产超广谱β-内酰胺酶鲍曼不动杆菌耐药机制的研究进展

广谱抗生素的广泛应用使鲍曼不动杆菌的耐药率不断升高，已成为日益严重的医疗事件和公共卫生问题，引起了人们的高度关注。目前在鲍曼不动杆菌已经发现了多种超广谱β-内酰胺酶（ESBL）的基因型，特别是近年来新ESBL基因型不断地在该菌中被发现，如PER型、VEB型，但对其耐药机制仍不明确。因此，对于鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶的耐药机制深入研究势在必行。     

二甲双胍抑制慢性哮喘小鼠气道炎症、重塑及新生血管形成

目的:探讨二甲双胍对慢性哮喘气道炎症、重塑及新生血管形成的影响及可能机制。方法:采用卵白蛋白(OVA)致敏并激发制备慢性哮喘小鼠模型,给予二甲双胍干预,与生理盐水对照组和慢性哮喘模型组相比,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)细胞计数、外周血免疫球蛋白、气道重塑及磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(pAMPK)蛋白水平的变化。结果:慢性哮喘小鼠BALF细胞总数及嗜酸性粒细胞百分比较对照组升高(P0.01),血清OVA特异性IgE明显升高(P0.01),给药组可降低上述指标(P0.05)。肺组织HE染色可见气道壁炎症细胞浸润、杯状细胞增生、上皮下胶原沉积等病理改变,免疫组化CD31染色观察到气道上皮下新生血管数目和面积增加;二甲双胍部分抑制了上述病理过程。肺组织免疫组化p-AMPK染色观察到其在模型组气道壁的表达较对照组下降(P0.05),给药组升高明显(P0.01)。结论:慢性哮喘中AMPK磷酸化表达水平受抑制。二甲双胍可能通过激活AMPK来抑制慢性哮喘气道炎症、重塑及新生血管的形成。     

粒细胞活化、组蛋白去乙酰化酶2与重症哮喘关系的临床研究

目的 了解粒细胞活化和组蛋白去乙酰化酶2 (histone deacetylase 2,HDAC2)表达与重症哮喘的关系,以探索早期预测和辨别重症哮喘的生物标志物.方法 采用ELISA法测定受试者血清粒细胞活化标志物髓过氧化物酶(myeloperoxidase,MPO)、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP-9)、中性粒细胞弹性蛋白酶(neutrophil elastase,NE)及嗜酸粒细胞阳离子蛋白(eosinophil cationicprotein,ECP)水平,Western-blot测定外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs) HDAC2活性,分别比较重症哮喘组、轻中度哮喘组及健康对照组各指标并进行统计学分析.结果 ①重症哮喘组受试者粒细胞活化指标MPO[(102.43±28.19)μg/L]、MMP-9[(992.97±176.44) ng/L]、NE[(9.40±0.99)μg/L]及ECP[(232.85±48.37) μg/L]浓度值均显著高于轻中度哮喘组[MPO、MMP-9、NE及ECP分别为:(48.56±8.78) μg/L、(554.35±99.03) ng/L、(8.01±1.27) μg/L、(105.30±26.93) μg/L,P值均＜0.05]和正常对照组[MPO、MMP-9、NE及ECP分别为:(37.46±9.93) μg/L、(374.00±79.08) ng/L、(4.66±0.64) μg/L、(40.87±15.35) μg/L,P＜0.05];轻中度哮喘组受试者外周血MMP-9、NE及ECP浓度值显著高于正常对照组(P＜0.05);轻中度哮喘组与正常对照组比较MPO浓度值差异无统计学意义(P＞0.05);②重症哮喘组PBMCs HDAC2活性(HDAC2/GAPDH:0.19±0.09)较轻中度哮喘组(0.60±0.08)及正常对照组(1.09±0.26)均显著降低,差异有统计学意义(P＜0.05);轻中度哮喘组PBMCs HDAC2活性较正常对照组低,差异有统计学意义(P＜0.05);③MPO、MMP-9、NE及ECP与FEV1％ pred之间呈负相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r值分别为:-0.60、-0.75、-0.43和-0.67,P＜0.01);与FEV1/FVC之间呈负相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r值分别为:-0.52、-0.60、-0.42和-0.50,P＜0.05);与ACT之间呈负相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r值分别为:-0.69、-0.67、-0.50和-0.70,P＜0.01);④HDAC2与FEV1％pred及FEV1/FVC之间呈正相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r值分别为0.68和0.61,P＜0.01);与ACT之间呈正相关,双侧Pearson检验差异有统计学意义(r=0.68,P＜0.01).结论 粒细胞活化指标MPO、MMP-9、NE和ECP升高提示重症哮喘患者存在中性粒细胞和嗜酸粒细胞活化,其程度显著高于轻中度哮喘患者;PBMCs HDAC2在重症哮喘组明显降低提示该类患者的皮质激素敏感性降低,激素治疗的效果可能不佳.     

