甘露糖抑制内质网应激促进胰岛β细胞存活

目的 1型糖尿病(type 1 diabetes,T1D)是由于胰岛β细胞受自身免疫系统的破坏,而导致胰岛素缺乏和血糖升高的一种自身免疫性疾病,胰岛β细胞内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)是其发病的重要因素。甘露糖是一种葡萄糖的差向异构体,新近发现其具有减缓甚至阻断T1D进展的作用,但具体机制仍待进一步阐明。方法通过ERS诱导剂(TG/TM)处理NIT-1细胞,荧光定量PCR检测内质网应激标志物mRNA表达水平,CCK-8法检测细胞生存活力,台盼蓝法鉴定细胞生死状态。结果给予适宜浓度的甘露糖预处理,可改善ERS诱导剂引起的胰岛β细胞系(NIT-1)细胞活力下降并逆转ERS诱导剂引发的BiP、ATF4及CHOP mRNA水平升高。结论甘露糖可抑制NIT-1细胞的过度ERS,进而减少凋亡,促进存活,为甘露糖用于治疗T1D提供了新的理论依据。     

肝浸润CD8~+T细胞在HFD诱导的小鼠NAFLD早期病变中的变化

目的建立高脂饮食(high fat diet,HFD)诱导的小鼠非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型,动态监测其血清生化指标、肝脏病理形态学及肝脏浸润T淋巴细胞变化,从而探讨NAFLD早期肝病变动态进展特征。方法 4～6周龄C57BL/6雄性小鼠随机分成正常饮食(normal-chow diet,NCD)组和HFD组,喂养2～16周后,禁食不禁饮12 h后获取血清和肝组织样本,检测血清肝脏相关生化指标水平,肝脏HE和油红O染色观察组织病理学改变,提取肝浸润淋巴细胞,并检测CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD8~+CD44~+T淋巴细胞的频率及CD8~+T淋巴细胞分泌IFN-γ的能力。结果与NCD组相比,HFD组小鼠体质量和附睾脂肪质量在第4周明显增加,而肝脏指数在2～8周内降低,第10周开始持续上升;HFD喂养小鼠血清肝损伤指标于第8周开始上升,之后持续增加;HE和油红O染色显示第10周小鼠肝细胞发生明显脂肪样变,并在第16周时出现片状气球样变,可见点状坏死和炎细胞浸润等病理改变;流式染色结果显示,HFD喂养2～8周内肝浸润CD3~+CD8~+,CD8~+CD44~+T细胞的频率及CD8~+T细胞分泌IFN-γ的能力下降;在HFD持续喂养10周后,肝CD3~+CD8~+,CD8~+CD44~+T细胞的频率及CD8~+T细胞分泌IFN-γ的能力增加。结论在本实验条件下,HFD诱导的小鼠NAFLD肝损伤模型,早期病变始于HFD喂养8到10周,并动态观察到HFD喂养初期肝脏浸润CD8~+T细胞的功能受到抑制,而在肝脏出现明显病变的同时CD8~+T细胞也明显激活,频率上升及促炎反应增强。提示CD8~+T细胞激活可能与肝脏病理进展密切相关,并明确了该模型中肝浸润CD8~+T细胞激活扩增的阶段,为进一步研究其活化机制奠定实验基础。     

木犀草素对肝纤维化的防护作用及其机制

木犀草素是一种广泛存在于多种植物中的黄酮类化合物.现代研究证实,木犀草素存在多种药理作用,主要表现在抗菌、抗炎、抗氧化、免疫调解等.其对保护肝纤维化方面的作用也较突出,其主要机制可能与木犀草素能够抑制肝脏胶原表达合成和抑制肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSC)的增殖、活化有关.结合国内外对木犀草素及肝纤维化的研究资料,笔者对木犀草素对肝纤维化的防护作用及其机制做进一步阐述和说明.