慢性阻塞性肺疾病进程与肺支气管上皮细胞MRP1功能改变的相关性研究简

目的：研究慢性阻塞性肺疾病（COPD）进程与肺支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1（MRP1）功能改变的相关性。方法：采用烟熏复合雾化吸入木瓜蛋白酶法制备COPD模型大鼠,将制备过程中的大鼠随机分成不同进程组,抑制剂组（在造模过程中给予MRPl抑制剂丙磺舒组）,另设正常对照组和丙磺舒对照组。以上各组均测定大鼠的肺功能;除抑制剂组外,分别测定大鼠的肺上皮细胞通透性,检查肺上皮细胞完整性;并在静脉注射酚红后,测定支气管肺泡灌洗液（BALF）中酚红浓度和血浆中酚红浓度,以BALF中酚红浓度／血浆中酚红浓度的比值为评价COPD肺支气管上皮细胞MRP1的功能指标。结果：随着造模的进程,COPD大鼠肺功能逐渐降低,造模45d后差异具有统计学意义;BALF中酚红浓度/血浆中酚红浓度的比值逐渐降低,但各组肺上皮细胞通透性功能未发生明显改变;肺上皮细胞完整性良好。与正常对照组比较,在造模过程中,同时给予丙磺舒30d后,肺功能显著性降低;同时与不同进程组60d比较,给予MRP1抑制剂造模60d后,大鼠的FEV0．3％／FVC差异具有统计学意义。结论：COPD的进程与肺支气管上皮MRP1功能的改变具有一定的相关性。肺支气管上皮细胞MRP1的功能随着COPD进程逐渐下调,抑制MRP1的功能会进一步加重COPD的肺功能下降,使病情加重。     

超高效液相色谱法测定大鼠血浆中异硫氰酸烯丙酯含量及药动学参数

目的:建立大鼠血浆中异硫氰酸烯丙酯含量测定的UPLC法,并用该法研究大鼠静脉注射异硫氰酸烯丙酯后的药动学。方法:大鼠血浆样品,采用乙腈沉淀蛋白分析。色谱柱:BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7μm);流动相:甲醇-水(60∶40);流速0.2 mL·min-1;柱温30℃;紫外检测波长247 nm;大鼠静脉注射异硫氰酸烯丙酯20 mg·kg-1后,于不同时间点取血测定血浆中药物浓度并估算其药动学参数。结果:异硫氰酸烯丙酯在0.156～40.0μg·mL-1范围内,其线性关系良好,r=0.998 9,定量下限为0.156μg·mL-1,提取回收率为91.34%。大鼠静脉注射20 mg·kg-1异硫氰酸烯丙酯后其消除半衰期为77.36 min。结论:本方法灵敏度高,操作简便、快速、准确,可用于大鼠血浆中异硫氰酸烯丙酯的测定及药动学研究。     

化痰降气胶囊对COPD模型大鼠支气管上皮细胞中多药耐药相关蛋白1功能和表达的影响

目的 通过建立慢性阻塞性肺疾病（COPD)大鼠模型,观察化痰降气胶囊对支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1（MRP1）功能和表达的影响,探讨化痰降气胶囊治疗COPD的作用机制。方法 雄性Wistar大鼠24只随机分为正常对照组、模型组和化痰降气胶囊组（简称化痰降气组)。除正常对照组外,其余各组采用烟、二氧化硫定量熏吸并复合木瓜蛋白酶雾化吸入法,建立COPD大鼠模型;观察化痰降气胶囊治疗后肺功能指标、支气管肺泡灌洗液细胞计数与分类、大鼠的肺组织病理学改变,并采用ELISA方法测定肺组织中白三烯C4 （LTC4）的浓度及免疫组化测定肺支气管上皮MRP1的表达。结果 (1)模型组大鼠的肺顺应性（CL）、第0.3秒用力呼气容积（FEV0.3%)/用力肺活量(FVC)、呼气流量峰值、最大呼气中段流量较正常对照组显著降低（P<0.05)。化痰降气组上述肺功能指标较模型组明显升高(P<0.05)。(2)模型组气道炎症加重, 且出现明显肺气肿;化痰降气组也出现了炎症和肺气肿, 但程度较轻。(3)与正常对照组比较,模型组及化痰降气组肺组织中的LTC4均显著升高(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组中肺组织的LTC4显著下降(P<0.05)。(4)与正常对照组比较,模型组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著降低(P<0.01)。与模型组比较,化痰降气组肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著增强(P<0.05)。结论 化痰降气胶囊可能通过影响慢性阻塞性肺疾病状态下MRP1功能和表达,从而达到有效减轻COPD大鼠的气道炎症, 延缓肺功能恶化等COPD发生和发展的目的。     

临床常用降糖药物的不良反应及防治策略

随着糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者的日益增多,采用降糖药物治疗的同时会存在诸多的药物不良反应(ADR),对患者影响甚大,尤其是特殊人群,易造成生活质量的下滑和经济上的巨大损失。本文从介绍临床常用的各种类型降糖药物的ADR开始,提出如何使用不同类型的降糖药物对DM进行治疗,以及怎样避免ADR对患者的影响等措施,从而营造出健康、安全、和谐的生活方式。     

