利用酵母双杂交技术筛选鉴定STCH与RanBP9的相互作用

以人应激和分子伴侣蛋白(STCH)为诱饵蛋白,利用酵母双杂交技术在高严格条件下筛选人脑cDNA文库。在SD/-4培养基上共获得156个阳性克隆,将酵母菌扩增后抽提质粒,转化大肠杆菌,进行序列分析,并经过回复杂交验证,潜在的与STCH相互作用的蛋白有:VDAC、MBP2、ZNF251、RanBP9、Phosophate glycolase、β-tubulin、up1、up2和WW adaptor蛋白。基于各候选蛋白与神经系统疾病的关系,选择RanBP9作进一步验证实验。经体外GST-Pulldown和体内免疫共沉淀实验证实RanBP9和STCH能够相互作用,明确RanBP9的羧基端为相互作用的最小功能域。此结果为我们进一步揭示STCH作用的分子机制提供了线索。     

相位角评估喉癌病人营养状况可行性研究

目的:探讨相位角(PA)评估喉恶性肿瘤病人营养状况的可行性.方法:收集140例喉癌住院病人,术前使用Inbody S 10行人体成分分析、记录PA值,同时进行营养筛查与评估、体格测量与实验室检查.分析PA与营养相关指标的相关性,并以病人主观整体评估(PG-SGA)为营养评价标准,绘制PA的受试者工作特征(ROC)曲线,进而根据截断值分为低PA组与高PA组,计算低PA组营养不良的相对危险度.结果:PA与体质量、BMI、上臂围、上臂肌围、总蛋白、前白蛋白、血红蛋白呈正相关(P＜0.05),与年龄、细胞外水分率(ECW/TBW)呈负相关(P＜0.05);PA的ROC曲线下面积0.71(P＜ 0.01),诊断为营养不良的PA截断值为5.89,灵敏度0.69,特异度0.68,约登指数0.37;低PA组营养不良的比例(71.2％)明显高于高PA组(34.3％),与高PA组相比,低PA组发生营养不良的相对危险度为2.28(95％CI,1.53 ～ 3.41).结论:相位角与喉癌病人的营养状况密切相关,在喉癌病人营养不良的诊断中具有一定的临床应用价值.     

成年起病脊肌萎缩症SMN基因外显子7缺失的初探

目的探讨成年起病的脊肌萎缩症(SMA)患者的运动神经元存活基因SMN的缺失情况。方法用聚合酶链反应-酶切技术对15例SMA病人及33例正常对照的外显子7进行检测,明确有无缺失。结果3例SMA的SMN基因外显子7纯合缺失,其余12例和对照组均阴性。结论SMN基因外显子7缺失可作为成年起病SMA的辅助诊断,以提示SMA遗传的异质性。     

PCR介导化学合成广谱细胞生长因子基因半分子

目的建立一种通过PCR介导的单链法人工合成基因的新方法.方法采用固相亚磷酰胺法,化学合成广谱细胞生长因子基因5′端半分子各寡核苷酸片段,其间按搭桥方式相接,通过重叠PCR扩增的方法以获得全长半分子基因,再通过带酶切位点的两端引物扩增,以获得大量特异的半分子基因,而后克隆,测序,筛选阳性重组子.结果随机检测4个阳性重组子,有3个序列完全正确,一个有一位点突变.结论 PCR介导的单链化学合成法是一种简单、有效的人工合成基因的新方法.     

人工合成广谱细胞生长因子全基因

目的利用PCR介导的半酶促半化学法人工合成经改造的广谱细胞生长因子基因.方法将基因依据其限制性内切酶切点分为左中右三个区段.化学合成若干寡核苷酸小片段,利用PCR的方法介导寡核苷酸小片段之间的连接.最后将三条基因区段组合为完整的基因.结果各区段及全基因的序列经测定与设计方案完全相符.结论广谱细胞生长因子基因的成功合成为将来的表达与应用研究创造了条件,同时证明PCR介导的人工基因合成法是一种简便快速并且行之有效的人工基因合成的新方法.     

上海大学生非酒精性脂肪肝与载脂蛋白E基因多态性的关系

目的 探讨上海大学生非酒精性脂肪肝(NAFLD)的患病率及与载脂蛋白E(ApoE)基因多态性的相关性.方法 对上海同济大学4 148名在校学生进行问卷调查;采用肝脏超声以及血肝功能、脂蛋白等生化指标检测,将确诊的NAFLD患者与正常者200例,进行外周血PCR-RFLP检测ApoE基因多态性.结果 (1)4 148名大学生中NAFLD检出398例(9.6%),NAFLD患者的体重指数、腰臀比、甘油三酯、总胆固醇、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶均高于对照组(P＜0.01),且随NAFLD程度加重,有递增趋势.(2)NAFLD组和对照组ApoE基因型分布比较差异显著(,P＜0.01).NAFLD E4/4基因型分布频率(5.5%)明显升高,E3/3分布频率(61.8%)明显减低(均P＜0.01).(3)非条件logistic回归分析显示总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、腰臀比、AST、ALT、GGT与E4/4基因型密切相关.结论 ApoE基因112位和158位的氨基酸残基发生相应的变化可引起不同程度的脂质代谢障碍,E4/4可能是导致NAFLD发生的遗传因素之一.     