西安地区耐亚胺培南鲍曼不动杆菌的碳青霉烯酶及同源性研究

目的 调查西安地区耐亚胺堵南鲍曼不动杆菌的耐药性,研究其同源性及分子耐药机制.方法 收集西安地区6所三级甲等医院1年间临床分离的非重复鲍曼不动杆菌株146株,采用K-B法进行药敏试验,E试验检测金属酶(MBL),PCR扩增OXA-23,-24,-58,-51 like型及IMP-1型和VIM-2型碳青霉烯酶基因,其阳性产物经测序分析,应用肠杆菌科基因组内重复序列(ERIC)-PCR对菌株进行DNA分型和同源性分析.结果 筛选出对亚胺培南耐药鲍曼不动杆菌(IRAB)非重复株1 5株,其中1株经E试验检测产金属酶,但扩增blaTMP-1,blaVIM-2均阴性,另外14株扩增blaOXA-66均阳性,11株blaUXA-23阳性,1株blaXA 58阳性;ERIC-PCR将15株IRAB分为A型和B型,其中部分菌株的亲缘关系很近,同源性达90%以上.结论 产OXA型碳青霉烯酶是西安地区该菌对亚胺培南耐药的主要原因.其中OXA-23型普遍存在,OXA-58型和OXA-66型基因在国内尚属新型碳青霉烯酶基因型;15株IRAB为2种克隆型,可能存在局部暴发流行.     

Microsim医学模拟培训系统在实习学员临床思维培训中的应用

目的　评估Microsim 医学模拟培训系统在实习学员临床思维培训中的价值及可行性。方法　以2009级、2010级临床医学五年制96名学员为研究对象,随机分组为两组,每组48人。A组在呼吸内科临床实习3周后通过Microsim医学模拟培训系统进行病例学习1周,B组在呼吸内科临床实习4周。观察两组学员实习结束后临床思维考核成绩及教学满意度,数据应用SPSS 17.0进行统计分析,计量资料进行配对t 检验,计数资料采用χ2检验。结果　Microsim医学模拟培训系统评估报告得分[（89.37±7.18） vs. （61.95±15.34）],组间差异有统计学意义。学员临床思维能力考核中得分,分析问题能力[（89.95±4.02） vs. （75.51±6.34）]、处理问题能力[（78.81±8.09） vs. （59.67±9.33）]、处理流程[（86.74±6.59） vs. （70.39±7.05）]和处理效果[（88.61±8.16） vs. （63.54±11.48）]方面,２组间差异有统计学意义。但沟通交流得分[（82.47±5.23） vs. （84.09±3.72）],组间无统计学差异。89.6%（43人）的学员认为Microsim医学模拟培训系统能明显提高临床思维能力,但只有58.3%（28人）的学员认为能巩固基本理论知识。结论　Microsim医学模拟培训系统可提高学员临床思维能力及临床综合处置能力,可作为临床实习教学的有效补充。     

骨形态构建蛋白 2型受体下调单核细胞趋化蛋白 1/CC类趋化因子受体 2通路对哮喘小鼠气道炎症和 Th1/Th2平衡的影响

目的探究骨形态构建蛋白 2型受体( BMPR2)对小鼠哮喘模型气道炎症和 Th1/Th2平衡的影响及其机制。方法2021年 9月至 2022年 11月选用 24只 C57BL/6小鼠尾静脉注射 BMPR2腺病毒,随后卵清蛋白( OVA)致敏和激发建立哮喘小鼠于模型;采用随机数字表法分为对照组(生理盐水替代 OVA造模)、 OVA模型组( OVA诱导小鼠哮喘模型)、 OVA+载体( Vector)组(空载慢病毒处理的 OVA哮喘模型小鼠)OVA+BMPR2组( BMPR2过表达慢病毒处理的 OVA哮喘模型小鼠),每组 6只。收集支气管肺泡灌洗液( BALF)和肺组织。免疫、组织化学检测肺组织 BMPR2表达水平;苏木精 -伊红染色观察肺组织病理学改变;瑞氏染色后计数 BALF中各类炎症细胞数目;酶联免疫吸附测定( ELISA)试剂盒检测 BALF中白细胞介素( IL)-4,IL-5和 IL-13炎症因子水平;蛋白质印迹法检测肺组织和气道上皮细胞 16HBE中 BMPR2、单核细胞趋化蛋白 -1(MCP1)及其受体 CC类趋化因子受体 2(CCR2)蛋白表达水平。免疫共沉淀实验检测 BMPR2与 MCP1相互作用。结果与对照组相比, OVA模型组肺组织 BMPR2(0.36±0.05比 1.04±0.04)显著降低(P<0.01);小鼠肺泡破坏程度严重,肺组织有大量的淋巴细胞浸润; BALF中炎症细胞总数［(93.25±9.32)×104个/毫升比( 4.79±0.41)×104个/毫升, P<0.001］、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均升高; Th1相关炎症因子 γ干扰素( IFN-γ)水平降低, Th2相关炎症因子 IL-4,IL-5和 IL-13水平升高。过表达 BMPR2可降低肺泡破坏程度和淋巴细胞浸润程度。与 OVA+Vector组相比, OVA+BMPR2组 BALF中炎症细胞总数、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞和淋巴细胞均降低; ELISA结果表明, OVA+BMPR2组 BALF中 IFN-γ水平升高, IL-4,IL-5和 IL-13水平降低,提示过表达 BMPR2可上调 Th1百分比,下调 Th2细胞百分比。进一步研究表明, BMPR2过表达显著下调了 MCP1及其受体 CCR2的表达水平,且 BMPR2与MCP1存在相互作用。结论 BMPR2可通过下调 MCP1/CCR2通路降低哮喘小鼠气道炎症,并调节 Th1/Th2平衡。     