慢性阻塞性肺疾病与多药耐药相关蛋白1的相关性研究进展

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是肺部常见疾病,与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关,其中炎症反应和氧化应激等扮演着重要的角色。多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)是一种依赖于ATP介导底物跨膜转运蛋白。近年来研究表明,MRP1在肺部广泛表达,且有着特定的生物学功能,如介导外源性有毒物质的外排,内源性物质炎症介质LTC4及GSH等的跨膜转运,其生物学功能的改变在COPD的发生和发展过程中发挥着重要作用。通过了解MRP1在肺部疾病的功能,有利于进一步理解MRP1和COPD的关系,从而更好地指导COPD的治疗。     

酚红外排水平评价肺上皮细胞多药耐药相关蛋白1的功能

目的：以酚红为多药耐药相关蛋白1（MRP1）的底物,丙磺舒为其抑制剂,通过酚红的外排水平建立评价肺上皮细胞MRP1的功能的方法。方法：小鼠静脉注射酚红（250mg/kg）,30min后进行肺泡灌洗,测定灌洗液中酚红的浓度,并以雾化吸入MRP1特异性抑制剂丙磺舒（150mg/kg）作为对照,观察给予抑制剂前后灌洗液中酚红浓度及灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值的变化,来评价小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。结果：与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒后,血浆中酚红浓度无显著性差异,但与未给予抑制剂相比,给予MRP1抑制剂丙磺舒60min后,其肺泡灌洗液中酚红浓度、灌洗液中酚红浓度/血浆中酚红浓度比值显著性降低。结论：肺泡灌洗液中酚红的外排水平反映小鼠肺上皮细胞MRP1功能的改变。     

脂多糖诱导的慢性阻塞性肺病模型大鼠肺支气管上皮MRP1功能分析

目的：分析脂多糖（LPS）造模方法对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠的肺支气管上皮细胞多药耐药相关蛋白1（MRP1）功能的影响。方法：利用LPS造模方法制备COPD模型大鼠,设置正常对照组、造模14d组和造模28d组,分别测定其呼吸功能;以酚红外排水平评价大鼠肺支气管上皮MRP1的功能;同时采用免疫组化法分析各组大鼠肺支气管上皮MRP1的表达。结果：与正常对照组比较,进程中大鼠的各项肺功能指标明显下降;静脉给予酚红后其BALF中酚红浓度与血浆酚红浓度的比值降低;其肺支气管上皮MRP1蛋白表达显著性降低。结论：LPS造模方法制备COPD模型大鼠,其肺支气管上皮MRP1的功能随着COPD进程逐渐下调。     

HPLC-UV法测定人血浆中青霉胺浓度

目的建立人血浆中青霉胺浓度的HPLC测定方法,并用于人体药动学试验中青霉胺血药浓度测定。方法取血浆样品加入衍生化试剂DTNB,室温反应5 min,10%的高氯酸溶液沉淀蛋白,上清液进样分析。色谱柱:岛津VP-ODS C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲溶液(12:88),流速1.0 ml.min-1,检测波长320 nm,柱温25℃,进样量20μl。结果血浆中青霉胺在0.1～10.0 mg.L-1浓度范围内线性关系良好,定量下限为0.1 mg.L-1(S/N>10,n=5;RSD=6.4%,准确度为94.2%),在低、中、高浓度血浆样品日内、日间RSD均小于6%,准确度在92%～96%范围内,提取回收率>60%,且稳定(RSD<10%),符合生物样品分析要求。结论所建立的HPLC法样品前处理简便、操作简便、能满足青霉胺在人体内的药代动力学研究。     

HPLC测定丹葛胶囊剂中葛根素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定丹葛胶囊剂中葛根素含量的测定方法。方法:色谱柱为Hypersil ODS(4.0mm×250mm,5μm);以甲醇-水-醋酸(25:75:1)为流动相;流速:1.0ml/min;检测波长:270nm进行实验。结果:线性回归方程为Y=1.738×106X+4404.5,相关系数r=0.9998,葛根素在0.050~2.00μg范围内呈线性,平均回收率为99.83%,RSD为1.52%。结论:本方法准确可靠,稳定性、重现性好,适用于丹葛胶囊剂的含量测定。     

大鼠血浆中的新藤黄酸HPLC测定及其药代动力学研究

目的建立测定大鼠血浆中新藤黄酸浓度的HPLC方法,并用于新藤黄酸在大鼠体内的药代动力学研究。方法以藤黄酸为内标,建立大鼠血浆中新藤黄酸的HPLC测定方法。采用该方法测定大鼠单剂量静脉注射1、2、4 mg.kg-1新藤黄酸后不同时间点大鼠血浆中的新藤黄酸的浓度,对其血药浓度-时间采用BABP 3.0软件拟合,计算药动学参数。结果血浆中新藤黄酸在0.07～18.0 mg.L-1浓度范围,其线性关系良好(r=0.999),定量下限为0.07 mg.L-1,提取回收率分别为大于70%,其日内、日间RSD均小于10%。新藤黄酸以1、2和4 mg.kg-1静脉给药后,在大鼠体内的T12分别为(43.61±0.61)、(46.07±2.11)和(46.73±1.14)min,AUC0-t分别为(158.52±6.27)、(211.13±9.33)和(361.37±14.97)min.mg.L-1。结论所建立的HPLC法样品前处理简便、操作简便、能满足新藤黄酸在大鼠体内的药代动力学研究。