老年人同型半胱氨酸相关危险因素分析

目的调查分析东风公司退休职工健康检查人群中血浆总同型半胱氨酸(t Hcy)与高血压及其主要危险因素的关系。方法对9 328例退休职工进行空腹抽血查t Hcy,测定高血压、体重指数(BMI)、腰臀比值(WPH)及超体重。结果 t Hcy总阳性率为30.4%,其中男性t Hcy阳性率为45.6%,女性为18.8%,性别间t Hcy阳性率差异有统计学意义(P0.01);t Hcy阳性率随年龄增长而上升,尤其以71岁后的男性最为突出,阳性率为51.8%。当t Hcy正常时,高血压的患病率为16.9%;当t Hcy异常时,高血压的患病为23.2%,两者之间差异有统计学意义(P0.01)。从高t Hcy水平看,t Hcy对收缩压或舒张压有一定的影响,当t Hcy正常时,单纯收缩压升高为45.6%,单纯舒张压升高为18.1%;当t Hcy异常时,单纯收缩压升高为57.7%,单纯舒张压升高为24.7%,两者之间差异亦有统计学意义(P0.01)。当BMI正常时,t Hcy阳性率为28.5%;当BMI异常时,t Hcy阳性率为33.3%,两者之间差异有统计学意义(P0.01)。当WPH正常时,t Hcy阳性率为33.7%;当WPH异常时,t Hcy阳性率为28.2%,两者之间差异有统计学意义(P0.01)。而超体重正常与异常时,t Hcy阳性率两者差异亦有统计学意义(P0.05)。结论年龄、性别、WPH、BMI均是t Hcy的危险因素,与t Hcy的水平具有一定的关系。     

甲状腺素对仔鼠脑NAPOR基因表达的影响

目的研究甲状腺素对仔鼠脑成纤维母细胞瘤凋亡相关的RNA结合蛋白(neuroblastoma apoptosis-related RNA-binding protein,NAPOR)基因表达的影响。方法以丙基硫氧嘧啶灌胃复制孕鼠甲状腺功能低下模型,采用逆转录-聚合酶链反应检测仔鼠出生后第1、5、10天仔鼠皮层NAPOR的表达,年龄匹配的正常仔鼠为对照组。结果NAPOR在甲状腺功能低下孕鼠所产仔鼠表达均高于正常对照组;在出生后一段时期内,随着鼠龄增长表达降低。结论转录后水平的调节机制可能参与甲状腺素对脑基因表达的影响。     

慢性乙型肝炎肝纤维化辨证分型与肝纤维化病理及血清学指标的相关性研究

目的:探讨慢性乙型肝炎(CHB)肝纤维化证型分布与血清肝纤维化指标及肝纤维化病理分期的相关性.方法:对确诊的171例CHB肝纤维化患者进行辨证分型,并观察肝纤维化病理分期、肝纤维化4项与辨证分型的关系.结果:肝郁脾虚型主要见于在肝纤维化早期(S1),瘀血阻络型主要见于肝纤维化中晚期(S3～S4),两者比较,各病理期的分布有显著性差异(P＜0.01);脾肾阳虚型、瘀血阻络型HA含量显著高于肝郁脾虚型,差异有显著性意义(P＜0.05或P＜0.01);瘀血阻络型HA含量高于肝肾阴虚型和湿热中阻型,差异有显著性意义(P＜0.05);瘀血阻络组LN和Ⅳ-C含量明显高于肝郁脾虚型,差异有显著性意义(P＜0.05);各证型患者血清PCⅢ含量差异无显著性意义(P＞0.05).结论:CHB肝纤维化不同病理阶段,证型分布发生相应变化,并与肝纤维化指标具有显著相关性.     

点按手法结合练功治疗腰椎间盘突出症100例

2002～2005年,我们采用点按手法结合练功治疗腰椎间盘突出症100例,现报告如下. 1 资料与方法 1.1 一般资料 本组100例均为我院骨伤科门诊患者,男55例,女45例;年龄最大58岁,最小22岁,平均38岁;腰痛伴双下肢疼痛6例,腰痛伴右下肢放射痛44例,腰痛伴左下肢放射痛50例.临床表现为卧床后症状减轻,站立或劳累后症状加重.L3～4突出5例,L4～5突出55例,L5～S1突出28例,L4～5、L5～S1突出12例.