甲胎蛋白、甲胎蛋白异质体及其比值检测在肝细胞癌诊断中的应用价值研究

目的讨论甲胎蛋白(AFP)、甲胎蛋白异质体(AFP-L3)以及AFP-L3/AFP检测结果在肝细胞癌(HCC)与慢性乙型肝炎(CHB)的鉴别诊断中的临床应用价值。方法回顾性分析65例HCC患者和120例CHB患者血清中AFP、AFP-L3含量及AFP-L3/AFP值;采用耦联小扁豆凝集素(LCA)的微量离心柱分离血清中AFP-L3,然后采用雅培化学发光法进行AFP、AFP-L3检测同时计算AFP-L3/AFP的值。结果 HCC患者血清AFP-L3/AFP平均值0.23远远高于CHB组的0.08,差异有统计学意义(F=52.172,P0.01);HCC受试者工作特征曲线(ROC曲线)面积显示AFP-L3/AFP面积最大,为0.905;当AFP-L3/AFP≥0.15时诊断HCC的敏感度和特异性分别为90.2%、85.4%。结论对HCC的诊断血清AFP-L3/AFP结果优于AFP和AFP-L3单测结果,AFP-L3/AFP对HCC和CHB的鉴别诊断具有重要临床意义。     

低浓度雷公藤甲素联合顺铂对肝癌细胞HepG2活性的影响

目的探讨低浓度雷公藤甲素与顺铂联合用药对人肝癌细胞HepG2活性的影响,及其逆转顺铂耐药的可能机制。方法将人肝癌细胞HepG2分为顺铂单用组和雷公藤甲素加顺铂联合用药组。顺铂单用组分别用浓度为0、2.5、5、10、20、40μg/m L的顺铂处理,联合用药组同时联合低浓度雷公藤甲素(12.5ng/m L)处理HepG2。CCK-8法检测HepG2细胞增殖的抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡率和细胞内P糖蛋白的表达。结果顺铂单用组各浓度(0、2.5、5、10、20、40μg/m L)对肝癌细胞HepG2细胞活力24h的抑制率分别为0、(4.0±1.0)%、(9.7±1.1)%、(29.4±2.4)%、(47.5±2.5)%、(62.9±1.2)%,联合用药组24h抑制率分别为(4.7±1.0)%、(37.1±3.1)%、(44.1±3.5)%、(57.9±3.0)%、(66.9±2.0)%、(74.9±2.0)%,两组比较,细胞活力抑制率差异有统计学意义(P0.01);Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡后发现,顺铂单用组(0、5、10、40μg/m L)诱导HepG2肝癌细胞早期凋亡率分别为(4.3±0.3)%、(8.4±0.3)%、(9.6±0.3)%、(32.3±2.0)%,而联合用药组细胞早期凋亡率分别增加至(9.6±0.4)%、(16.2±0.2)%、(23.2±0.5)%、(53.0±3.6%),两组比较,细胞凋亡率差异有统计学意义(P0.01);PE单染检测P糖蛋白后发现,顺铂单用组(0、5、10、40μg/m L)细胞内P糖蛋白表达率分别为(37.3±0.4)%、(34.2±0.5)%、(30.1±1.1)%、(34.2±2.3)%,无明显变化,而联合用药组P糖蛋白的表达率分别降低至(25.0±1.8)%、(18.6±0.7)%、(8.9±0.3)%、(1.8±0.1)%,两组P糖蛋白表达差异有统计学意义(P0.01)。结论雷公藤甲素与顺铂联合用药可以显著抑制人肝癌HepG2的增殖并诱导凋亡,同时调节HepG2的顺铂耐药性,其作用机制可能与P糖蛋白下调相关,从而对肝癌细胞HepG2发挥抗肿瘤作用。     

刀豆素A诱导人乳腺癌细胞自噬性死亡及其机制

目的：探讨刀豆素A对人乳腺癌细胞MCF-7的杀伤作用及其机制。方法采用MTT法检测不同浓度ConA（concanavalin A）处理MCF-7细胞后,MCF-7细胞的增殖情况,并检测自噬标记蛋白LC-3域,加入自噬特异性抑制剂3-甲基腺嘌呤（3-MA）后再检测MCF-7细胞对ConA的敏感性。利用基因沉默技术,抑制BNIP3的表达,再检测ConA处理后MCF-7细胞的增殖和自体吞噬。结果 ConA可显著抑制MCF-7细胞的增殖（P〈0.01）,并诱导其发生自噬性死亡。ConA处理后MCF-7细胞的BNIP3显著增高（P〈0.05,P〈0.01）,利用小RNA抑制BNIP3的表达后,ConA对MCF-7的增殖抑制作用降低（P〈0.01）,并抑制了ConA诱导的自体吞噬效应。结论刀豆素A通过上调BNIP3的表达诱导人乳腺癌细胞发生自噬性死亡。     

青蒿琥酯增强吉西他滨的抗胰腺癌活性

目的 探讨青蒿琥酯对吉西他滨化疗胰腺癌的辅助治疗作用并研究其机制。方法 MTT法检测胰腺癌细胞系Capan-2在青蒿琥酯和不同浓度吉西他滨处理下的细胞活力。Western blot检测吉西他滨和青蒿琥酯对Capan-2细胞FOXO1、Noxa、Bim表达水平,细胞色素C、Smac/DIABLO从线粒体中的释放量及caspase-9、caspase-3活化水平的影响。流式细胞术检测Capan-2细胞的线粒体膜电位和凋亡率。结果 青蒿琥酯辅助治疗明显提高吉西他滨对Capan-2细胞的杀伤活性。青蒿琥酯处理能显著促进Capan-2细胞FOXO1的表达,转染FOXO1小干扰RNA （FOXO1 siRNA）后,青蒿琥酯对吉西他滨的辅助治疗效果受到明显抑制。青蒿琥酯联合吉西他滨能显著诱导Capan-2细胞中Noxa和Bim的过表达,线粒体膜电位的降低,细胞色素C、Smac/DIABLO的释放,caspase-9、caspase-3的活化及凋亡的发生。转染FOXO1siRNA后,青蒿琥酯联合吉西他滨对Capan-2细胞的凋亡诱导途径受到显著抑制。结论 青蒿琥酯可上调FOXO1的表达,增强吉西他滨对胰腺癌细胞的凋亡诱导活性。