呼吸道合胞病毒PCR序列分析方法的建立和应用

目的：探讨呼吸道合胞病毒ｃＤＮＡ（ＲＳＶ ｃＤＮＡ）序列分析的方法。方法：将ＰＣＲ扩增与核酸序列分析技术相结合,以γ＾３２Ｐ－ＡＴＰ标记Ｔ７Ｐｒｏｍｏｔｅｒ为测序引物,Ｔａｑ ＤＮＡ聚合酶直接测序。结果：测序梯清晰,可读性好。．ＲＳＶ ＮＳ和Ｎ基因区虽较稳定,但仍有颠换突变。结论：ＲＳＶ的变异性决定了它对人类的反复感染,ＰＣＲ测序方法较简便,在临床标本的检测和变异的观察中有重要意义。     

酷似血吸虫病的结核性多发性浆膜炎一例

【病例】男，22岁。主因间断发热、胸痛10个月，腹胀伴下肢水肿1个月入院。患于10个月前无明显诱因出现发热，体温波动在38℃左右，午后明显，右侧胸痛与呼吸有明显关联，深吸气时加重。X线胸透示右侧胸腔少量积液。院外诊断考虑感染、结核病不除外，予头孢菌素类抗生素静脉滴注15天，后加服异烟肼（雷米封）0．3g、利福平0．45g、乙胺丁醇0．75g，每日1次。     

PXJ-41/M2-1转染人肺腺癌PAa细胞及其稳定表达

目的探讨外源性呼吸道合胞病毒(RSV)M2-1基因在人肺腺癌PAa细胞中获得稳定表达的可行性.方法将携有RSV M2-1基因的真核表达载体PXJ-41/M2-1,在脂质体介导下,导入人肺腺癌PAa细胞株.通过G418筛选获得阳性克隆,并继续培养,用RT-PCR及免疫组织化学方法检测M2-1在人肺腺癌PAa细胞内的稳定表达情况.结果经RT-PCR方法扩增到M2-1 620bp特异性条带.免疫组织化学证实,转染PXJ-41/M2-1后的PAa细胞内有M2-l蛋白的表达.结论在脂质体介导下,M2-1可导入PAa细胞内并获得稳定表达.     

PXJ-41/M2-1转染人肺腺癌PAa细胞及其稳定表达

目的探讨外源性呼吸道合胞病毒(RSV)M2—1基因在人肺腺癌贴PAa细胞中获得稳定表达的可行性。方法将携有RSVM2—1基因的真核表达载体PxJ41／M2—1，在脂质体介导下，导入人肺腺癌PAa细胞株。通过以18筛选获得阳性克隆，并继续培养，用RT—PCR及免疫组织化学方法检测M2—1在人肺腺癌PAa细胞内的稳定表达情况。结果经RT—PCR方法扩增到M2—1620bP特异性条带。免疫组织化学证实，转染PxJ41／M2—1后的PAa细胞内有M2—1蛋白的表达。     

新兵呼吸道感染肺炎支原体快速检测的结果分析

目的应用快速检测方法对出现呼吸道症状的新兵行肺炎支原体（MP）抗原和抗体的检测,并探讨其临床意义。方法收集北京部队5个营区新兵中出现咳嗽、咳痰、流涕、咽痛等呼吸道症状的398例患者的咽部分泌物,应用快速培养法检测MP抗原,应用间接免疫荧光法（IFA）对腋温≥37．3℃或抗原阳性的新兵MP的IgM抗体进行检测,分析检测结果。结果MP抗原阳性率4．27％;快速培养法检测MP抗原与IFA法检测同一患者相应的IgM抗体结果的差异有统计学意义（P〈0．05）;不同籍贯、不同营区的新兵MP恢复期IgM抗体检测结果差异无统计学意义（P〉0．05）。结论MP是成人呼吸道感染的重要病原体,快速培养法、IFA法能够提供早期诊断和治疗的依据,可以作为诊断MP感染的优选检测方法。     

大剂量糖皮质激素上调血管内皮细胞MR表达的意义

目的 观察UPS和Dex对人脐静脉内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况,以探讨糖皮质激素作用的新机制.方法 利用内毒素脂多糖LPS“致伤”血管内皮细胞,用地塞米松进行“治疗”,然后通过RT-PCR和免疫组化的方法检测血管内皮细胞盐皮质激素受体(MR)的表达情况.结果 内皮细胞本身能明显表达MRmRNA,运用不同浓度Dex和100 ng/mlLPS刺激后,可使人脐静脉内皮细胞内MRmRNA表达明显下降,应用大剂量(10-6mol/L)的Dex刺激细胞3h,MRmRNA的表达无明显变化,6h开始有升高,12 h达高峰,24 h回升近刺激前水平.免疫组化的结果与RT-PCR一致.结论 大剂量的DEX( 10-6mol/l)可上调MR的表达,GC引起GR和MR表达的不同变化可能是机体对损伤应激的一种调节机制,表明糖皮质激素作用存在新的机制.     

大剂量糖皮质激素下调血管内皮细胞GR表达的意义

目的观察LPS和Dex对人脐静脉内皮细胞糖皮质激素受体(GR)的表达情况。方法利用内毒素脂多糖LPS"致伤"血管内皮细胞,用地塞米松进行"治疗",然后通过RT-PCR和免疫组化的方法检测血管内皮细胞糖皮质激素受体(GR)的表达情况。结果内皮细胞本身能明显表达GRmRNA,运用不同浓度Dex和100 ng/ml LPS刺激后,可使人脐静脉内皮细胞内GRmRNA表达明显下降,应用大剂量(10-6mol/L)的Dex刺激细胞3h,GRmRNA的表达无明显变化,6 h开始明显下降,12 h达高峰,24 h回升近刺激前水平。结论大剂量的Dex(10-6mol/L)可下调GR的表达,表明严重创伤时血管内皮细胞中糖皮质激素作用存在其他的作用机制。     

呼吸道合胞病毒M2-1蛋白多克隆抗体的制备

目的:制备呼吸道合胞病毒(RSV)M2-1蛋白多克隆抗体, 为进一步研究RSV生物学特性奠定基础。方法:纯化RSV M2-1蛋白, 免疫新西兰家兔, Western blot检测M2-1多克隆抗体效价。结果:Western blot检测可见约48 kD的特异性条带, M2-1蛋白多克隆效价为1:1000。　结论：本实验成功的地制备了RSV M2-1蛋白多克隆抗体。     

基于生物信息学分析方法设计流感病毒A的通用寡核苷酸探针

目的:设计流感病毒A诊断芯片的寡核苷酸(Oligo)探针.方法:利用BLAST软件对流感病毒A的基因序列进行比对,得到有意义的特异序列;用生物学软件Array Designer4.2设计特异性高、Tm值相近、长度均一的Oligo探针.结果:获得10条30 mer的Oligo探针.结论:利用BLAST软件和生物学软件Array Designer4.2设计流感病毒A诊断芯片的探针,可为后期打印成基因芯片,用于流感病毒A的检测打下基础.     

局限性胸膜纤维肿瘤诊治分析

局限性胸膜纤维肿瘤长时间被认为是局限性胸膜间皮瘤,有多种命名,病理证实其源于胸膜间皮下组织细胞,不是间皮细胞本身,多数为良性,预后好,少数为恶性,预后不佳.作者诊治1例,现报告如下.