(AC)15重复序列探针与酶切片段杂交,应用链霉素亲和磁珠捕获300～600bp含有微卫星序列的DNA片段,通过载体转化到JM109感受态细胞中,构建富集微卫星序列的小片段插入文库,测序后设计引物并筛选。结果本次实验从约900个转化子中获得304个阳性克隆,对其中140个进行测序,并成功设计黄胸鼠微卫星引物13对。结论筛选出的13对微卫星引物多态性高,能稳定扩增出目标条带,可用于种群遗传研究。     

BHMT用于检测急性中毒性肝损伤的价值

目的分析甜菜碱高半胱氨酸甲基转移酶(BHMT)用于检测急性中毒性肝损伤的临床价值。方法采用ELISA法检测血清样本中的BHMT,检测样本为健康体检者血清和急性中毒患者血清。结果 ELISA法检测健康体检者血清样本300例,300例健康体检血清中BHMT的平均水平为9.02ng/mL(6.19~12.84ng/mL)。健康人群血清中BHMT水平的95%医学参考值范围为0.00~28.01ng/mL;ELISA法检测43例急性中毒患者的血清样本,经Spearman秩相关分析,提示BHMT和丙氨酸氨基转移酶(ALT)之间有较好的正相关关系(rs=0.757 62,P0.001);ELISA法检测20例肾损伤病例和20例健康体检者血清中的BHMT水平,提示肾损伤患者与健康体检者血清中BHMT水平的差异无统计学意义(P0.05)。结论健康人群血清中BHMT水平的医学参考值范围为0.00~28.01ng/mL;急性中毒患者血清中的BHMT与其对应的ALT之间有很好的正相关关系;BHMT水平的变化可能与肾损伤无关,其反映肝损伤的特异性较好,因此推测BHMT可能是更好的急性肝损伤的血清学标志物。     

长角血蜱感染汉赛巴尔通体后血淋巴超氧化物歧化酶变化的初步研究

目的测定长角血蜱（Haemaphysalis longicornis）感染汉赛巴尔通体（Bartonella henselae）后不同时间段超氧化物歧化酶的活性。方法用Hamilton 10μL微量进液器将汉赛巴尔通体菌液悬浮液（浓度为10^5cfu／μ）,通过假头与盾板间缘凹处注入已部分吸血的未交配的长角血蜱成蜱血腔内,在染毒后1h,6h,12h,24h及48h后收集长角血蜱的血淋巴,使用南京建成超氧化物歧化酶（SOD）试剂盒测定其血淋巴中SOD的活性。同时设立生理盐水对照组,对比两组之间及两组内各时间点是否存在差异。结果对收集到的不同时间段的血淋巴测定超氧化物岐化酶的活性后发现,实验组在感染后48h内,酶活性一直处在平稳的水平;生理盐水对照组SOD酶活性随着时间的延长先升高后又降低,在12h达到（11．1999±1．3248）U／mL,并且与实验组此时间段的酶活性相比有统计学差异（P=0．036）;而在48h降为最低,与1h的酶活性相比有统计学差异（P=0．000）。结论长角血蜱受到一定浓度的汉赛巴尔通体攻击后,血淋巴SOD酶活性在一段时间内受到了抑制。     

首次在长角血蜱中检测到汉赛巴尔通体

目的检测长角血蜱中汉赛巴尔通体的携带情况。方法将采获于石家庄市灵寿县的长角血蜱分组,经无菌处理后研磨匀浆,一部分直接提取DNA进行PCR检测,另一部分接种于含5%去纤维羊血的胰酶大豆培养基上,在37℃,5%CO2的培养箱中进行培养后,挑取疑似菌落进行PCR检测。对所得阳性条带的PCR产物测序,并将所测核酸序列在Gen Bank中进行序列比对。结果菌落提取的DNA样品中有2个样品出现阳性条带,但测序未得结果;直接提取的DNA样品中有1个样品出现阳性条带,经过同源性比对后为汉赛巴尔通体。结论石家庄市灵寿县采集到的长角血蜱中存在汉赛巴尔通体感染,这是首次在长角血蜱中检测到汉赛巴尔通体。