慢性血栓栓塞性肺动脉高压的流行病学研究

目的调查西京医院呼吸与危重症医学科确诊肺栓塞患者中慢性血栓栓塞性肺动脉高压(CTEPH)的发病率及诊疗状况,为完善我国CTEPH的临床流行病学资料提供依据。方法采用回顾性研究的方法,调查2008年1月至2012年5月西京医院呼吸与危重症医学科确诊肺栓塞患者中CTEPH的发病率及诊疗状况。结果 CTEPH的发病率为5.24%。62.90%的静脉血栓栓塞/肺栓塞(VTE/PE)患者危险因素不详,53.85%的CTEPH患者危险因素不详。CTEPH中38%无VTE病史,62%无明显的急性肺动脉栓塞事件。所有CTEPH患者均未行肺动脉内膜剥脱术(PTE)治疗,53.85%的患者仅给予抗凝治疗。结论西京医院呼吸与危重症医学科发现的CTEPH的发病率较高,与临床医生对CTEPH的危险因素认识不足,对肺栓塞的溶栓、抗凝治疗不够充分有关,故急需提高临床医生对CTEPH的规范化诊疗水平。     

慢性阻塞性肺疾病急性加重期合并社区获得性肺炎患者可溶性血管内皮生长因子受体-1表达临床观察

目的 探讨可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-l)在慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)合并社区获得性肺炎(CAP)患者体内表达水平.方法 选取肺部疾病患者98例,根据疾病类型分为CAP组(n=47)、AECOPD组(n= 33)、AECOPD+CAP组(n=18),记录患者超敏肌钙蛋白T、降钙素原、血细胞...     

西安地区鲍曼不动杆菌超广谱β-内酰胺酶基因研究

目的 明确西安地区临床分离的鲍曼不动杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型,研究多重耐药菌株的耐药机制.方法 采用K-B法测定鲍曼不动杆菌对15种抗菌药物的敏感性,利用改良三维试验进行表型确认,对表型检测阳性及阴性菌株采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析β-内酰胺酶基因型.结果 共有84株产ESBLs,其中有45株产PER-1型ESBLs,58株产TEM-1型ESBLs,19株同时产PER和TEM两型ESBLs,未扩增出SHV型ESBLs.改良三维试验阳性菌株有4株未扩增出ESBLs,改良三维试验阴性菌株有13株扩增出ESBLs.结论 西安地区临床分离的鲍曼不动杆菌至少存在2种不同类型的ESBLs,基因型分别为PER-1、TEM-1,且同一质粒携带2种或2种以上ESBLs编码基因在西安地区有流行的趋势.     

动态观察过敏原诱导的哮喘小鼠模型从急性炎症到慢性重塑的发展

目的:动态观察对比卵白蛋白(OVA)诱导的哮喘小鼠模型从气道的急性炎症到慢性重塑的相关炎症指标及气道重塑指标的变化。方法:60只雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组和哮喘组。哮喘组给予OVA致敏和激发,正常对照组给予等量生理盐水(NS)作为对照,第21天开始,连续激发3 d,观察急性炎症反应;而后每周激发1次、每次激发后24 h内取材1次连续5周;动态观察对比OVA激发组和NS对照组小鼠气道炎症细胞的浸润情况、灌洗液细胞因子水平和气道重塑相关指标。结果:与NS组比较,OVA组肺组织的炎症细胞浸润明显,炎症因子升高;气道上皮细胞向杯状细胞转化明显;支气管外周胶原沉积显著。OVA组内比较,24 d组炎症细胞和炎症因子上升明显,而上皮细胞向杯状细胞的转化以及支气管外周胶原沉积相关重塑指标不明显,52 d组上皮细胞向杯状细胞的转化以及支气管外周胶原沉积相关重塑指标最为显著,而炎症细胞和炎症因子有所下降。结论:连续3次OVA激发可成功模拟炎症细胞和炎症因子显著的急性哮喘模型;每周1次、连续5周的OVA激发方式可成功模拟重塑明显的慢性哮喘模型。